UN LARGO VIAJE DESDE DONDE CANTAN LOS COYUYOS HASTA EL APASIONANTE MUNDO DE LOS BIOSENSORES
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UN LARGO VIAJE DESDE DONDE CANTAN LOS COYUYOS HASTA EL APASIONANTE MUNDO DE LOS BIOSENSORES 1 Palabras clave: Biosensores, Nanomateriales, Biomarcadores. Key words: Biosensors, Nanomaterials, Biomarkers. A través de un apasionante recorrido biográfico, el autor nos Gustavo A. Rivas introduce en el fascinante mundo de los biosensores, en el que se usan elementos biológicos (enzimas, tejidos celulares) INFIQC-CONICET. Departamento de Fisicoquí- para detectar y medir cuantitativamente sustancias químicas. mica. Facultad de Ciencias Químicas. Universidad El escrito incorpora sus aventuras por tierras argentinas y Nacional de Córdoba. Ciudad Universitaria. 5000 españolas, así como rememora sus exploraciones en el desierto Córdoba White Sands (Nuevo México) escenario de las andanzas de “Billy the Kid”. Sus discípulos más cercanos reivindican su grivas@fcq.unc.edu.ar/gustavo.rivas@unc.edu.ar generosidad, sensibilidad, vanguardismo, nobleza e integridad en su trabajo como director, así como la experticia que le mereció ser descripto “el abanderado de los biosensores”. 1 Editor asignado: Miguel A. Blesa Gustavo nos relata, en fin, cómo la pasión y la avidez por aprender se constituyeron en el principal motor para recorrer el camino de la investigación. DEL CAMINO RECORRIDO AN- TES DE LA UNIVERSIDAD empinado, con metas importantes, davía me acompaña, fue maestra de siempre ofrece el sabor de la recom- grado, profesora de secundario y di- Inicié mi camino en una ciudad pensa. La vida quiso que fuera hijo rectora de escuela. Fue una docente del sudeste santiagueño, Bande- único y eso me generó un elevado de excelencia, que tuvo el recono- ra, donde las siestas y las tardes de nivel de auto-exigencia del que re- cimiento de toda la comunidad de verano se alegraban con las bellas cién fui consciente con el paso de Bandera por su profunda vocación y melodías que ejecutaban los co- los años. Humberto, mi padre, tra- por la entrega sin límites a su profe- yuyos. Incentivado por mis padres, bajó como empleado de correo y en sión. Sin duda que ese ejemplo tuvo mi vida siempre estuvo ligada a los otros emprendimientos comerciales una gran influencia en mi temprano libros. Ellos me inculcaron el gran y fue un hombre culto, inteligente, interés por la docencia, ejercitada valor del estudio y el sentido de la apasionado por la lectura y un gran en numerosas ocasiones con mis responsabilidad y del compromiso. escritor. Su deseo era que estudiara amigos y compañeros. Me enseñaron que un camino fácil Medicina, pero logré que compren- y sin grandes desafíos es demasiado diera que no tenía vocación de mé- En marzo de 1965, cuando yo llano y que, en cambio, un camino dico. Mi madre, Pierina, quien to- tenía algo más de 4 años, mi madre solicitó permiso para inscribirme
Un largo viaje desde donde cantan los coyuyos hasta el apasionante mundo de los biosensores 83 como alumno “oyente” en el primer vida en la Facultad de Ciencias Quí- fechas porque me encontré con do- grado de mi querida Escuela Provin- micas (FCQ) de la UNC, de la que centes de excelencia. Los profesores cial José J. Berutti Nro. 204. Dado ya nunca me apartaría. En el curso Maiztegui (https://aargentinapcien- que mi rendimiento en el primer bi- de ingreso conocí a María Elena Fe- cias.org/la-aapc-recuerda-a-alber- mestre fue muy bueno, quedé como rro, mi compañera de estudios inse- to-maiztegui/) y Macagno (https:// alumno efectivo y así empecé a en- parable a lo largo de toda la carrera aargentinapciencias.org/publicacio- garzar los primeros eslabones de la y una amiga entrañable. En primer nes/revista-resenas/resenas-tomo- larga cadena de la educación. A los año mis expectativas se vieron satis- 1-no-4-2013/) me deleitaron con sus 11 años comencé la escuela secun- daria en el único colegio que había en la ciudad, el Instituto Secundario Monseñor José Weimann, donde me gradué de bachiller en 1976, como integrante de la segunda promoción. Siempre fui un alumno aplicado, con un enfoque crítico a la hora de estudiar y con gran interés por con- sultar bibliografía de diversas fuen- tes, y esa dedicación se vio recom- pensada con el hermoso premio de llevar la bandera en ambos colegios (Figura 1). En cuarto año del secundario tuve mi primer encuentro con la Química y hubo un amor a primera vista. Conforme fue pasando el tiem- po, me di cuenta cuánto me gustaba y supe que mi futuro estaría ligado a ella. Dudé entre Ingeniería Química y Bioquímica, pero finalmente opté por Bioquímica, y la Universidad Nacional de Córdoba (UNC) fue la elegida porque mis abuelos vivían en la ciudad de Córdoba. DE MIS AÑOS COMO ESTU- DIANTE UNIVERSITARIO En enero de 1977, con sólo 16 años, me trasladé a Córdoba con una maleta cargada de ilusiones. Ese año se había establecido que el in- greso a las universidades sería con examen y cupo, el cual, en Ciencias Químicas había sido de 180 alum- nos para una larga lista de alrededor de 1200 postulantes. Hice el curso de ingreso y estudié con mucha de- dicación y, como siempre, el esfuer- zo rindió sus frutos y pude ingresar en un muy buen lugar. Así comencé Figura 1: Acto de entrega de la bandera de ceremonias al finalizar la a transitar una hermosa etapa de mi escuela primaria. (1971). Escuela Provincial Nro. 204 José J. Berutti
84 CIENCIA E INVESTIGACIÓN - RESEÑAS - TOMO 9 Nº 3 - 2021 DE MIS TIEMPOS DE POST- clases de Física y Química, por la en el país. Así fue como desarrollé DOCTORADO claridad de sus explicaciones y por mi tesis doctoral bajo la dirección de su gran capacidad de transformar, Velia Solís, la cual fue titulada “Estu- mediante ejemplos muy didácticos, dio del comportamiento electroquí- Una vez finalizada la tesis doc- conceptos complejos en conceptos mico de L-Tirosina y sustancias afi- toral, tomé la decisión de continuar fácilmente entendibles. El profesor nes”. En esta tesis se desarrolló una mi carrera científica en la Química Arola me deslumbró con sus clases, novedosa metodología para la deter- Analítica, rama de la Química de por la rigurosidad, la claridad y la minación electroquímica de los pa- gran auge en el mundo, pero muy contundencia con que enseñaba el rámetros cinéticos de la enzima po- deprimida en nuestra universidad formalismo matemático. Y no pue- lifenol oxidasa empleando L-tirosina y en nuestro país. Hacia finales de do dejar de mencionar a mi jefa de como sustrato, lo que dio lugar a mi 1993 obtuve una Beca para Investi- trabajos prácticos de química, María primer trabajo científico, publicado gadores Iberoamericanos otorgada Teresa Brarda, quien, con su caris- en la mejor revista de Química Ana- por la Generalitat Valenciana para ma y el dinamismo de sus clases, me lítica de ese momento (Rivas y Solís, realizar actividades postdoctorales hizo disfrutar la Química General I 1991). Esta metodología se extendió en el Departamento de Química y la Química General II. En segun- al uso de otros sustratos de relevan- Analítica de la Facultad de Quími- do año comencé mis actividades cia clínica y ambiental como L-dopa ca, Universidad de Valencia (Espa- docentes como ayudante-alumno y fenol (Rivas y Solís 1992, 1994). ña) bajo la dirección del Prof. José ad-honorem en el Departamento de Martínez Calatayud, y en enero de Fisicoquímica (DFQ) y en tercer año En el grupo al que me integré 1994 emprendí mi viaje hacia tierras me inicié efectivamente en la do- tuve la alegría de conocer a Mabel españolas. cencia como Ayudante-alumno. Esa Yudi, una excelente compañera y actividad docente fue una excelen- una amiga desinteresada, noble y Las investigaciones estuvieron te inversión del escaso tiempo libre generosa, capaz de alegrarse por dirigidas al desarrollo de estrate- del que disponía mientras cursaba cada uno de mis logros y de ser el gias analíticas para la detección la carrera, porque me dejó una gran soporte firme para los momentos di- de fármacos basadas en el Análisis enseñanza para los años venideros fíciles. Con ella compartimos desde por Inyección en Flujo, técnica que como docente. el escritorio hasta el dictado de asig- concitaba gran atención por aque- naturas de grado y la dirección del llos tiempos. Se diseñaron columnas En 1981, luego de realizar las DFQ. reactivas mediante el uso de matri- prácticas en el Hospital Nacional de ces poliméricas con agentes com- Clínicas, tuve la gran alegría de gra- Con la idea de comenzar a incur- plejantes para la cuantificación de duarme como Bioquímico. Después sionar en el campo de los sensores ácido salicílico por espectroscopía de un pequeño paréntesis por el ser- electroquímicos, temática que me de absorción atómica, y compuestos vicio militar, seguí trabajando como interesaba para mi futuro, trabajé en oxidantes para la determinación de jefe de trabajos prácticos de Quími- el diseño de sensores basados en un noradrenalina por espectroscopía ca General en el DFQ y de Quími- material que, por su gran versatili- de fluorescencia (Rivas y Martínez ca Clínica II en el Departamento de dad y bajo costo, era la “estrella” de Calatayud 1995, Laredo-Ortiz y col. Bioquímica Clínica, y decidí cursar ese momento, el famoso compósito 1997). Otro aspecto interesante que las ocho materias requeridas para de grafito llamado “pasta de carbo- se abordó en esta etapa fue la de- terminar la carrera de Farmacia, la no”. Se propusieron biosensores ob- terminación espectrofotométrica de que logré finalizar en 1984. tenidos mediante la modificación de tioridazina a través de su fotooxida- la pasta de carbono con tejidos de ción on-line. (Rivas et al. 1996). Por DE MI TESIS DOCTORAL diferentes vegetales como fuentes de último, se incursionó en la espec- la polifenol oxidasa, y se encontró troscopía de derivadas asociada con En 1985 el Dr. Macagno, profe- una interesante correlación entre la el Análisis por Inyección en Flujo sor del DFQ, me ofreció hacer in- procedencia de la enzima y la activi- para la determinación simultánea vestigación en ese departamento, en dad biocatalítica de los biosensores de adrenalina y noradrenalina. La una nueva línea que iba a iniciar la resultantes frente a diferentes feno- estadía postdoctoral en Valencia fue Dra. Velia Solís dirigida a la Bioelec- les y catecoles (Forzani y col. 1997). una experiencia muy interesante y troquímica y a la Electroanalítica, enriquecedora en todo sentido, en temáticas de gran importancia en el el plano científico porque tuve la mundo y de muy escaso desarrollo inmejorable oportunidad de incur-
Un largo viaje desde donde cantan los coyuyos hasta el apasionante mundo de los biosensores 85 sionar en importantes y variados as- Así, gracias a una beca de CO- era muy estimulante y la adrenalina pectos de la Química Analítica que NICET, me encaminé hacia Las Cru- con la que se vivía día a día era algo serían de gran utilidad para mi futuro, ces, situada en el estado de New adictivo por el tenor de los desafíos y en el plano personal, porque cose- Mexico, la tierra del chile, con remi- planteados, al punto que trabajé in- ché muy buenos amigos (Figura 2). niscencias coloniales de su pasado cansablemente de lunes a lunes con mexicano, de reservas indígenas, gran alegría y con la curiosidad y la Mientras realizaba la estadía en del famoso desierto White Sands y avidez de conocimientos de un niño España, esperaba con muchas ansias escenario de las andanzas de “Billy que va descubriendo el mundo. Un el resultado de una beca solicitada a The Kid” (Figura 3). Un 1 de mayo hecho que me impactó fue la de- CONICET para realizar una estadía de 1995 comencé mi estadía post- dicación y la eficiencia de Joseph postdoctoral en New Mexico State doctoral en el laboratorio del Prof. Wang, quien -a pesar de todos sus University, Las Cruces, USA, bajo la Wang, un centro de primer nivel, galardones- era el primero en llegar dirección del Prof. Joseph Wang. La donde se desarrollaban proyectos al laboratorio y celebraba un nuevo elección de ese lugar surgió luego que marcaban tendencia en el mun- trabajo aceptado con tanta alegría de haber leído una gran cantidad de do. Para mí fue un verdadero honor como si fuera el primero. Como un trabajos de Wang y col. en el campo que Joseph Wang me recibiera en su gran valor agregado, tuve la posibi- de los Sensores y Biosensores Elec- laboratorio ya que se trata del nú- lidad de conocer durante mi estadía troquímicos, muy interesantes e in- mero uno indiscutido en el mundo a científicos muy prestigiosos dentro novativos, escritos de manera clara de los Sensores Electroquímicos (al de la especialidad, entre los que me- y contundente, y publicados en las día de hoy cuenta con 1170 publi- rece un especial comentario el mun- mejores revistas de la Química Ana- caciones, 130000 citas y un índice dialmente reconocido profesor Emil lítica. h de 170). El ambiente de trabajo Palecek, padre de la electroquímica Figura 2: Grupo de trabajo de Valencia (1994).
86 CIENCIA E INVESTIGACIÓN - RESEÑAS - TOMO 9 Nº 3 - 2021 de los ácidos nucleicos, con quien bajo postdoctoral estuvo focalizada 1996a, Wang y col. 1997b). Se des- también tuve el placer de realizar en el apasionante mundo de los sen- cribió por primera vez el comporta- varios proyectos en colaboración sores basados en ADN o genosen- miento electroquímico de análogos durante sus visitas al laboratorio de sores, los que, en ese momento, se del ADN, los peptide nucleic acids Joe Wang como profesor invitado. encontraban en sus comienzos. Se (PNA) (Wang y col. 1996b) y se pro- desarrollaron biosensores con ADN puso el primer biosensor basado en En el marco de la beca postdoc- o análogos como elementos de re- el uso de PNA como elemento de re- toral se estudiaron biosensores enzi- conocimiento tendientes a detectar conocimiento para la determinación máticos para la detección de peróxi- el evento de hibridación y el daño de una mutación puntual en el gen dos orgánicos y de glucosa mediante del ADN. Se desarrollaron biosenso- p53 (Wang y col. 1997c). Se desa- la inmovilización de catalasa por res de hibridación para la determi- rrollaron biosensores electroquími- atrapamiento en una matriz polimé- nación de secuencias cortas de ADN cos para estudiar la interacción de rica y de glucosa oxidasa por atrapa- del HIV-1, de M. tuberculosis, de C. fármacos con el ADN (Wang y col. miento en una red metalizada sobre parvum y de E. coli empleando elec- 1996c), como así también el daño ultramicroelectrodos de carbono o trodos de carbono con sondas de que producen sobre el ADN ciertos por incorporación en compósitos ADN inmovilizadas electroquímica- agentes químicos del tipo de hidra- de grafito (Wang y col., 1997a). Sin mente y complejos metálicos como zina y aminas aromáticas (Wang y embargo, la mayor parte de mi tra- indicadores rédox (Wang y col. col. 1996d y 1996e) o agentes físi- Figura 3: Fotografías de Las Cruces, New Mexico (USA) (1995-1996).
Un largo viaje desde donde cantan los coyuyos hasta el apasionante mundo de los biosensores 87 Figura 4: Diferentes fotografías del Laboratorio del Prof. Wang. New Mexico State University (1995-1996). cos como la radiación ultravioleta hermosa amistad con él y con su con quienes, además de haber tra- (Wang y col. 1997d). encantadora esposa Ruth. Esta exce- bajado en proyectos conjuntos a lo lencia académica de Joseph Wang le largo de estos años, mantengo una La estadía post-doctoral en el valió la designación como Profesor profunda amistad (Figuras 4 y 5). laboratorio de Joseph Wang marcó Honorario de la UNC en ocasión de un antes y un después en mi ca- una visita a Argentina para partici- DE MI RETORNO AL PAÍS Y rrera, no sólo por la excelente pro- par como conferencista plenario del CREACIÓN DEL GRUPO ducción científica lograda, sino por “II Congreso Argentino de Química todo lo que aprendí, porque tuve el Analítica” que me tocó organizar en Poco tiempo antes de retornar placer de sentarme a discutir ideas Huerta Grande (Córdoba) en 2003. a Argentina, tuve la gran alegría de y resultados y a redactar papers con obtener mi primer subsidio de inves- un científico brillante, porque pude Sin lugar a dudas, esta fue una tigación, otorgado por la Fundación conocer la manera de gestionar y etapa maravillosa e inolvidable, no Antorchas, el cual resultó de gran abordar importantes proyectos y de sólo en los aspectos científicos, sino utilidad para comenzar a equipar lo dirigir con altísima eficiencia un también en el plano personal, ya que sería mi futuro laboratorio. enorme grupo de trabajo con per- que tuve la dicha de conocer a cole- sonas de diferentes procedencias. gas de diversos lugares del mundo y A mi regreso a Córdoba, sentí Pero Joseph Wang no sólo me abrió de cosechar numerosos amigos. Dos que era el momento de capitalizar las puertas de su laboratorio y fue de ellos, Manuel Chicharro, de la todo lo aprendido durante mis esta- un jefe muy generoso que siempre Universidad Autónoma de Madrid, y días en España y USA, y la manera confió en mí, sino que también me Concepción Parrado, de la Univer- de hacerlo fue iniciar una línea de abrió las puertas de su casa y así es sidad Complutense de Madrid, -Ma- investigación en Química Analítica como al día de hoy mantengo una nolo y Concha- son grandes amigos que tuviera mi impronta. Así surgió
88 CIENCIA E INVESTIGACIÓN - RESEÑAS - TOMO 9 Nº 3 - 2021 lo que sería la línea de los Biosen- sores electroquímicos enzimáticos y de afinidad dirigidos a la cuantifica- ción de analitos de relevancia clíni- ca y ambiental. Los comienzos no fueron fáciles, pero con el correr del tiempo el camino se fue allanando. A finales de 1997 obtuve el ingre- so a la Carrera del Investigador de CONICET como Investigador Adjun- to sin director, a mediados de 2000 obtuve un cargo de Profesor Adjunto en el DFQ, y poco a poco fui consi- guiendo subsidios de Fundación An- torchas, del entonces CONICOR, de la Secretaría de Ciencia y Técnica de la UNC y de la Asociación de Bio- químicos de Córdoba, los que me permitieron ir equipando mi labora- torio, y así, entre 1998 y 2000 pude recibir a mis cuatro primeras tesistas de doctorado. Un hecho digno de destacar es que, en 1999, convocado por cole- gas de la Universidad de San Luis, un grupo de entusiastas investiga- dores en Química Analítica de dife- rentes lugares del país, fundamos la Asociación Argentina de Químicos Analíticos (AAQA). Gracias al traba- jo mancomunado, logramos conso- lidar la Química Analítica en el país y darle la entidad que corresponde. Hoy, al ver la pujanza y la fuerte pre- sencia de la Química Analítica en el concierto nacional y la participación de una gran cantidad de jóvenes en los congresos organizados por la AAQA, siento la inefable alegría de haber cumplido con la misión de contribuir a la consolidación de la Química Analítica en el país. DE LOS RESULTADOS OBTENI- DOS DESDE LA CREACIÓN DEL GRUPO BIOSENSORES ENZIMÁTICOS En 1998 comenzó a trabajar en el grupo quien sería mi primera te- Figura 5: Acto de Designación del Prof. Joseph Wang como Profesor sista de doctorado, la Dra. Marcela Honorario de la Universidad Nacional de Córdoba. En la fotografía Rodríguez, hoy Profesora Asociada superior: Joseph y Ruth Wang. (2003).
Un largo viaje desde donde cantan los coyuyos hasta el apasionante mundo de los biosensores 89 e Investigadora Independiente de los distintos catalizadores (Miscoria meros melánicos con propiedades CONICET en el DFQ. Su tesis reci- y col. 2002). Otra alternativa inno- permselectivas y su aplicación para bió el Premio Catoggio otorgado por vativa fue la asociación de glucosa el desarrollo de sensores electroquí- la AAQA a la mejor tesis del país oxidasa y rodio con politiramina micos dirigidos a la cuantificación en Química Analítica en el bienio electrogenerada in-situ lográndose de neurotransmisores. Reportamos 2003-2005, lo cual fue un motivo así efectos anti-interferencia y ro- por primera vez la síntesis de un de gran alegría. bustez adicionales (Miscoria y col. polímero melánico a partir de la 2006). En cuanto a los biosensores oxidación electroquímica de L-do- Los primeros proyectos aborda- de fenoles y catecoles, se siguieron pa, mimetizando la producción de dos por mi grupo estuvieron focali- dos estrategias. En un caso, la in- melanina in-vivo (Rubianes y Rivas zados en el diseño de biosensores movilización de polifenol oxidasa 2001). Los polímeros resultantes de- enzimáticos para la cuantificación se efectuó por incorporación en un mostraron excelentes propiedades de glucosa, fenoles y catecoles me- material compósito de carbono muy de preconcentración de dopamina diante el uso de glucosa oxidasa y poco explotado hasta ese momento, y de barrera selectiva hacia com- polifenol oxidasa como elementos obtenido con microesferas de carbo- puestos cargados negativamente, de biorreconocimiento, respectiva- no vítreo en lugar de grafito (Rodrí- posibilitando el desarrollo de sen- mente. Esta temática fue abordada guez y Rivas 2002). Una importante sores electroquímicos para medir por la Dra. Rodríguez y por otra aplicación de este sensor fue el es- niveles nanomolares de dopamina de las primeras tesistas con las que tudio de los productos de la biode- aún en presencia de un gran exceso comenzó mi grupo, la Dra. Silvia gradación enzimática de 2,4-dini- de ácido ascórbico, su principal in- Miscoria, hoy Profesora Adjunta de trotolueno (Rodríguez y col. 2006). terferente, y de dopac, su producto la Universidad de la Patagonia Aus- Una técnica de preparación de metabólico más importante. El éxi- tral San Juan Bosco, quien realizó biosensores que en esos momentos to de este material polimérico per- su tesis doctoral en el marco de una recibía gran atención por su versa- mitió abrir nuevos caminos. Por un colaboración establecida en el año tilidad era el autoensamblado capa- lado, se evaluó el uso de electrodos 2000 entre nuestro grupo y su facul- por-capa (Miscoria y col. 2006). Así, modificados con el polímero como tad para impulsar el desarrollo de la la otra estrategia de preparación de detectores electroquímicos para Química Analítica en dicha Univer- biosensores para fenoles y catecoles electroforesis capilar y Análisis por sidad. estuvo centrada en la construcción Inyección en Flujo (Chicharro y col. de una arquitectura supramolecular 2004). Por otro lado, se investigó la Se desarrollaron biosensores en- mediante autoensamblado capa- síntesis de polímeros melánicos em- zimáticos para la cuantificación de por-capa de quitosano modificado pleando otras catecolaminas como glucosa mediante el atrapamien- para tener carga positiva permanen- monómeros de partida. Se obtuvo to de glucosa oxidasa en una red te (llamado quitosano cuaternario) una interesante correlación entre la metálica de cobre obtenida por y polifenol oxidasa. Esta alternativa naturaleza del catecol, la estabilidad co-deposición en la superficie de fue abordada no sólo desde el punto y las propiedades permselectivas y carbono vítreo o a través de su in- de vista experimental sino también a de preconcentración de los políme- corporación en compósitos de gra- través de modelado, lo que permitió ros melánicos sintetizados, y la sen- fito modificados con partículas de obtener interesante información so- sibilidad hacia dopamina de los sen- cobre, lográndose, en ambos casos, bre las propiedades fisicoquímicas sores resultantes. Especial mención biosensores altamente competitivos de la plataforma biosensora resul- merece la síntesis de un polímero con exitosa aplicación en muestras tante (Coche-Guerente y col. 2005). melánico obtenido a partir de dopa- de suero sanguíneo humano (Ro- mina, reportado por primera vez por dríguez y Rivas 2001). La incorpo- POLÍMETROS MELÁNICOS Y nuestro grupo y que en la actualidad ración de diferentes combinaciones SENSORES ELECTROQUÍMICOS es ampliamente usado para la cons- de micropartículas de cobre, iridio, DE NEUROTRANSMISORES . trucción de una gran diversidad de rodio, rutenio, platino y paladio en (bio)sensores electroquímicos (Gon- compósitos de grafito modificados Otra línea abordada a partir de zález y col. 2004). con glucosa oxidasa permitió lograr 1999 por mi segunda tesista de doc- una importante mejora en la sensibi- torado, la Dra. Dolores Rubianes, lidad y la selectividad de la cuanti- hoy Profesora Adjunta e Investiga- ficación de glucosa gracias al siner- dora Independiente de CONICET gismo obtenido por la asociación de en el DFQ, fue la síntesis de polí-
90 CIENCIA E INVESTIGACIÓN - RESEÑAS - TOMO 9 Nº 3 - 2021 GENOSENSORES ELECTROQUÍ- MICOS partir de los productos de dos re- micos ha cobrado gran relevancia acciones enzimáticas (Wang y col. debido a las ventajas que ofrecen es- 2002). tos materiales en comparación con En los albores de la nueva cen- las enzimas en cuanto a estabilidad turia, comenzamos otra línea de Luego del retorno de la Dra. y costos. En nuestro grupo se reportó trabajo, la de los Biosensores elec- Rodríguez de su estadía postdocto- por primera vez la actividad peroxi- troquímicos basados en ADN o ge- ral en Arizona State University. co- dasa-mimética de nanopartículas de nosensores electroquímicos, temáti- menzamos con una nueva línea de magnetita electrogeneradas las que, ca en la que fuimos pioneros en el biosensores basados en el uso de a diferencia de las ampliamente co- país y en la región. El trabajo fue rea- aptámeros, también llamados anti- nocidas partículas de magnetita sin- lizado por una de las primeras cua- cuerpos químicos, como elemen- tetizadas químicamente, no habían tro tesistas con quienes comenzó el tos de biorreconocimiento. En este sido empleadas para el desarrollo de grupo, la Dra. María Laura Pedano, tema nuestro grupo ha sido también sensores electroquímicos a pesar de quien actualmente es Investigadora pionero a nivel nacional y latinoa- las importantes ventajas que ofrecen Independiente de CONICET en el mericano. Se propuso un aptasensor (Comba y col. 2010). Un resultado Instituto Balseiro de Bariloche. Estu- electroquímico para la cuantifica- muy interesante, no reportado hasta diamos la adsorción y electrooxida- ción directa de lisozima sin marca- entonces, obtenido de manera ac- ción de diversos ADNs sobre carbo- dores rédox, a partir de los cambios cidental como tantos resultados en no vítreo, lo que permitió encontrar en la oxidación intrínseca del aptá- la ciencia, fue el efecto de diversas una interesante correlación entre el mero, con muy buenas caracterís- proteínas en la dispersión de nano- número y tipo de bases y la eficien- ticas analíticas (Rodríguez y Rivas partículas de magnetita en compó- cia en su adsorción, electrooxida- 2007). sitos de grafito, el cual se tradujo en ción y accesibilidad de la capa in- una notable mejora en la sensibili- movilizada para detectar eventos de NANOMATERIALES Y (BIO)SEN- dad de los sensores resultantes. Este hibridación (Pedano y Rivas 2003, SORES ELECTROQUÍMICOS efecto fue altamente dependiente de 2005). Esta tesis fue premiada por la la estructura terciaria de la proteína Asociación Química Argentina, con Los sensores electroquímicos y de su densidad de residuos hidro- el Premio Herrera-Ducloux. no fueron ajenos a la revolución fóbicos (Comba y col. 2012). producida por la Nanotecnología En otros trabajos realizados en en diversas ramas de la ciencia. En En otro trabajo muy interesante el grupo, se estudió la interacción efecto, el advenimiento de nuevos se reportó por primera vez la acti- de naranja de acridina, un conoci- nanomateriales produjo cambios vidad pseudo-peroxidasa de pero- do intercalador, con ADN de doble significativos, no sólo en el diseño vskitas La1-xAxMnO3 dispersas en hebra de timo de ternera inmovi- de las plataformas de biorreconoci- compósitos de grafito, y se demostró lizado mediante autoensamblado miento sino también en la obtención que su actividad catalítica hacia la capa-por-capa sobre electrodos de de las señales analíticas de los sen- reducción de peróxido de hidróge- oro (Ferreyra y Rivas, 2009). Se pro- sores. Los nanosensores obtenidos no es altamente dependiente de la puso una interesante metodología en nuestro grupo estuvieron basados naturaleza del catión A y del tiempo para efectuar la liberación de genes en el uso de nanotubos de carbono, de calcinación empleado durante la electroquímicamente controlada, materiales grafenáceos, quantum síntesis, siendo La0.66Sr0.33MnO3 la empleando microelectrodos de oro dots de carbono y nanopartículas más activa (Luque y col. 2009). modificados con ADNs tiolados y magnéticas, metálicas y de óxidos microelectrodos de pasta de grafito mixtos. También se estudió la actividad conteniendo ADNs inmovilizados peroxidasa-mimética de nanopartí- electroquímicamente (Wang y col. NANOZYMES Y (BIO)SENSORES culas core-shell Cu@PtPd/C, demos- 1999a, 1999b). Se diseñó una estra- ELECTROQUÍMICOS trándose que las nanoestructuras tegia para la cuantificación simultá- resultantes presentan claros efectos nea de dos secuencias de ADNs que En la última década, la síntesis de sinérgicos en su actividad catalítica son importantes biomarcadores de diferentes nanomateriales con acti- comparados con los components in- cáncer de mama, empleando partí- vidad pseudoenzimática (especial- dividuales. Ello posibilitó la obten- culas magnéticas, hibridación tipo mente peroxidasa-mimética), llama- ción de sensores electroquímicos no sándwich, separación magnética y dos nanozymes, y su aplicación para enzimáticos para la cuantificación transducción voltamperométrica a el desarrollo de sensores electroquí- altamente sensible y selectiva de pe-
Un largo viaje desde donde cantan los coyuyos hasta el apasionante mundo de los biosensores 91 róxido de hidrógeno, un biomarca- la cuantificación de trazas de ácidos y biosensores electroquímicos. Se dor de enfermedades degenerativas nucleicos (Pedano y Rivas 2004) y tomó ventaja de la carga de los po- y un analito de relevancia en la in- como detector en Análisis por Inyec- lipéptidos escogidos para lograr el dustria (Gutiérrez y col. 2018). ción en Flujo y en Electroforesis ca- anclaje de biomoléculas cargadas pilar, lo que permitió lograr impor- negativamente y de su capacidad NANOTUBOS DE CARBONO Y tantes ventajas en las sensibilidades de preconcentración de cofactores (BIO)SENSORES ELECTROQUÍMI- obtenidas y en la reproducibilidad enzimáticos o de autogeneración COS: COMPÓSITOS DE NANOTU- de las determinaciones aun traba- de catalizadores de la oxidación de BOS DE CARBONO jando con compuestos cuyos pro- dichos cofactores. De este modo, se ductos de oxidación son altamente obtuvieron sensores para la detec- Desde su descubrimiento en pasivantes (Chicharro y col. 2005). ción simultánea de ácido ascórbi- 1991 los nanotubos de carbono re- co y paracetamol (Dalmasso y col. cibieron una enorme atención en Se diseñó un sensor electroquí- 2012a y b), la determinación de diversos campos de la ciencia y de mico que permitió la cuantificación polifenoles a bajos sobrepotenciales la industria. En consonancia con las de aminoácidos electroactivos y no (Eguílaz y col. 2016a) y la cuantifi- ventajas que se reportaban acerca electroactivos, a bajos potenciales y cación altamente sensible de ácido de la incorporación de nanotubos a pH neutro, tanto en estático como úrico (Gutiérrez y col. 2018). Tam- de carbono en sensores electroquí- en Análisis por Inyección en Flujo bién se desarrollaron biosensores micos, y en la búsqueda de estrate- y Electroforesis capilar, mediante la enzimáticos para la cuantificación gias novedosas, en las vacaciones incorporación de micropartículas de de glucosa (Dalmasso y col. 2013) y de verano de 2003 me surgió la idea cobre en CNTPE. Este diseño repre- etanol (Eguílaz y col. 2016b, Gallay de diseñar un material compósito sentó una alternativa muy superado- y col. 2019), y genosensores para basado en nanotubos de carbono ra respecto de los sensores existen- cuantificar un importante biomarca- el que, de acuerdo con mi hipóte- tes, que presentan el inconveniente dor de cáncer, el microRNA-21. Los sis, debía resultar muy exitoso. Do- de requerir condiciones drásticas de aminoácidos también demostraron lores Rubianes, quien estaba en sus pH y potencial (Luque y col. 2007, ser interesantes agentes de biofun- últimos meses de tesis doctoral, fue Sánchez-Arribas y col. 2006). cionalización y un ejemplo modelo la encargada de llevar adelante ese fue la cisteína, la cual ofreció la gran proyecto, y luego de un trabajo muy NANOTUBOS DE CARBONO Y ventaja de una eficiente preconcen- intenso, en unos pocos meses tuvi- (BIO)SENSORES ELECTROQUÍMI- tración de Cd(II) por acompleja- mos el electrodo desarrollado y el COS: BIOFUNCIONALIZACIÓN Y miento y su detección a niveles de artículo publicado. El nuevo electro- APLICACIONES sub-ppb (Gutiérrez y col. 2017). do fue llamado “Carbon Nanotubes Paste Electrode” (CNTPE) o pasta de En 2007 comenzamos con una Otra estrategia innovativa de fun- nanotubos de carbono, un compó- nueva línea dentro de los nanosen- cionalización de los nanotubos de sito análogo al “Carbon Paste Elec- sores electroquímicos, la que, con carbono fue el uso de enzimas, las trode”, que comparte características las adaptaciones requeridas por los que demostraron no sólo una eficien- en cuanto a versatilidad, pero que desafíos actuales, aún sigue vigente. te acción como agentes exfoliantes, resulta mucho más activo por los Esta línea está dirigida a la funciona- sino que, a pesar de la desnaturali- efectos catalíticos inherentes a las lización “inteligente” de nanotubos zación parcial experimentada por nanoestructuras (Rubianes y Rivas de carbono con biomoléculas críti- las condiciones drásticas empleadas 2003). Tuvimos la satisfacción de ser camente seleccionadas para lograr durante la funcionalización de las pioneros a nivel mundial y este tra- la exfoliación de las nanoestructu- nanoestructuras, mantuvieron sus bajo fue uno de los diez más citados ras y, lo que es más importante aún, propiedades como biocatalizado- de la revista Electrochemistry Com- para conferirles propiedades parti- res. Se emplearon glucosa oxidasa munications en sus primeros diez culares que permitan lograr platafor- (Gutiérrez y col. 2012) y citocromo años y uno de los más citados de mas biosensoras “hechas a medida” c (Eguílaz y col. 2016c, d) y en am- mi carrera, con 387 citas al día de bos casos se logró la transferencia la fecha. Este fue el puntapié inicial Se seleccionaron diferentes po- de carga directa del centro rédox para el desarrollo de una línea muy lipéptidos como agentes de biofun- de las enzimas y se obtuvieron bio- exitosa dentro del grupo, que nos cionalización (polilisina, polihistidi- sensores enzimáticos para glucosa y permitió obtener resultados de gran na, politirosina y poliarginina) para etanol con excelentes características relevancia. El CNTPE fue usado para la construcción de diversos sensores analíticas.
92 CIENCIA E INVESTIGACIÓN - RESEÑAS - TOMO 9 Nº 3 - 2021 Otro desafío planteado fue el lítica (Gutiérrez y col. 2019, Gallay (óxido de grafeno, óxido de grafe- uso de un ADN con un muy ele- y col. 2019) Estos genosensores de no química o electroquímicamente vado número de pares de bases tal hibridación para la detección de ni- reducido, grafeno) a fin de explotar como el ADN de doble hebra de veles atomolares de una secuencia sus conocidas ventajas. Se desarrolló timo de ternera (Primo y col. 2013) de BCRA-1, un importante biomar- un material compósito de grafeno Esta biomolécula que posibilitó no cador de cáncer de mama, a través químicamente sintetizado a partir de sólo una excelente desagregación del uso de una sonda de ADN bio- grafito (Gasnier y col 2013, Gutié- de los nanotubos de carbono sino tinilada. rrez y col. 2014) y un electrodo ba- que, aún con la desnaturalización sado en un material híbrido obtenido parcial producto del enrollamiento En los últimos años ha cobrado a partir de la oxidación controlada de las nanoestructuras, mantuvo sus gran importancia el desarrollo de de nanotubos de carbono (Hernán- propiedades de biorreconocimiento, nanosensores electroquímicos ba- dez y col. 2014). Más recientemente obteniéndose un genosensor para la sados en nanomateriales híbridos se propuso un biosensor impedimé- cuantificación de un conocido inter- por las propiedades superadoras trico para la detección femtomolar calador, el fármaco prometazina, a que ofrecen respecto de los nano- de miRNA-21, basado en una arqui- niveles nanomolares (Primo y col. materiales individuales. Desarrolla- tectura supramolecular de óxido de 2014). mos biosensores enzimáticos para grafeno reducido modificado con la cuantificación de glucosa em- quitosano y una sonda de ADN (Ló- En los últimos cuatro años, pleando dos estrategias. En una de pez Mujica y col. 2021). nuestro grupo hizo aportes muy in- ellas, se trabajó con nanotubos de teresantes en cuanto a un nuevo carbono y nanopartículas de oro BIOSENSORES PLASMÓNICOS concepto de “funcionalización inte- polifuncionalizadas con un tiol y un ligente” para lograr la construcción derivado del ácido borónico a fin de A finales de la primera década de de plataformas multifuncionales que favorecer el anclaje de la glucosa este siglo el grupo adquirió un equi- permitan el desarrollo de distintos ti- oxidasa (Eguílaz y col. 2015), y en po de Resonancia de Plasmón Super- pos de biosensores de acuerdo con otro, se efectuó la asociación de los ficial (SPR) para ampliar el espectro el elemento de biorreconocimiento nanotubos de carbono-avidina con de esquemas de transducción de los anclado. Este concepto estuvo fo- nanopartículas de rutenio y gluco- biosensores y obtener valiosa infor- calizado en el uso de proteínas con sa oxidasa biotinilada (Gallay y col. mación acerca de la construcción de sitios de reconocimiento específicos 2020), lográndose excelentes carac- las plataformas sensoras en tiempo como concanavalina A y avidina, a terísticas analíticas. También se dise- real. Se desarrolló un aptasensor di- través de las conocidas interaccio- ñaron biosensores basados en nano- rigido a la cuantificación altamente nes lectina-glicoproteína/azúcar y materiales híbridos a base de sílica, sensible y selectiva de trombina hu- avidina-biotina. nanotubos de carbono dispersos en mana (Jalit y col. 2013); un inmu- nafion y hemoglobina para la cuan- nosensor para galectina-3, biomar- La funcionalización de nanotu- tificación altamente sensible de áci- cador emergente de enfermedades bos de carbono con concanavalina do tricloroacético y nitrito (Eguílaz y cardiovasculares (Primo y col. 2018a A permitió obtener una platafor- col. 2018). y b), y un genosensor para la cuan- ma exitosa para la construcción de tificación subfemtomolar de microR- sensores bienzimáticos de glucosa MATERIALES GRAFENÁCEOS Y NA-21 (López Mujica y col. 2020). altamente sensibles y selectivos a (BIO)SENSORES ELECTROQUÍMI- Este último trabajo fue seleccionado través del anclaje sitio-específico de COS por el Editor de Analytical and Bioa- las glicoproteínas glucosa oxidasa y nalytical Chemistry como “Forefront peroxidasa de rábano (Ortiz y col. El grafeno, nanomaterial por el paper”. 2019). La biofuncionalización de que se otorgó el Premio Nobel de los nanotubos de carbono con avi- Química en 2014, recibió conside- DE LAS ACTIVIDADES DE GES- dina dio lugar a otra plataforma muy rable atención en diversas ramas de TIÓN Y EVALUACIÓN exitosa que fue usada para la cons- la ciencia y en particular en el cam- trucción de diversos biosensores. En po de los sensores electroquímicos, A lo largo de todos estos años efecto, se desarrollaron biosensores debido a sus excelentes propieda- he desarrollado diversas actividades enzimáticos para peróxido de hidró- des. Así fue como también dirigimos de gestión como consejero en los geno y glucosa empleando las co- nuestro trabajo a la incorporación Consejos del DFQ y del INFIQC; Di- rrespondientes enzimas biotiniladas de diversos materiales grafenáceos rector Alterno y Director del DFQ; con excelente “performance” ana- en los (bio)sensores electroquímicos Director Alterno de la Comisión Ase-
Un largo viaje desde donde cantan los coyuyos hasta el apasionante mundo de los biosensores 93 sora de doctorado y maestría (CAD- En 2001 recibí el Premio Ranwell de Electroanalysis. En 2011 recibí yM) de la FCQ, y como integrante Caputto otorgado por la Academia con enorme alegría la invitación de de numerosas comisiones de la FCQ Nacional de Ciencias de Argentina; Sensors and Actuators B: Chemical, y del INFIQC. En lo que se refiere en 2004, el Premio Rafael Labriola una de las revistas más prestigiosas a actividades de evaluación, he sido otorgado por la Asociación Quími- de la Química Analítica (impact fac- Coordinador de la Comisión de Quí- ca Argentina; en 2013, el Premio tor: 7,1) para actuar como Editor y mica de la Agencia Córdoba Cien- Konex en Nanotecnología otorgado desde 2018 como Co-Editor-en-Jefe. cia, de la Comisión de Química de por la Fundación Konex y, en 2016, En los últimos años también tuve el CONICET, de la Comisión Ad-Hoc el Premio Consagración otorgado gran honor de ser convocado por para la promoción de Investigadores por la Academia Nacional de Cien- “The Nobel Committes for Physical Superiores de CONICET y de la Co- cias Exactas, Físicas y Naturales. En and Chemistry” para nominar al misión de Química de FONCyT. He 2016 fui incorporado como Acadé- candidato para el Premio Nobel en participado como jurado de nume- mico correspondiente de la Acade- Química. rosas tesis doctorales en la FCQ, en mia Nacional de Ciencias de Argen- otras universidades del país y en el tina y en 2020 como Académico de DE LOS AGRADECIMIENTOS exterior. He sido jurado de numero- número de dicha Academia (Figura sos concursos docentes en diferen- 6). En 2013 fui designado Investi- En primer lugar, quiero expresar tes universidades del país. gador Superior de CONICET. Tuve mi agradecimiento al Dr. Blesa por el gran honor de que mis colegas su generosa invitación para contar DE LAS DISTINCIONES RECIBI- me eligieran vice-presidente (2003- algunos aspectos relevantes del ca- DAS 2005) y Presidente (2005-2007) de mino que recorrí. Debo reconocer la Asociación Argentina de Quími- que me sentí muy honrado con la En este largo caminar recibí im- cos Analíticos. Fui miembro del Co- propuesta, pero al mismo tiempo me portantes distinciones que fueron mité Editorial de Analytical Letters y di cuenta que no sería una tarea sim- como una dulce caricia para el es- Sensors and Actuators B. Chemical ple. Sin embargo, al desempolvar el píritu y resultaron muy gratificantes. y soy miembro del Comité Editorial baúl de los recuerdos, un cúmulo de Figura 6: Acto de incorporación como Académico de la Academia Nacional de Ciencias. Entrega el diploma el Presidente de la Academia, Dr. Tirao. (2016).
94 CIENCIA E INVESTIGACIÓN - RESEÑAS - TOMO 9 Nº 3 - 2021 vivencias se agolparon en mi men- Indudablemente, todos estos lo- mi temprana propuesta de hacer su te y las palabras comenzaron a fluir gros no son individuales y sólo son doctorado en mi grupo, por la res- con gran facilidad, convirtiendo esta posibles si se cuenta con un grupo ponsabilidad y el compromiso con experiencia en algo muy placentero. que trabaja con ahinco y con en- que realiza su trabajo y por su gran trega, y soy plenamente consciente dedicación; a Virginia, por haber Tengo palabras de agradecimien- que una de las características de mi elegido al grupo para incursionar en to para todos los docentes que me grupo ha sido siempre un ritmo de el campo de los Biosensores electro- educaron, desde la escuela primaria trabajo muy intenso. Por eso, agra- químicos, por enriquecernos (junto hasta la universidad, pero los profe- dezco profundamente a todos los a Alejandro) con sus aportes ingenie- sores del secundario merecen una que hoy integran mi grupo, en espe- riles, por el empeño con que realiza mención especial porque trabajaron cial a Marcela y a Dolores, quienes su trabajo y por su disposición para gratis hasta que el colegio estuvo in- me acompañan desde los albores afrontar con responsabilidad cada corporado en el presupuesto nacio- del grupo, por el apoyo incondicio- desafío; y a Daiana, la última en lle- nal, sólo motivados por su vocación nal que me brindaron a lo largo de gar a nuestro grupo, a quien todavía y por el convencimiento de que la todos estos años, por haberse puesto no conozco personalmente debido a ciudad necesitaba imperiosamente en todo momento la “camiseta” del las restricciones de la pandemia, por la enseñanza secundaria. grupo y por haber estado siempre haber venido desde su Catamarca presente donde hizo falta sin pedir natal para formarse como estudiante Agradezco a Velia Solís por ha- algo a cambio. A Pablo D. por ha- de doctorado en nuestro grupo y ser berme enseñado los primeros pasos berme elegido para dar el gran salto mi próxima nieta científica. en la investigación científica, por en su postdoctorado desde la Quí- haberme brindado la oportunidad mica Atmosférica a los Biosensores También quiero expresar mi gran de realizar la tesis doctoral bajo su Electroquímicos, por el gran apoyo agradecimiento a quienes formaron dirección, y por haberme inculcado brindado durante los años que lle- parte de mi grupo y ahora se en- siempre la rigurosidad del trabajo vamos trabajando juntos y por sus cuentran desarrollando sus activida- científico. valiosas contribuciones en esta nue- des en otros centros (Nancy, María va etapa. A Pablo G. por haber deci- Laura P., Guillermina, Emiliano, Fa- No puedo concluir esta rese- dido mudarse desde Tucumán para biana, Marcos, Aurelien, Silvia, Vir- ña sin agradecer a las instituciones realizar su postdoctorado en mi gru- ginia, Guillermina, Fausto, Victoria, que, a través de sus subsidios, hi- po, por elegirme para que dirija su y mis tres nietas científicas, Yamile, cieron posible la realización de mi carrera como investigador y por su Cecilia y María Laura R) y a todos trabajo, las provinciales (el entonces gran dedicación y compromiso para los pasantes que trabajaron en el la- llamado CONICOR luego Agencia llevar adelante su trabajo; a Anto- boratorio. Las figuras 7 a 14 mues- Córdoba Ciencia), las nacionales nella, mi cuarta nieta científica, por tran fotografías de los integrantes del (SECyT-UNC, CONICET, ANPCyT) y haber elegido a mi grupo para reali- grupo de trabajo en diferentes eta- las internacionales (ECOS (Francia), zar su doctorado y por todo lo reali- pas a lo largo de estos años. FONDECyT (Chile) y MINCyT-CO- zado a lo largo de estos años; a Mi- NACYT (Chile), MINCyT-Ministerio chael, por la pasión con que abraza Quiero expresar un GRACIAS de Educación (España), Banco San- cada proyecto, por sus inagotables muy grande a todos los investigado- tander-Universidad Autónoma de ganas de trabajar, por estar, como res con quienes realizamos trabajos Madrid (España)), así como algunas los boy-scouts, siempre listo para un en colaboración, ya sea en el marco instituciones privadas (Fundación nuevo desafío y por haber inundado de proyectos formales como ECOS Antorchas, Asociación de Bioquí- el grupo con su alegría caribeña; a (Francia), MINCyT-Ministerio de micos de Córdoba, Banco Río). La Fabrizio, por su gran esfuerzo para Educación de España, MINCyT-CO- Fundación Antorchas merece una compatibilizar las actividades como NACyT (Chile), FONDECyT (Chile), mención muy especial porque, entre Químico en Villa María y las corres- Universidad Autónoma de Madrid- otros, me otorgó un subsidio trianual pondientes a la maestría en nuestro Banco Santander de España, Univer- de reinstalación que me permitió grupo, por las ganas con que afron- sidad Autónoma de Madrid-UNC; o comprar el equipamiento más cos- ta sus investigaciones y por su gran como parte de proyectos estableci- toso y, por lo tanto, jugó un papel sentido de la responsabilidad. A dos de manera directa entre investi- muy importante en la consolidación las nuevas “adquisiciones del gru- gadores de la Universidad de Santia- de mi laboratorio. po”, Alejandro, Virginia y Daiana; go de Chile, Universidad Autónoma a Alejandro, por haber considerado Metropolitana de Iztapalapa (Mé-
Un largo viaje desde donde cantan los coyuyos hasta el apasionante mundo de los biosensores 95 Figura 7: Fotografía del grupo. De izquierda a derecha: Guillermina Luque, Dolores Rubianes, Marcela Rodríguez, Julien Fatisson, Gustavo Rivas, María Laura Pedano, Alberto Sánchez-Arribas. (2003). Figura 8: Fotografía del grupo. Adelante, de izquierda a derecha: Dolores Rubianes. Marcela Rodríguez, Nancy Ferreyra; Detrás, de izquierda a derecha: Silvia Miscoria, Gustavo Rivas, Guillermina Luque, María Laura Pedano. (2005).
96 CIENCIA E INVESTIGACIÓN - RESEÑAS - TOMO 9 Nº 3 - 2021 Figura 9: Fotografía del grupo. De izquierda a derecha: Jose´Sandoval, Nancy Ferreyra, Gustavo Rivas, Marcela Rodríguez, Yamile Jalit, Guillermina Luque, Victoria Bracamonte. (2006). Figura 10: Fotografía del grupo. De izquierda a derecha: Adelante: Pilar Herrasti, Laura Galicia, María Luisa Lozano, Nancy Ferreyra, Yamile Jalit, Virginia Bracamonte; Detrás: Dolores Rubianes, Marcela Rodríguez, Gustavo Rivas, Fausto Comba. (2008).
Un largo viaje desde donde cantan los coyuyos hasta el apasionante mundo de los biosensores 97 Figura 11: Fotografía del grupo. Adelante: de izquierda a derecha: Cecilia Tetamantti, Emiliano Primo, Antonella Montemerlo, Alejandro Gutiérrez; Detrás, de izquierda a derecha: Fabiana Gutierrez, Dolores Rubianes, Constanza Venegas, Gustavo Rivas, Marcos Eguílaz. (2015). Figura 12: Festejo de mis 50 años organizado por el grupo: De izquierda a derecha: Fausto Comba, Yamile Jalit, Emiliano Primo, Nancy Ferreyra, María Laura Pedano, Marcela Rodríguez, Gustavo Rivas, Dolores Rubianes, Fabiana Gutierrez, Gallina Dubacheva, Virginia Bracamonte, Guillermina Luque, Pablo Dalmasso. (2010).
98 CIENCIA E INVESTIGACIÓN - RESEÑAS - TOMO 9 Nº 3 - 2021 Figura 13: Fotografía del grupo. Adelante, de izquierda a derecha: Dolores Rubianes, Marcela Rodríguez, Antonella Montemerlo, Gustavo Rivas, Cecilia Tetamantti, María Laura Ramírez, Marcos Eguílaz, Fabrizio Perreachione; Detrás: Jorge Saldaña, Pablo Gallay. (2017). Figura 14: Fotografía del grupo. De izquierda a derecha: Cecilia Tetamantti, Antonella Montemenrlo, Fabiana Gutierrez, María Laura Ramírez, Dolores Rubianes, Marcela Rodríguez, Gustavo Rivasm Pablo Gallay, Marcos Eguílaz, Pabo Dalmasso, Michael López Mujica. (2018). xico), Universidad de Guanajuato investigadores nacionales (Dres. Ar- (CNEA)). También agradezco a los (México), Universidad Complutense garaña y Monti (CIQUIBIC-FCQ), investigadores extranjeros por su de Madrid (España) y New Mexico Dra. Ortega (FCQ), Dr. Bocco (CI- valiosísima colaboración, las Dras. State University (USA). Agradezco BICI-FCQ), Dres. Sánchez, Oviedo Bollo, Yáñez y Venegas de la Univer- la inestimable contribución de los y Leiva (INFIQC-FCQ), Dra. Leyva sidad de Chile; los Dres. Chicharro,
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