Producción masiva de Romanomermis iyengari(Nematoda: Mermithidae) y su aplicación en criaderos de anofelinos en Boa Vista (Roraima), Brasil

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Producción masiva de Romanomermis
iyengari (Nematoda: Mermithidae)
y su aplicación en criaderos de anofelinos
en Boa Vista (Roraima), Brasil
Alberto Santamarina Mijares 1 y Antonio Carlos Bellini 2

                                         RESUMEN           Para desarrollar la producción masiva del nemátodo Romanomermis iyengari Welch, se
                                                           llevó a cabo el diseño y montaje de una bioplanta en las instalaciones de la Universidad Fede-
                                                           ral del Estado de Roraima, Brasil, tras un convenio con la Secretaría de Salud del mencionado
                                                           estado. El objetivo de este trabajo fue establecer el proceso básico de cría masiva del parásito
                                                           para su posterior aplicación en criaderos de anofelinos. Se obtuvieron 68 cultivos por cada ciclo
                                                           de siete días, con un total de 272 cultivos por mes. Antes de los tratamientos de campo se rea-
                                                           lizaron pruebas de laboratorio en las que se comprobó la gran susceptibilidad de las larvas de
                                                           anofelinos a la infestación por R. iyengari, con tasas de parasitismo de 71 a 98%. Para eva-
                                                           luar la capacidad parasitaria de R. iyengari en condiciones de campo, se seleccionaron 12 cria-
                                                           deros naturales de anofelinos, con áreas que oscilaron entre 50 y 450 m2, en los que se observó
                                                           la presencia de larvas de mosquitos de las especies Anopheles albitarsis Lynch-Arribálzaga
                                                           y Anopheles rondoni Neiva-Pinto, con densidades de 34 a 66 larvas/m2. Para la dispersión
                                                           del biolarvicida en los 12 criaderos se utilizó una bomba costal manual de fabricación nacional
                                                           a una presión de dos atmósferas y se aplicó una dosis de 2 000 preparásitos/m2. Siete días des-
                                                           pués de los tratamientos se observó una marcada reducción (85 a 97%) de las poblaciones de
                                                           anofelinos. Los resultados obtenidos demostraron la posibilidad de utilizar R. iyengari para
                                                           controlar las poblaciones larvarias de ambas especies de anofelinos.

   El estado de Roraima, situado en el                     mente las larvas de anofelinos. Du-                  En el estado de Roraima, a pesar de
extremo septentrional de Brasil, tiene                     rante los meses de octubre a marzo                los esfuerzos de vigilancia y control,
clima tropical, con una temperatura                        (época seca), los criaderos anterior-             en 1995 se registraron más de 39 000
media de 27 oC y un régimen de preci-                      mente formados se estabilizan. Más de             casos de malaria, lo cual representa el
pitaciones entre abril y septiembre que                    60% de la superficie de Brasil está su-           mayor índice parasitario anual del
permite la formación de numerosos                          jeta a la malaria, que en el estado de            país (150,9/1 000 habitantes) y revela
criaderos en los que proliferan masiva-                    Roraima es transmitida por Anopheles              el impacto de la enfermedad en la po-
                                                           darlingui Root, cuyos criaderos funcio-           blación. En 1996, a pesar de la dismi-
                                                           nan como focos permanentes en la                  nución del número de casos de mala-
1   Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kouri”, La
    Habana, Cuba. Toda la correspondencia debe ser
                                                           época seca, y por Anopheles albitarsis            ria en 10,3%, el estado de Roraima
    enviada a Alberto Santamarina Mijares, Instituto       Lynch-Arribálzaga, que es más abun-               siguió registrando el mayor índice
    de Medicina Tropical “Pedro Kouri”, Autopista          dante en la época de lluvias, cuando se           parasitario anual del país: 143/1 000
    Novia del Mediodía km 6, e/ Autopista Nacional y
    Carretera Central, La Lisa, C.P. 11500, Ciudad de la   amplían sus criaderos. La mayoría                 habitantes (Fundación Nacional de
    Habana, Cuba. Correo electrónico: santamarina@         (95%) de los casos de malaria registra-           Salud, datos no publicados).
    ipk.sld.cu
2   Secretaría de Estado de Salud, Boa Vista, Roraima,     dos en Brasil ocurren en la Amazonía                 Durante cuatro décadas se ha estado
    Brasil.                                                Legal (1).                                        utilizando el DDT en la lucha contra

Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 7(3), 2000                                                                                               155
los anofelinos (2). Su uso excesivo, al        R. iyengari para regular las poblaciones          25 mL en depósitos plásticos de 44 3
igual que el de otros insecticidas efica-      de larvas de mosquitos de diversas es-            37 3 7 cm que contenían, cada uno,
ces contra larvas y mosquitos adultos,         pecies (12) y su capacidad de estableci-          3 500 mL de agua corriente con pH 5,5.
como los organofosforados, carbama-            miento y reciclaje después de la aplica-          Siete días después de la infestación,
tos y piretroides, ha tenido como con-         ción (13).                                        una vez que las larvas se encontraban
secuencias la toxicidad para los huma-            Para utilizar R. iyengari en el trata-         en estadio IV, se trasladaron a ocho ta-
nos, la persistencia en el ambiente y la       miento de criaderos naturales de lar-             mices de 50 3 30 3 5 cm, forrados con
aparición de resistencia en los insectos       vas de anofelinos fue necesario esta-             tela de malla, que se colocaron en de-
vectores (3). Por ello se hace necesaria       blecer previamente la producción                  pósitos plásticos de 60 3 40 3 7 cm con
la búsqueda de nuevas alternativas             masiva del parásito. En el presente tra-          agua para proceder a la recolección de
ecológicamente más asimilables para            bajo se describen los resultados obteni-          los nemátodos posparasitarios tras la
el control de las plagas de vectores y         dos en la producción masiva de R.                 emergencia de las larvas hospederas.
cuyas acciones sean más efectivas y            iyengari y su aplicación en 12 criaderos          Una vez concentrada la biomasa de
duraderas (4).                                 naturales de Anopheles rondoni Neiva-             nemátodos, fueron lavados con agua
   El control biológico, basado en la          Pinto y A. albitarsis en el municipio de          destilada. Para su siembra se utiliza-
utilización de agentes naturales para la       Boa Vista (Roraima), Brasil.                      ron agujas entomológicas ligeramente
reducción de los vectores de enferme-                                                            curvas en su extremo distal, con las
dades humanas y animales, ha consti-                                                             cuales se depositaron los nemátodos
tuido en los últimos años una de las           MATERIALES Y MÉTODOS                              hembras y machos en recipientes plás-
alternativas de mayor importancia en                                                             ticos de 30 3 20 3 10 cm que contenían
los programas de lucha antivectorial.             Para desarrollar la producción ma-             una capa de 3 cm de arena de río la-
Algunas especies de nemátodos de la            siva de R. iyengari se llevó a cabo el di-        vada y esterilizada y una capa de agua
familia Mermithidae han demostrado             seño y montaje de una bioplanta en las            destilada de 2 mm para facilitar el des-
ser eficaces en el control de las larvas       instalaciones de la Universidad Fede-             censo de los nemátodos al fondo de los
de mosquitos en condiciones de labo-           ral del Estado de Roraima, tras un con-           cultivos. Finalmente el agua fue de-
ratorio y de campo (5–7). Estudios rea-        venio con la Secretaría de Salud del              cantada y los cultivos ligeramente
lizados con la especie Romanomermis            mencionado estado. El programa se                 húmedos fueron cubiertos hermética-
iyengari Welch han evidenciado que             desarrolló entre el 20 de abril y el 20 de        mente y almacenados durante 6 sema-
este nemátodo es capaz de reducir las          agosto de 1998 y estuvo destinado a la            nas a temperatura ambiente.
altas densidades poblacionales de lar-         obtención de los parásitos necesarios                Antes de los tratamientos de campo
vas de mosquitos de los géneros Ano-           para el tratamiento inicial de un área            se realizaron pruebas de laboratorio
pheles, Culex y Aedes en condiciones de        de 3 488 m2 de criaderos de anofelinos.           para determinar la susceptibilidad de
campo (8–10).                                     Para obtener la biomasa de nemáto-             las larvas de A. albitarsis y A. rondoni al
   El estado infectivo (preparasitario)        dos necesaria se formaron 447 grupos,             parasitismo por R. iyengari, así como el
de este mermítido es de corta vida y           cada uno con 1 200 larvas de mosqui-              efecto de las aguas de los criaderos
debe encontrar un hospedero ade-               tos de la especie Culex quinquefasciatus          sobre la viabilidad de los preparásitos.
cuado (larva de mosquito) en las 72 a          Say en estadio II de desarrollo, que              Con este fin, en criaderos del munici-
96 horas siguientes a la eclosión de los       fueron expuestos a 2 682 000 prepará-             pio de Boa Vista se recolectaron 800
huevos. El preparásito penetra en la           sitos infectivos de R. iyengari, en una           larvas de ambas especies de anofelinos
larva perforando la cutícula con su es-        proporción de cinco preparásitos por              en estadio I–IV que fueron trasladadas
tilete. Después de un desarrollo para-         larva. Con este fin, previamente se               al laboratorio y distribuidas en cuatro
sitario de cinco a seis días a una tem-        inundaron con agua destilada ocho cul-            grupos según su estadio de desarrollo.
peratura de 29 oC en el interior del           tivos que contenían huevos de R. iyen-            Por cada estadio se formaron 3 grupos
hospedero, emergen de las formas               gari, con el objetivo de inducir la eclo-         de 50 larvas cada uno, con un total de
posparasitarias, que mata a las larvas         sión de los huevos y la emergencia de             12 grupos y 600 larvas. Las larvas se
hospederas en estadio IV de desarro-           las formas infectivas. Tres horas des-            colocaron en depósitos plásticos de
llo. Las formas posparasitarias solo re-       pués se recolectó y determinó el volu-            60 3 40 3 7 cm, en aguas de los criade-
quieren un sustrato húmedo para                men de inóculo (agua de los cultivos              ros con pH 7 y conductividad de 1 µS.
mudar y reproducirse.                          que contenían los preparásitos infecti-           Dos cultivos de R. iyengari fueron inun-
   R. iyengari ha sido utilizado con           vos). Mediante el método de dilución              dados con agua destilada, calculán-
éxito contra varias especies de anofeli-       volumétrica (14) se calculó que el inó-           dose por el método de dilución volu-
nos. Los resultados de algunas investi-        culo contenía un total de 4 millones              métrica (14) que contenían un total de
gaciones han mostrado elevadas tasas           de preparásitos infectivos y se prepa-            950 000 preparásitos. Con una pipeta
de parasitismo (85 a 100%) con dosis           raron las dosis de aplicación de 6 000            de 25 mL se aplicó una dosis de 250
de aplicación de 2 000 preparásitos/m2         preparásitos por cada grupo de 1 200              preparásitos a cada grupo de 50 larvas
(11). Otros estudios de campo han              larvas de mosquitos. La infestación de            (razón 5:1). Un grupo de 50 larvas en
permitido comprobar la efectividad de          las larvas se realizó con una pipeta de           estadio II no expuestas a los preparási-

156              Santamarina y Bellini • Producción masiva de R. iyengari y aplicación en criaderos de anofelinos en Boa Vista (Roraima), Brasil
tos sirvió como grupo de control.                     cie de los criaderos con una bomba cos-                     das entre los diferentes estadios larva-
Transcurridas 72 horas, en cada grupo                 tal manual de fabricación nacional                          rios en los experimentos de laboratorio
se tomaron muestras de 25 larvas que                  (Brasil), a una presión de dos atmósfe-                     y entre los diferentes criaderos en los
fueron disecadas y examinadas bajo                    ras y a una dosis de 2 000 preparásitos/                    estudios de campo mediante análisis
un microscopio estereoscópico para                    m2. La temperatura del agua de los                          de varianza (ANOVA), seguido de la
determinar la infestación media (nú-                  criaderos en el momento de las aplica-                      prueba de Duncan. Para calcular los
mero medio de parásitos por larva)                    ciones varió entre 35 y 37 oC. Como                         porcentajes de reducción de larvas en
y la tasa de parasitismo (número de                   control se tomó un criadero con un                          cada criadero se utilizó la siguiente
larvas parasitadas dividido por el                    área de 250 m2 que no fue tratado con                       fórmula: [(valor final 2 valor inicial)/
número de larvas examinadas y multi-                  R. iyengari.                                                valor inicial] 3 100, donde los valores
plicado por 100). También se recolecta-                  En cada criadero, 72 horas después                       inicial y final son, respectivamente, los
ron en diferentes criaderos naturales                 de los tratamientos, se recolectaron                        registrados antes y 7 días después de
muestras de larvas de anofelinos cuyo                 muestras de 100 larvas de todos los es-                     las aplicaciones de R. iyengari.
examen reveló la ausencia de parasi-                  tadios que fueron disecadas y exami-
tismo natural.                                        nadas con agujas entomológicas bajo
   La aplicación de R. iyengari en los                un microscopio estereoscópico para                          RESULTADOS
criaderos naturales se realizó entre el               determinar la infestación media y la
23 de julio y el 12 de agosto de 1998.                tasa de parasitismo. Siete días después                        El proceso básico de cría masiva
Las condiciones climáticas que se ob-                 de las aplicaciones se recolectaron                         permitió obtener 68 cultivos por cada
servaron en estos meses se caracteriza-               muestras de larvas en cada criadero                         ciclo de 7 días, con un total de 272 cul-
ron por altas temperaturas (33 a 36 oC                para determinar los porcentajes de re-                      tivos por mes. Los lotes de cultivos de
durante el día), 68 a 75% de humedad                  ducción de larvas. Para determinar la                       nemátodos almacenados durante 6 se-
relativa y fuertes precipitaciones, las               abundancia de larvas de mosquito y la                       manas produjeron el inóculo necesa-
cuales, junto con la topografía del te-               presencia de insectos acuáticos en cada                     rio, con un rendimiento de aproxima-
rreno y la vegetación local, contribu-                criadero se utilizó un colector de lar-                     damente 250 000 preparásitos por
yeron a la formación de numerosas                     vas de 20 cm de diámetro y 20 cm de                         cultivo.
masas de agua que representan poten-                  profundidad, con un mango de 2 m de                            En el cuadro 1 se muestran las carac-
ciales criaderos naturales y hábitats                 longitud (15).                                              terísticas ecológicas de los 12 criaderos
para la reproducción masiva de anofe-                    Los valores de la infestación media                      tratados y del criadero de control. Te-
linos, en los que las densidades pobla-               de las larvas examinadas tanto en los                       nían áreas de 50 a 450 m2 y una pro-
cionales larvarias alcanzan su valor                  experimentos de laboratorio como en                         fundidad de 10 a 29 cm, contenían
máximo durante la época seca (octu-                   los estudios de campo no presentaron                        aguas limpias de lluvia con pH de 5 a
bre a marzo), o al final de la misma si               distribución normal, por lo que fueron                      5,5 y conductividad de 1 µS, y poseían
existe suficiente agua disponible.                    sometidos a transformación cuadrá-                          una variada vegetación flotante o
   Para estudiar los efectos de R. iyen-              tica. Dichas medias fueron compara-                         emergente, con hojas aéreas, como Pis-
gari sobre las larvas de anofelinos se se-
leccionaron 13 criaderos naturales loca-
lizados en un área de labrado a 25 km
de la ciudad de Boa Vista, capital del
estado de Roraima. Antes del trata-                   CUADRO 1. Características ecológicas de un criadero de control y de 12 criaderos natu-
miento se procedió a la caracterización               rales de larvas de Anopheles albitarsis y A. rondoni en estadio I–IV tratados con Romano-
                                                      mermis iyengari. Boa Vista (Roraima), Brasil, 1998
ecológica y al estudio entomológico de
los criaderos. Para tratar 12 criaderos                                  Área                                                      Profundidad   Temperatura
con un área total de 3 488 m2 se utili-               Criaderoa          (m2)                        Vegetación              pH        (cm)         (oC)
zaron 25 cultivos de nemátodos pro-
ducidos en la bioplanta, que fueron                       1                60         Algas verdes y jacintos de agua        5         10            35
                                                          2                72         Algas verdes y Pistia stratiotes       5         20            35
inundados con agua destilada para la                      3               320         Algas verdes y Pistia stratiotes       5         25            36
obtención de los preparásitos infecti-                    4               400         Algas verdes y jacintos de agua        5         15            35
vos. Mediante dilución volumétrica                        5                50         Algas verdes y Eichornia crassipes     5         15            36
(14), se calculó el número de preparási-                  6                75         Algas verdes y Eichornia crassipes     5,5       20            36
                                                          7               380         Algas verdes y Pistia stratiotes       5         20            36
tos infectivos (13 millones) proveniente
                                                          8               420         Algas verdes y Eichornia crassipes     5,3       25            36
del inóculo de los cultivos (26 litros).                  9               421         Algas verdes y Eichornia crassipes     5,2       28            37
Las diluciones finales se realizaron                     10               405         Algas verdes y Pistia stratiotes       5         29            36
antes de las aplicaciones, para lo cual                  11               435         Algas verdes y Eichornia crassipes     5         28            35
se utilizó el agua de los mismos criade-                 12               450         Algas verdes y Eichornia crassipes     5         29            35
                                                       Control            250         Algas verdes y jacintos de agua        5,4       27            35
ros. Los preparásitos infectivos se apli-
caron directamente en toda la superfi-                a Todos   los criaderos tenían una conductividad de 1 µS.

Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 7(3), 2000                                                                                                 157
CUADRO 2. Infestación media y tasa de pa-                        (cuadro 2). Las tasas de parasitismo                            97%. Las larvas en estadio IV demos-
rasitismo en larvas de Anopheles albitarsis                      encontradas fueron indicativas del nú-                          traron ser menos susceptibles al ata-
y A. rondoni en estadio I–IV tras la aplica-                     mero de larvas de mosquito suprimi-                             que de los preparásitos invasores de
ción de Romanomermis iyengari a dosis de
                                                                 das por el tratamiento, como larvas in-                         R. iyengari.
5 preparásitos por larva en el laboratorio.
Boa Vista (Roraima), Brasil, 1998                                fectadas que nunca progresaron a la                                El muestreo realizado en los 12 cria-
                                                                 fase de pupa. Estos resultados indica-                          deros 7 días después de los tratamien-
Estadio           Infestación                Tasa de             ron que las aguas de los criaderos con                          tos mostró una disminución aguda de
larvario            mediaa               parasitismob (%)        valores de pH 7 y conductividad de                              la abundancia de larvas, con una re-
                                                                 1 µS que se utilizaron en los experi-                           ducción de la densidad larvaria de 94 a
    I                 4,4c                       98
    II                4,2c                       96              mentos de laboratorio no tuvieron un                            97% en los criaderos del grupo A y de
    III               2,7d                       85              efecto adverso detectable sobre la via-                         85 a 89% en los del grupo B. En el cria-
    IV                1,3e                       71              bilidad e infectividad de las formas                            dero de control, por el contrario, se ob-
a Número medio de parásitos por larva.                           preparasitarias de R. iyengari. El exa-                         servó un ligero aumento (7%) de la
b (Número de larvas parasitadas/número de larvas exami-          men de las muestras de larvas de ano-                           población de larvas (cuadro 4). Los
  nadas) 3 100.
c Medias que no difieren significativamente entre sí (F = 0,8;   felinos recolectadas en los criaderos na-                       muestreos realizados en los criaderos
  P = 0,083).                                                    turales no mostró parasitismo natural.                          después de las aplicaciones mostraron
d Media significativamente diferente de las marcadas con
  c (F = 45,2; P = 0,004).
                                                                    Cuando los 12 criaderos se trataron                          la presencia de un gran número de
e Media significativamente diferente de las marcadas con         con una dosis de 2 000 preparásitos/                            insectos acuáticos. Las características
  c y d (F = 44,1; P = 0,005).
                                                                 m2, la infestación media alcanzó valo-                          físico-químicas de las aguas de los
                                                                 res entre 3,1 y 5,0, con tasas de para-                         criaderos no tuvieron efectos adversos
                                                                 sitismo de 89 a 100% (cuadro 3). Los                            sobre la actividad de los preparásitos
                                                                 valores de la infestación media en el                           infectivos y la presencia de vegetación
tia stratiotes Linnaeus y Eichornia crassi-                      grupo de criaderos con predominio de                            no obstaculizó el contacto de los pre-
pes Mart, además de algas verdes, ja-                            larvas jóvenes (grupo A) fueron sig-                            parásitos infectivos con las larvas de
cintos de agua y detritos orgánicos flo-                         nificativamente (F = 43,1; P = 0,004)                           anofelinos.
tantes. El estudio entomológico reveló                           superiores a los de los criaderos del
la presencia de larvas de A. albitarsis y                        grupo B. Las mayores medias de infes-
A. rondoni en estadio I–IV, con densi-                           tación ocurrieron en los estadios más                           DISCUSIÓN
dades que oscilaron entre 34 y 66 lar-                           jóvenes (I, II y III) y en los cinco criade-
vas/m2. En los criaderos 3, 4, 6, 8 y 10                         ros del grupo A se registraron tasas                               La bioplanta de nemátodos loca-
(grupo A) se observó un predominio                               de parasitismo iguales o superiores a                           lizada en las instalaciones de la Uni-
de larvas en los estadios más jóvenes                                                                                            versidad Federal del Estado de Ro-
(I–III) en el momento de las aplicacio-                                                                                          raima, cuyo montaje tuvo un costo de
nes; en los demás criaderos (grupo B:                                                                                            US$ 4 500, permitió desarrollar la pro-
1, 2, 5, 7, 9, 11 y 12), no predominó nin-                       CUADRO 3. Infestación media y tasa de pa-                       ducción masiva de R. iyengari. Los cul-
gún estadio larvario. En cada criadero                           rasitismo en larvas de Anopheles albitarsis                     tivos que se utilizaron para las prue-
había también numerosos insectos                                 y A. rondoni en 12 criaderos naturales trata-                   bas tanto de laboratorio como de
acuáticos componentes de la fauna                                dos con Romanomermis iyengari a dosis de                        campo se inundaron a las 6 semanas
acompañante de las larvas de mosqui-                             2 000 preparásitos/m 2. Boa Vista (Roraima),                    de almacenamiento, con un alto rendi-
tos, tales como estados inmaduros y                              Brasil, 1998                                                    miento en el número de preparásitos
formas adultas del orden Hemiptera                                                   Infestación             Tasa de
                                                                                                                                 infectivos (250 000/cultivo). Otros es-
(Belostoma apache Kirk y Pelocoris femo-                         Criaderos             mediaa            parasitismob (%)        tudios han documentado también el
ratus Barber), orden Odonata (estados                                                                                            gran rendimiento y bajo costo de la
inmaduros y formas adultas de los                                     1                   3,4                     90             producción masiva del nemátodo R.
                                                                      2                   3,2                     89
subórdenes Anisoptera y Zygoptera) y                                                                                             culicivorax (14, 16).
                                                                      3                   4,7c                    98
orden Coleoptera (ninfas y formas                                     4                   4,9c                    99                Una vez que el equipamiento nece-
adultas de las especies Thermoneutes                                  5                   3,4                     90             sario ha sido instalado y se domina la
circunscripta Latreille y Tropisternus la-                            6                   4,8c                    98             técnica de producción de nemátodos,
teralis Fabricius).                                                   7                   3,4                     92             los únicos gastos que supondría la cría
                                                                      8                   4,7c                    97
   Las pruebas de laboratorio revela-                                 9                   3,3                     91
                                                                                                                                 masiva serían el salario de los técnicos,
ron altas medias de infestación y altas                              10                   5,0c                   100             el costo de manutención de los anima-
tasas de parasitismo en las larvas de                                11                   3,1                     92             les (pollos, cobayos, etc.) para la toma
ambas especies de anofelinos en esta-                                12                   3,4                     91             de sangre por las hembras adultas de
dio I a IV. La infestación media de las                          a Número medio de parásitos por larva.                          los mosquitos en el insectario y la ali-
larvas disminuyó significativamente                              b (Número de larvas parasitadas /número de larvas exami-        mentación de las larvas durante los
                                                                   nadas) 3 100.
de los estadios I y II al III (F = 45,2; P =                     c Infestación media significativamente superior (F = 43,1;P =   procesos de infestación (14). Aunque
0,004) y del III al IV (F = 44,1; P = 0,005)                       0,004) a la de los demás grupos.                              en la literatura consultada no hemos

158                        Santamarina y Bellini • Producción masiva de R. iyengari y aplicación en criaderos de anofelinos en Boa Vista (Roraima), Brasil
CUADRO 4. Porcentajes de reducción de larvas de anofelinos en el criadero de control y en                                                dad comparativamente similar en los
los 12 criaderos tratados, siete días después de la aplicación de Romanomermis iyengari.                                                 estadios I y II. Estas formas más jóve-
Boa Vista (Roraima), Brasil, 1998                                                                                                        nes resultaron más vulnerables al ata-
                                                                                                                                         que de los preparásitos de R. iyengari.
                               Antes del tratamiento                       Después del tratamiento
                                                                                                                                         Las larvas en estadios más avanzados
Criaderos                DLa            Número de larvas                DL            Número de larvas               Cambiob (%)         (III y IV) demostraron ser algo menos
       1                 34                     2 040                    5                      300                       285            susceptibles al parasitismo, hecho que
       2                 48                     3 456                    7                      504                       285            podría estar relacionado con el espesor
       3                 66                    21 120                    2                      640                       297            de la cutícula. Las larvas en estadios
       4                 33                    13 200                    2                      800                       294            más jóvenes poseen una menor forma-
       5                 66                     3 300                    8                      400                       288
       6                 66                     4 950                    4                      300                       294
                                                                                                                                         ción de quitina, lo que implica que la
       7                 66                    25 080                    7                    2 660                       289            cutícula sea más débil, haciéndolas
       8                 48                    20 160                    2                      840                       296            mucho más sensibles a la invasión por
       9                 53                    22 313                    6                    2 526                       289            los preparásitos. Otros autores (21)
      10                 51                    20 655                    2                      810                       296            han descrito observaciones similares al
      11                 60                    26 100                    7                    3 045                       288
      12                 49                    22 050                    6                    2 700                       288            exponer larvas de mosquitos en sus
    Control              58                    14 500                   62                   15 500                         7            diferentes estadios de desarrollo a las
a
                                                                                                                                         formas infectivas del nemátodo en
    DL = densidad larvaria (número de larvas/m 2).
b   Cambio porcentual calculado con la fórmula: [(valor final – valor inicial)/valor inicial] 3 100, donde los valores inicial y final   condiciones de laboratorio. Según es-
    son, respectivamente, los registrados antes y 7 días después de la aplicación de R. iyengari.                                        tos autores, las larvas en estadio I y II
                                                                                                                                         mostraron la misma susceptibilidad a
                                                                                                                                         la infestación, mientras que las larvas
                                                                                                                                         en estadio III y IV mostraron una sus-
encontrado datos sobre el costo de                                     reguladores como el dimilín (difluo-                              ceptibilidad menor.
aplicación de los biolarvicidas R. iyen-                               benzurón o TH-6040) y otros ecdisoi-                                 Las aguas de los criaderos utilizadas
gari o R. culicivorax, ello depende de la                              des son venenos que actúan selectiva-                             en condiciones de laboratorio no tu-
frecuencia de aplicación. Dos estudios                                 mente en los insectos, bloqueando los                             vieron efectos negativos sobre la infes-
demostraron que R. iyengari persisitió                                 mecanismos de la écdisis o muda. Estos                            tación de las larvas de anofelinos por
al menos durante 4 y 5 meses consecu-                                  productos, además de su elevado costo,                            R. iyengari. Los valores de pH y con-
tivos, de agosto a diciembre de 1991 y                                 presentan otras limitaciones porque no                            ductividad de estas aguas estuvieron
de septiembre a diciembre de 1991, res-                                penetran con facilidad la cutícula del                            dentro de los intervalos descritos por
pectivamente, después de una aplica-                                   insecto y, por tanto, no han encontrado                           otros autores para la utilización de este
ción por cada criadero (10, 17). Algu-                                 aplicación práctica en el control de in-                          mermítido (8). Las tasas de parasitismo
nas observaciones realizadas 8 meses                                   sectos (19). El Bacillus thuringiensis var.                       obtenidas en los 12 criaderos tratados
después en 9 de los 12 criaderos trata-                                Israelensis De Barjac, aunque consti-                             con R. iyengari fueron muy elevadas,
dos en el estado de Roraima indicaron                                  tuye un larvicida de acción rápida y es                           aunque las mayores tasas se registra-
la presencia de reducidas poblaciones                                  altamente específico contra las larvas                            ron en los criaderos del grupo A (3, 4,
de larvas de anofelinos parasitadas                                    de mosquito, con poco o ningún im-                                6, 8 y 10), hecho que se explica por el
por R. iyengari (A. Martínez, comuni-                                  pacto ambiental adverso, presenta un                              mayor predominio de los estadios lar-
cación personal, 1999).                                                limitado poder residual tras su aplica-                           varios más jóvenes. Sin embargo, en
   En el control de las larvas de mos-                                 ción (10 a 15 días, dependiendo de su                             los criaderos del grupo B (1, 2, 5, 7, 9,
quito se han utilizado otros productos,                                formulación). El temefós es un larvi-                             11 y 12), aunque la composición larva-
como la capa de aceite monomolecular,                                  cida químico que se ha usado durante                              ria era diferente, sin predominio de nin-
pero con efectos indeseables sobre la                                  15 a 30 años para el control de las lar-                          guno de los estadios, las tasas de para-
fauna acompañante (insectos acuáticos,                                 vas de mosquito, principalmente Aedes                             sitismo también fueron elevadas. Estos
peces larvívoros, etc.) del vector. Los                                aegypti Linnaeus. Su efectividad y po-                            resultados de campo, previamente co-
larvicidas reguladores del crecimiento,                                der residual (uno a dos meses) han per-                           rroborados por las pruebas de labora-
incluidas las hormonas juveniles, tam-                                 mitido incluirlo en los programas de                              torio, indicaron que los mejores resul-
bién han sido empleados contra dife-                                   lucha antivectorial, pero se ha descrito                          tados se pueden obtener al realizar las
rentes especies de insectos. La hor-                                   resistencia de A. aegypti al temefós en                           aplicaciones de nemátodos en criade-
mona juvenil metropreno o altosid es                                   16 países, desde Suriname en Sudamé-                              ros en los que predominan poblacio-
un compuesto comercializado en va-                                     rica hasta las Bahamas, a través de las                           nes jóvenes de larvas de mosquitos.
rias formulaciones, cuyo mecanismo                                     islas del Caribe (20).                                            Aunque el parasitismo ocurrió en los
radica en el bloqueo de la metamorfosis                                   Las puebas de laboratorio para de-                             12 criaderos, los estadios larvarios más
del insecto, frente al cual se ha descrito                             terminar la capacidad infectiva de los                            jóvenes fueron los más altamente in-
resistencia en Culex quinquefasciatus Say                              preparásitos de R. iyengari en larvas de                          fectados, hecho que puede ser atri-
y Culex pipiens fatigans Say (18). Otros                               anofelinos mostraron una susceptibili-                            buido no solo a las características del

Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 7(3), 2000                                                                                                                      159
espesor de la cutícula, sino además a la               dante, tampoco interfirió con las posi-            1. El proceso de cría masiva de R. iyen-
conducta particular de las larvas de                   bilidades de contacto entre los prepa-                gari que se desarrolló en la bio-
anofelinos de asumir una posición pa-                  rásitos y las larvas de anofelinos.                   planta localizada en las instalacio-
ralela a la superficie del agua, que au-               Otros autores han indicado (5) que la                 nes de la Universidad Federal del
menta la probabilidad de contacto con                  densa vegetación presente en algunos                  Estado de Roraima permitió la ob-
las formas infectivas del nemátodo,                    sitios tratados probablemente contri-                 tención a bajo costo del inóculo ne-
que también tienden a concentrarse en                  buya a los bajos niveles de parasi-                   cesario para el tratamiento de los 12
la superficie del agua. En liberaciones                tismo, en comparación con otros sitios                criaderos.
experimentales realizadas en criaderos                 naturales con escasa vegetación, en los            2. La susceptibilidad al parasitismo
naturales también se ha descrito que                   cuales la incidencia del parasitismo                  por R. iyengari fue mayor en los pri-
las larvas de anofelinos muestran ma-                  fue elevada. Aunque en la literatura                  meros estadios larvarios (I y II) de
yor susceptibilidad a la invasión por                  consultada no se describe el parasi-                  Anopheles.
las formas preparasitarias jóvenes de                  tismo por R. iyengari en larvas de A. al-          3. La aplicación de una dosis de 2 000
R. iyengari (10).                                      bitarsis y A. rondoni en laboratorio y                preparásitos/m2 de superficie tuvo
   Las poblaciones de anofelinos                       campo, los resultados obtenidos indi-                 como resultado la parasitación de
muestreadas 72 horas y 7 días después                  can que ambas especies de anofelinos                  las larvas en estadio I–IV en los 12
de las aplicaciones permitieron obser-                 son hospederos muy atractivos, con                    criaderos tratados.
var la presencia de numerosos insectos                 una elevada susceptibilidad al ata-                4. Las larvas de A. albitarsis y A. ron-
acuáticos como odonatos, hemípteros                    que de los preparásitos. Una dosis de                 doni fueron altamente susceptibles
y coleópteros en estados ninfales y                    2 000 preparásitos/m2 resultó alta-                   al parasitismo por R. iyengari.
adultos, lo cual demuestra la inocui-                  mente efectiva, produciendo una mar-               5. Las aplicaciones de R. iyengari pro-
dad de este agente biológico para la                   cada reducción de las poblaciones de                  vocaron una gran reducción (85 a
fauna acompañante y su alta especifi-                  larvas de A. albitarsis y A. rondoni en               97%) de las poblaciones de anofeli-
cidad de acción para las larvas de                     los 12 criaderos tratados. En el cria-                nos en los 12 criaderos.
mosquitos. R. iyengari demostró ser                    dero de control se observó un ligero               6. Las evaluaciones anteriores y poste-
tan seguro para el hombre y otros or-                  incremento de las larvas en estadios                  riores al tratamiento demostraron la
ganismos como otros nemátodos mer-                     más jóvenes, hecho que se atribuyó a                  inocuidad de R. iyengari para otros
mítidos utilizados en el control de                    la eclosión de huevos y a la emergen-                 insectos acuáticos, como odonatos,
vectores, como R. culicivorax (22). La                 cia de nuevas larvas (23).                            hemípteros y coleópteros.
profundidad de los criaderos y el pH,                     Los resultados obtenidos indicaron
conductividad y temperatura de las                     que el nemátodo R. iyengari fue efec-
aguas estuvieron dentro de los reco-                   tivo como agente de lucha biológica                  Agradecimientos. Los autores de-
rridos aceptables para el uso de este                  para el control de las poblaciones de              sean agradecer al Instituto de Medicina
parásito (8) y no afectaron adversa-                   larvas de A. albitarsis y A. rondoni en el         Tropical “Pedro Kourí” su asistencia
mente a las tasas de infestación obte-                 estado de Roraima, Brasil.                         técnica y a la Secretaría de Salud y a la
nidas. La vegetación presente en los                      Las conclusiones derivadas de este              Universidad Federal del Estado de Ro-
criaderos tratados, aunque no abun-                    estudio son las siguientes:                        raima el apoyo brindado.

                                                                   REFERENCIAS

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160                   Santamarina y Bellini • Producción masiva de R. iyengari y aplicación en criaderos de anofelinos en Boa Vista (Roraima), Brasil
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                                       ABSTRACT          In order to begin mass producing the nematode Romanomermis iyengari Welch, a bio-
                                                         processing plant was designed and set up on the grounds of Universidad Federal in
                                                         the State of Roraima, Brazil, after reaching an agreement with that State’s Health De-
                   Mass produced                         partment. The objective of this paper was to establish the basic process for mass
           Romanomermis iyengari                         breeding the parasite in order to apply it to anopheline breeding sites. Cultures were
          (Nematoda: Mermithidae)                        obtained at a rate of 68 during every seven-day cycle, making for a total of 272 cul-
                                                         tures a month. Before treatments were applied in the field, laboratory tests were con-
             applied to anopheline                       ducted that showed the great susceptibility of anopheline larvae to infestation by R.
        breeding sites in Boa Vista                      iyengari, with parasitism rates ranging from 71 to 98%. In order to assess the para-
                  (Roraima), Brazil                      sitizing capacity of R. iyengari in actual field conditions, 12 natural anopheline breed-
                                                         ing sites were chosen, each ranging in size between 50 and 450 m2. The species
                                                         Anopheles albitarsis Lynch-Arribálzaga and Anopheles rondoni Neiva-Pinto were de-
                                                         tected there, at densities that ranged from 34 to 66 larvae/m2. The biolarvicide was
                                                         sprayed in all 12 breeding sites with a domestically manufactured pump set at a pres-
                                                         sure of two atmospheres and a dose of 2 000 preparasites/m2. Seven days after treat-
                                                         ments were performed, anopheline populations were markedly reduced (85 to 97%).
                                                         Results obtained point to the feasibility of using R. iyengari to control larval popula-
                                                         tions of both species of anophelines.

Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 7(3), 2000                                                                                                            161
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