Ecohidrología en la gestión del agua Soluciones microbiológicas para el tratamiento de polución difusa y puntual de fuentes hídricas - Presentado ...

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Ecohidrología en la gestión del agua
Soluciones microbiológicas para el tratamiento
de polución difusa y puntual de fuentes hídricas
Presentado por: Arnoldo Font Nájera
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Curso virtual: Ecohidrología en la gestión del agua
Soluciones microbiológicas para el tratamiento de polución
difusa y puntual de fuentes hídricas
Presentado por: Arnoldo Font Nájera

                                      Con el apoyo de:
Ecohidrología en la gestión del agua Soluciones microbiológicas para el tratamiento de polución difusa y puntual de fuentes hídricas - Presentado ...
Contenido (línea de tiempo)

                                   Soluciones          Biofiltros secuenciales de sedimentación y biofiltración (SSBSs)
                             Ecohidrológicas Basadas
                                en la Naturaleza       Barreras desnitrificantes (BD)

              La Fuente de                    Aumento de nutrientes y/o                      Degradación de ecosistema
             contaminación                    contaminates en sistemas                          (p.e. Afloramiento de
           (puntual vs difusa)                       acuáticos                                 cyanobacterias tóxicas)

                                                 Monitoreo Físico-Químico                        Monitoreo Biológico

ERCE PAS                                                                                       Ciudad de Lodz (Polonia Central)

                                                       Ecohidrología en la gestión de agua
Ecohidrología en la gestión del agua Soluciones microbiológicas para el tratamiento de polución difusa y puntual de fuentes hídricas - Presentado ...
La fuente de contaminación

                                                                      Fuentes
                                                                                                                                                                               Puntuales
                                                                      difusas
                         Ciudad
                                                      Rural                                                                                                                    Fáciles de identificar y
                                                                                                                                                                               tratar
        Suburbios
                                                                             Parcela
                                                                                                               https://www.temasambientales.com/2017/03/contaminacion-puntual.html
                                                                                          Establos
                                                                                                                                                                                Difusas

    Plantas de tratamiento
                                                                                                                                                                                Más difícil determinar el
                                                                                                                                                                                origen, y por lo tanto,
                                                            Fuentes                                                                                                             son más difíciles de
                                                           puntuales                                                                                                            monitorear y tratar.

                     Fuentes de contaminación del agua                                          Fábrica
                                                                                                              https://www.researchgate.net/publication/271830571
Fuente: https://contaminacionjulissa.wordpress.com/tipos-de-fuentes-de-contaminacion-2/

                                                                                              Ecohidrología en la gestión de agua
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Los contaminantes
Xenobióticos                      Fármacos                                              Nutrientes
                                                                                                           Nitrato

                                                                                                                   Amonio

         Pigmentos y colorates                  Metales pesados
                                                                                              Fosfato   Nitrito

                Solventes
                                                                                                                  Ecosistema Acuático

          Suavizantes                                                                                              Bioacumulación
                                                                                                                   Biomagnificación

                Emulsificadores

                            Insecticidas

                                                  Ecohidrología en la gestión de agua
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La consecuencia: Floración de Algas Nocivas (FAN)

                                                                                                                          Cianobacterias (Cyanophita)
                                       Nutrientes

                                                                      FAN en ecosistemas                                                                  Foto: ERCE PAS
                                                                     acuáticos aguas abajo
                                             Verano
Biomasa de cyanobacteria

                           E   F   M   A M   J     J   A   S   O   N D                                                    Foto: ERCE PAS Foto: ERCE PAS
                                             Mes

                                                                                    Ecohidrología en la gestión de agua
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La consecuencia: Floración de Algas Nocivas (FAN)
                                                             Cianotoxinas

                                                                                               Efecto en los Ecosistemas

                                                                                           Bioacumulación
                                             Hepatotoxinas
                                                                     Microcistina

                                                                                             Nivel del contaminante
Microcystis aeruginosa (400x)

                                             Hepatotoxinas           Cilindrospermopsina    Nivel del contaminante    Biomagnificación

 Aphanizomenon flos-aquae (400x), ERCE PAS
                                             Neurotoxinas
                                                                     Saxitoxina
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Los problemas al medio ambiente y la sociedad humana

                                                                                                           •   Pérdida de biodiversidad
                                                                                                                • Menos servicios ambientales

                                                                                                           •   Riesgo a la salud humana
                                                                                                                • Restricción de toma de agua, y
                                                                                                                • Consumo de alimentos

                                                                                                           •   Impactos económicos
                                                                                                                • Reducción de la pesca,
                                                                                                                • Limitación de transporte,
                                                                                                                • Limitación de uso recreativo
                                                                                                                • Reducción de turismo

Carmichael and Boyer et al., 2016, Harmful Algae Journal, doi: https://doi.org/10.1016/j.hal.2016.02.002
Ecohidrología en la gestión del agua Soluciones microbiológicas para el tratamiento de polución difusa y puntual de fuentes hídricas - Presentado ...
Contenido (línea de tiempo)

              La Fuente de            Aumento de nutrientes y/o                     Degradación de ecosistema
             contaminación            contaminates en sistemas                         (p.e. Afloramiento de
           (puntual vs difusa)               acuáticos                                cyanobacterias tóxicas)

                                        Monitoreo Físico-Químico                        Monitoreo Biológico

ERCE PAS                                                                              Ciudad de Lodz (Polonia Central)

                                              Ecohidrología en la gestión de agua
Ecohidrología en la gestión del agua Soluciones microbiológicas para el tratamiento de polución difusa y puntual de fuentes hídricas - Presentado ...
Biología molecular: herramientas para detección de cianobacterias
                              potencialmente tóxicas

    • Reacción en cadena de la Polimerasa (PCR en inglés)
    Es un método utilizado para amplificar (hacer copias) de una secuencia
    específica de ADN. Se utiliza para hacer millones de copias de un fragmento
    específico de ADN.

                                                           Copias de ADN
Fragmento de ADN
                                                                                           f(x) = 2x

                                                                           Ciclos de temperatura
                                                          Por cada fragmento de ADN, dos nuevas copias
                   2 copias   4 copias   8 copias, etc.
                                                          son producidas en cada ciclo. Por lo tanto, el
                                                          incremento en número de copias es una
                                                          función exponencial a la segunda base.
Biología molecular: herramientas para detección de cianobacterias
                                potencialmente tóxicas
   Molécula de ADN de cyanobacteria                                                   PCR

Marcador molecular

                                                            1   2   3   4   5   6   7 8   9   CP CN

                     Microcistina

                                    CP = control positivo   +   +       + +               +
                                    CN = control negativo
Biología molecular: Implementación de monitoreo de
                     cianobacterias tóxicas en el ambiente
                                                                                                                                                           PCR

                                                                                             30 Agosto
                                                                                  8 Agosto
                                                  20 mayo

                                                                                                         16 Sept.

                                                                                                                    30 sept.
                                                            15 Junio

                                                                       14 Julio

                                                                                                                               13 Oct.

                                                                                                                                         31 Oct.
                                                                                                                                                   CP CN

                     ERCE PAS                     +          +                     + +                                                    +

                                Número total de                         Verano
                                copias de genes
                                                                                                                                                      qPCR

Detección temprana de
potencial tóxico     ERCE PAS                               Fecha de colecta
Contenido (línea de tiempo)
 Por qué las bacterias?

                                   Soluciones          Biofiltros secuenciales de sedimentación y biofiltración
                             Ecohidrológicas Basadas
                                en la Naturaleza       Barreras desnitrificantes

              La Fuente de                    Aumento de nutrientes y/o                      Degradación de ecosistema
             contaminación                    contaminates en sistemas                          (p.e. Afloramiento de
           (puntual vs difusa)                       acuáticos                                 cyanobacterias tóxicas)

                                                 Monitoreo Físico-Químico                        Monitoreo Biológico

ERCE PAS                                                                                       Ciudad de Lodz (Polonia Central)

                                                       Ecohidrología en la gestión de agua
Biotecnología: el uso de las bacterias para el beneficio humano

             Las bacterias tienen
           mecanismos bioquímicos
          que pueden ser utilizador a
               nuestro favor en
              BIOREMEDIACIÓN

Degradación, asimilación o acumulación de
contaminantes:

Origen natural: toxinas producidas por otras
bacterias, ejemplo: las cyanotoxinas, etc.

Origen antropogénico (xenobióticos): contaminantes
iónicos (amonio, nitrato, nitrito y fosfato),
contaminates orgánicos (pesticidas, fármacos y
hidrocarbonos poliaromáticos, etc.)

                                                     © Copyright. 2014. Universidad de Waikato. Todos los derechos reservados.
                                                     www.biotechlearn.org.nz

                                                          Ecohidrología en la gestión de agua
Biotecnología: la importancia de las bacterias en EH NBS

                                                                                      Nutrientes
Ciclo del Nitrógeno                                                                                                Ciclo del Fósforo
(https://biologywise.com/nitrogen-cycle-steps)     nosZ gene                                                        (https://venngage.net/p/160218/the-phosphorus-cycle)

                                                   (reductasa de óxido nitroso)

                                                                          N2 O
                                                                          (óxido nitroso)

                                                                            NO
                                                                            (óxido nítrico)

                                                                    Bacterias
                                                                    desnitrificantes

        amoA gene                                Bacterias nitrificantes                                                  Bacterias acumuladoras de fosfato
        (amonio mono-oxigenasa)
                                                                                                                                      gen ppk (Quinasa de polifosfato)

                                                                                    Ecohidrología en la gestión de agua
Soluciones Ecohidrológicas basadas en la Naturaleza

Sistemas secuenciales de sedimentación-biofiltración (SSBSs)                                      Barreras desnitrificantes (BD)

                                                 Fotografía: ERCE PAS      Fotografía: ERCE PAS         Fotografía: ERCE PAS

                                                          Ecohidrología en la gestión de agua
Sistemas secuenciales de sedimentación-biofiltración (SSBSs)

1 Áreas urbanas: comunidades microbianas en sistemas secuenciales de sedimentación -
   biofiltración (SSBSs por sus siglas en inglés) centrado en el tratamiento de la escorrentía de
   aguas pluviales urbanas
                                                            Reservorio,
                                                            lago o laguna

                                                                            Material utilizado para la construcción de zonas geoquímicas (GEOz): roca caliza (A) o dolomita (B),
                                                                            y zona desnitrificante (DENz): lignita (C). Formación de biopelícula microbiana sobre piedra caliza.

                                                                                                                        [1]                                                  [2]

                                                     - Lignito

                                                                                                   Fotografía: Font Nájera A.   Fotografía: Font Nájera A.
  Figura adaptada de Font-Nájera et al., Ecological Engineering (2020).
                                                                             Ejemplos de SSBSs operando en Polonia, Río Sokolowka en ciudad de Lodz (9 años, [1]), y Río Struga
  DOI: 10.1016/j.ecoleng.2020.105796
                                                                             Gnieznienska en ciudad de Gniezno (3 años [2]).
Sistemas secuenciales de sedimentación-biofiltración (SSBSs)

                                                            SSBSs (3 sistemas)
     Temperature (C⁰)                                                                              NO3- NH4+
     Oxygen (mg/L; %)                                                                              Total Phosphorus (TP)
    Conductivity (µS/cm)
                                                                                                   Organic matter (%)
            pH

                                                INF SEDz GEOz       DENz   BIOz   OTF
                                                                                                  Microbial metabolic activity
                                                                                                  BIOLOG Eco plates
5 diferentes temporadas
                                Muestras de                                                       Molecular analysis
                                  agua                                          Sediment            1- Key functional genes
Agosto 2017   (verano)                                                     Limestone / Dolomite     2- Bacterial communities
Octubre 2017 (otoño)                                                           Brown coal
Abril 2018   (primavera)
                                                                                                   Isolating and
Agosto 2018   (otoño)
                           Ions:NO2-   NO3-   NH4+   PO4-                                          characterization of
Noviembre 2018 (Otoño)
                           Total Nitrogen (TN)                                                     nutrient transforming
                           Total Phosphorus (TP)                                                   bacteria
Sistemas secuenciales de sedimentación-biofiltración (SSBSs)

                                                                                                           Abundancia de bacterias transformadoras
                              Actividad microbiana en biopelículas de                                      de nitrógeno en SSBSs
                              zonas geoquímicas

                        1.2                                                                                                                             Desnitrificantes
Actividad metabólica

                         1
                        0.8                                                                                                                             Nitrificantes
                        0.6                                          Piedra Caliza
                        0.4                                          Dolomita

                        0.2
                         0
                               Primavera    Verano     Otoño

                                                                                                          Bacterial nitrificates, fueron mas abundantes en:
                       Se encontro mayor actividad metabólica microbiana
                                                                                                          • primavera (14.2 ± 2.5 °C),
                       sobre la superficie de la Piedra caliza, comparado con
                                                                                                          • zonas geoquímicas (roca caliza) y desnitrificantes (lignito)
                       dolomita.
                                                                                                          Bacterias desnitrificantes, fueron mas abundantes en:
                       La mayor porosidad de la Piedra caliza puede ser el factor
                                                                                                          • Verano (21.9 ± 1.9 °C),
                       que ayudó al mayor Desarrollo de biopelícula.
                                                                                                          • Zonas desnitrificantes con lignita

            *basado en información de Font-Nájera et al., 2021, International Biodeterioration & Biodegradation, doi.org/10.1016/j.ibiod.2021.105203.
Sistemas secuenciales de sedimentación-biofiltración (SSBSs)

                                                                           Sok      Gnz

• Potenciales bacterias denitrificantes
      - Comamonadaceae (GEOz, DENz)
      - Rhodobacteraceae (GEOz, DENz)
      - Crenotrichaceae (DENz)
      - Fravobacteriaceae (DENz)

• Potenciales bacterias acumuladoras de
  fosfatos
      - Rhodocyclaceae (GEOz)

                                          Fig 7. Abundancia relativa (%) de la comunidad bacteriana en GEOz (roca caliza) y DENz (lignita)
                                          utilizando el gen 16S rRNA. Font-Nájera et al., 2021, International Biodeterioration & Biodegradation,
                                          doi.org/10.1016/j.ibiod.2021.105203.
Sistemas secuenciales de sedimentación-biofiltración (SSBSs)

                            Biopelícula microbiana

                                                                                                           Concentración (mg L-1)
Zona geoquímica
  - Roca caliza
                                  superficie

 Zona desnitrificante
   - Lignita
                                  superficie

                                                    Bacterias nitrificantes
                                                    Bacterias desnitrificantes
                                                    Otras bacterias

                                                                                                                                          63.4 73.8 32.9 84.9 72.5 (% de remoción)
 Entrada de agua (INF)                          Zona geoquímica
                                                                                                                                         Font-Nájera et al., 2021, International Biodeterioration &
 Escorrentía de lluvia                              (GEOz)                                                                               Biodegradation (3 temporadas de operación)

                                                                                                                                    Salida de agua (OTF)
Eje horizontal de un
Sistema SSBS (por sus       Zona de sedimentación            Zona de desnitrificación   Zona de biofiltración
siglas en inglés)                                                                             (BIOz)
                                  (SEDz)                               (DENz)
Sistemas secuenciales de sedimentación-biofiltración (SSBSs)

           Pausa
           Video: Primer SSBSs en la ciudad de Lodz (Polonia Central)

ERCE PAS
Sistemas secuenciales de sedimentación-biofiltración (SSBSs)
11       Áreas rurales: Desarrollo e implementación de productos biotecnológicos para la agriculturea y la gestion de
     2   aguas residuales para reducer la contaminación del agua - AZOSTOP TANGO2/339929/NCBR/2017
         Coordinator: Prof. dr hab. Maciej Zalewski   Main contractors: prof. dr hab. Joanna Mankiewicz-Boczek,   www.azostop.com
                                                      dr hab. Edyta Kiedrzyńska, Dr. Agnieszka Bednarek

                    río

                          reservorio

                                                                                                                           (Kiedrzynska et al., 2017, Scientific Reports)A.
Aislamiento de bacterias de SSBSs

                                                                                                                                                               ϒ-Proteobacteria
                              Experimentos controlados en
                              laboratorio con medio selectivo

                                                                                                                                                               β-Proteobacteria
                                  Nitrificación
                  ERCE PAS
                                 Denitrificación

                               Nitrificación-Denitrificación                                                                                        Firmicutes
                                        Simultanea

                                                                                                                                              Actinobacteria
ERCE
 ERCEPAS
      PAS
                                             Phylogenetic description using the 16S rRNA gene of the 10 selected bacteria, out from a total of 150 strains, that
                                             performed nitrogen removal activity. Two strains (marked with red arrow) were selected for further experiments.
                                             Figure adapted from Font Nájera A et al., 2021, Scientific Reports, doi.org/10.1038/s41598-021-86212-3
Potencial biotecnológico de bacterias aisladas para remover compuestos nitrogenados
                               Transformación de compuestos nitrogenados   Caracterización genetica para determiner los
                                                                           procesos involucrados en el ciclo del nitrógeno
Citrobacter fruendii Bzr02

                                                                                                                             Resultados importantes

                                                                                                                                   Reductor de nitrato
                                                                                                                                   Asimilador de nitrógeno
                                                                                                                                    Remueve hidroxilamina
Pseudomonas mandelii Str21

                                                                                                                                Resultados importantes

                                                                                                                                     Desnitrificador
                                                                                                                                     Asimilador de nitrógeno

                                                                                                                             Figures from Font Nájera A et al., 2021, Scientific
                                                                                                                             Reports, doi.org/10.1038/s41598-021-86212-3
Barreras Desnitrificantes (BD)

        Áreas rurales: Desarrollo e implementación de productos biotecnológicos para la
  2 agriculturea y la gestion de aguas residuales para reducer la contaminación del agua
                                                                                                                 Construcción de barrera

                                                                            Barrera vertical

                                                  NO3-
Barrera horizontal                NH4+
                                              NO2-                                                                            Fotografía: ERCE PAS

                                                                                                           Inoculación de bacterias
                                                           (adaptado de Bednarek et al., 2014, DOI:        desnitrificadoras
                                  Materiales utilizados    https://doi.org/10.1016/j.ecohyd.2014.01.005)

                                                             Fotografía: Universidad de Lodz
     Biopelícula con
     microbiota desnitrificante       Aserrín de pino   Paja de cebada    Paja de linaza       Lignita

                                                                                                                              Fotografía: ERCE PAS
Barreras Desnitrificantes (BD)
       Áreas rurales: Activadores microbianos en depósitos desnitrificadores utilizados para el tratamiento de la
 2 contaminación por nitratos para la aplicación de la Directiva del Marco de Agua y la directive sobre el nitrato
                                                                                                               Remoción de amonio del estiércol, cuatro
Coordinator: Prof. dr                                                                                                   meses de operación
                                                                                                     500
hab. Maciej Zalewski
                                                                                                     400
                                                                                                                           remoción ± 73%

                                                                                                                                                                Graph: ERCE PAS
Main contractors:
prof. dr hab. Joanna

                                                                                 NO3 [mg/l]
                                                                                                     300
Mankiewicz-Boczek
Dr. Agnieszka Bednarek                                                                               200

                           Fotografía: ERCE PAS                                                      100

                                                                                                       0
                                                                                                                 I         II              III         IV
                                   1      2         3   2     1      3
                                                                                                               Remoción de amonio del estiércol, cuatro
                                                                                                                        meses de operación
                                                                                                       500

                                                                                                       400

                                                                                                                                                            Graph: ERCE PAS
                                                                                        NH4 [mg/l]
                                                                                                       300
                                                                                                                                     remoción ± 100%
                             Fotografía: ERCE PAS                                                      200

                                                                                                       100
                                  Calidad del lixiviado: 1) Estiércol,
                         2) dentro del depósito, and 3) detrás del depósito.                               0
                                                                                                                     I          II         III         IV

              11
Otras aplicaciones interesantes de las bacterias

ERCE PAS

           11
Otras aplicaciones interesantes de las bacterias

     La Ficosfera cianobacteriana

                                                          Bacterias degradadoras de cianotoxinas
                                                             Utilizan la microcistina como fuerte de
                                                             carbono (alimento).

                                                         Bacterias algicidas
                                                             Producen metabolitos secundarios que
                                                             dañan la membrana y pared celular de
                                                             las cianobacterias

11
Bacterias degradadores de microcistina

  Photo: ERCE PAS
                                                 Sphingosinicella
Fotografía del reservorio de Jeziorsko con                                          Font Najera et al., Biologia 2017
     florecimiento de cyanobacteria
                                                 microcystinivorans JEZ-8L

                                                                                                           92% de remoción de
                                                                                                           microsistina (10 mg/L)
                                                                                                           en 7 días.

   Photo: ERCE PAS
                                                    Font-Najera et al., 2017, Biologia, Doi: 10.1515/biology-2017-0172

  11
Bacterias con capacidad alguicida

  Embalses aguas abajo: Aislamineto, identificación y caracterización de bacterial alguicidas como
  un factor potencial para controlar la aparición de afloramientos de cyanobacterias tóxicas en
  agua dulce (NCS 2019/33/B/NZ8/02093)         Coordinator: Prof. dr hab. Joanna Mankiewicz-Boczek

                                                                            (1)                                                                             (2)

                                                                                                         Fotografía: ERCE PAS

                                                                            (A)                           (B)                                               (C)

Ensayos de degradación de cyanobacteria (Microcystis aeruginosa,
cada plato es una diferente cepa) con bacterias aisladas
                                                                                                     Fotografía: ERCE PAS, Liliana Serwecińska

 Co-cultivos en donde se encontró actividad algicida
                                                                            1) Recolección de muestra de afloramiento de cyanobacteria, 2) incubación de las
                                                                            muestras. A) Co-cultura de M. aeruginosa con bacteria alguicida luego de dos días de
                                                                            incubación, B) cambios después de 10 días de incubación, C) Cultivo de M. aeruginosa
                                                                            sin inoculación de bacteria alguicida (control).
Potenciales aplicaciones de bacterias degradadoras de microcistina y capacidad alguicida

                                           Estanques de contención agrícola
Plantas de tratamiento de agua

 ERCE PAS                                 ERCE PAS

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Grupo científico principal involucrado en las investigaciones

        •   Prof. dr hab. Joanna Mankiewicz-Boczek
        •   Dr. Agnieszka Bednarek
        •   Dr. Liliana Serwecińska
        •   Prof. dr hab. Edyta Kiedrzyńska
        •   Dr. hab. Magdalena Urbaniak
        •   Dr. Sebastian Szklarek
        •   Dr. Ilona Gągała-Borowska

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Lectura recomendada
doi.org/10.1016/j.ecohyd.2021.08.001

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Muchas gracias por su atención
                        Thank you for your attention

                                                            Joanna Mankiewicz-Boczek
                                                         j.mankiewicz@erce.unesco.lodz.pl

                                                                Arnoldo Font Nájera
                                                         a.font-najera@erce.unesco.lodz.pl

Fotografías: ERCE PAS
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