Tasa de propagación de plantas de Aloe vera(L.) Burm.f.del occidente de Venezuela
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Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 392-409 Tasa de propagación de plantas de Aloe vera(L.) Burm.f.del occidente de Venezuela Plant propagation rate of Aloe vera (L.) Burm.f. in western Venezuela T. Molero-Paredes1 y L. Bermúdez-Fung2 1 Centro de Investigaciones Biológicas. Facultad de Humanidades y Educación. Universidad del Zulia. Edificio Ciencia y Salud. Maracaibo, Zulia, Venezuela. 2 Laboratorio de Biotecnología “Silvia León de Sierralta”. Facultad de Agronomía. Universidad del Zulia. Núcleo Humanístico. Zulia, Venezuela. Resumen El cultivo de Aloe vera (L.) Burm.f. representa un gran potencial para el campo agrícola venezolano por la demanda que tienen, nacional e internacionalmente, los productos primarios y subproductos de esta planta. Por ello, se realizó una investigación descriptiva con el objeto de determinar la Tasa de Propagación (TP) y Tasa de Velocidad de Propagación (TVP) de las plantacio- nes de zábila, en diferentes poblaciones del occidente de Venezuela, multiplicadas in vivo e in vitro. Los resultados revelaron que las plantas de zábila de las pobla- ciones de los Mayales (municipio Guajira, estado Zulia), Tamare (municipio Mara, estado Zulia) y Cumarebo (municipio Colina, estado Falcón) son las que poseen mayores índices de TP y TVP, tanto en condiciones in vivo como in vitro. Los valores de TP y TVP fueron mayores para las plantas propagadasin vitro que in vivo para todas las poblaciones estudiadas. Las diferencias en el comportamiento de las plantas estudiadas en cuanto a la producción de brotes, pueden ser debidas a la adaptación de cada genotipo al medio donde se desarrolla. Esta información permite seleccionar las mejores plantas de A. vera para la propagación masiva destinada a establecer nuevas plantaciones. Palabras clave: Aloe, tasa de propagación, Venezuela. Recibido el 31-10-2012 z Aceptado el 23-7-2013 Autores de correspondencia e-mail: tamimol@hotmail.com; lissettbermudez@gmail.com 392
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 392-409 Abstract The cultivation of Aloe vera (L.) Burm.f represents a great agricultural potential in the Venezuelan field, for the demand that has, both nationally and internationally, the primary products and by-products of this plant. Thus, a descriptive research was conducted in order to determine the propagation’s rate (TP) and velocity of propagation’s rate (TVP) of aloe plantations in different populations of western Venezuela multiplied in vivo and in vitro. The results showed that aloe plants of the populations of Mayales (Guajira county, Zulia state), Tamare (Mara county, Zulia state) and Cumarebo (Colina county, Falcon state) are those that have higher rates of both TP and TVP in nursery condition and in vitro. The values of TP and TVP were higher in vitro propagated plants that in vivo for all populations studied. The differences in the behavior of the plants tested as to shoot production may be due to the adaptation of each genotype at the medium where it develops.This information allows selecting plants of A. vera to improve the mass propagation of aloe destined for establishing new plantations. Key words: Aloe, propagation rate, Venezuela. Introducción Introduction El nombre popular del Aloe vera The popular name of Aloe vera (L.) Burm.f. (=A. barbadensis Mill.) (L.) Burm.f (=A. barbadensis Mill.) varía en los diferentes países y pue- varies in the different countries and blos alrededor del mundo y es así como towns around the world, and the se encuentran los nombres de aloe, names for this species are: aloe, babo- babosa, pitazabila, sábila, zabida, sa, pitazabila, sabila, zabida, zabila, zábila, zabin, zabira, zadiba, zambaza, zabin, zabira, zadiba, zambaza, among entre otras (Guillot et al., 2009). Esta others (Guillot et al., 2009). This plant planta fue considerada por los egipcios was considered by the Egyptians as a como fuente de belleza, salud y eterni- source of beauty, health and eternity, dad, siendo utilizada por numerosas and has been used since the antique civilizaciones desde la antigüedad. Hoy times until now. Nowadays, this plant en día las aplicaciones son mucho más is also used in the medicine, amplias en la industria de la medici- pharmaceutical and cosmetology na, farmacéutica y cosmetológica y en enterprises as well as in the production la producción de alimentos. of food. Su origen y centro de distribu- Its origin and distribution center ción fue, probablemente, desde was probably from Arabia (Stevens, Arabia(Stevens, 2000), aunque existen 2000) though there are some authors otros autores que sugieren que la plan- that suggest that the plant is native ta es nativa del norte de África (Guillot from the north of Africa (Guillot et al., et al., 2009; Schweizer, 1994). Se ca- 2009; Schweizer, 1994). It is 393
Molero-Paredes y Bermúdez-Fung racteriza por poseer hojas alargadas, characterized by having long, pulpy carnosas y ricas en agua dispuestas leaves rich in water and organized as amanera de roseta; alcanza una altu- a rosette; it reaches a height from 50 ra de 50 a 70 cm y un peso promedio to 70 cm and a superior average weight superior a los 8 kg; las inflorescencias of 8 kg; the inflorescences correspond corresponde al tipo panoja, con flores to the panicles, with tubular, hanging tubulares, colgantes y amarillas. Su and yellow flowers. Its root is partly raíz es medianamente superficial, de superficial with a pulpy structure estructura carnosa (Vega et al., 2005) (Vega et al., 2005) La reproducción de A. vera se The reproduction of A. Vera is realiza o bien con las semillas o bien done by seeds or by the resurgences por los renuevos (hijuelos) que brotan that come from the base of the plant. desde la base de la planta. Sin embar- However, its sexual propagation, after go, su propagación sexual, a partir de fruits and seeds, is extremely scarce, frutos y semillas es extremadamente thus its multiplication is traditionally escasa, por loque su multiplicación se done dividing the sprouts or hace tradicionalmente por separación resurgence. In Venezuela, it has been de brotes o hijos. En Venezuela se ha observed that even after the flowering observado que aún después de la flora- of thousand of plants frequently visited ción de miles de plantas que han sido by several vectors, such as visitadas frecuentemente por numero- hummingbirds, bees, wasps and sos vectores, tales como colibríes, abe- butterflies, there are not any formation jas, avispas y mariposas, no hay for- of fruits (Imery, 2007). The mación de frutos (Imery, 2007). La incapability of Aloe Vera to reproduce incapacidad de la zábila de reproducir- sexually has been studied (Imery, se sexualmente ha sido estudiada 2007; Imery and Cequea, 2002) (Imery, 2007; Imery y Cequea, 2002) revealing the existence of chromosome revelándose la existencia de anormali- abnormalities, dichogamy, micro- dades cromosómicas, dicogamia, nucleus, irregular proliferation of the micronúcleos, proliferación irregular mother cells of pollen (CMPs) and auto- de las células madres del polen (CMPs) incapability that limit the sexual y autoincompatibilidad que, en defini- reproduction of these plants and is a tiva, limitan la reproducción sexual en barrier for their fast propagation. estas plantas y es una barrera para The establishment of Aloe Vera su rápida propagación. plantations has been done El establecimiento de plantacio- transplanting the resurgences. But, nes de zábila se ha realizado mediante the regeneration of A. Vera in the el trasplante de hijuelos. Pero, contra- nature (in vivo) is too slow and not riamente, la regeneración de A. vera enough to satisfy the industrial en la naturaleza (in vivo) es demasia- demand (Jayakrishna et al., 2011). do lenta e insuficiente para satisfacer Rathore et al. (2011) indicate that the la demanda industrial (Jayakrishna et wide use of aloe products and the al., 2011). Rathore et al. (2011) indica accelerate expansion of the diversity que el amplio uso de los productos de of these products in the medicine, 394
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 392-409 aloe y la acelerada expansión de la di- pharmaceutical and cosmetic versidad de estos productos en la in- enterprise have produced an dustria de la medicina, farmacéutica increment on the demand of their y cosmética, ha producido un incre- leaves, which does not correspond to mento en la demanda de sus hojas, la the current production. Therefore, cualno ha sido satisfecha con la pro- there is a need to carry out selecting ducción actual. Por lo tanto, existe la programs of elite genotypes to obtain necesidad de emprender programas de a great quantity of resurgences to selección de genotipos élites, de los cua- spread the specie and to establish new les se obtengan gran cantidad de hi- commercial sows. juelos para propagar la especie y esta- Contreras (1990) Nayanakantha blecer nuevas siembras comerciales. et al. (2010) inform that an Aloe Vera Contreras (1990) y Nayanakantha plant requires a period of at least a et al. (2010) informan que una planta year for the production of de zábila requiere un período de, por lo approximately four resurgences of menos, un año para la producción de sprouts after the transplant. aproximadamente cuatro hijos o brotes, However, Sing et al. (2009) and después de la realización del trasplan- Jayakrishna et al. (2011) indicate te. Sin embargo, Sing et al., (2009) y that the proliferation of new sprouts Jayakrishna et al. (2011) indican que is not always homogenous, because it la proliferación de nuevos brotes no depends of the age of the plant, its size siempre es homogénea, puesto que de- and genetic constitution that make pende de la edad de la planta, su tama- them more capable of producing ño y de su constitución genética que la higher or less quantity of sprouts used hacen más capaz de producir mayor o for a new sow. Likewise, the menor cantidad de brotes utilizados regeneration of sprouts is different para una nueva siembra. De esta ma- between the different genotypes of the nera, la regeneración de brotes es dis- same specie. tinta entre los diferentes genotipos de To improve the propagation of la misma especie. Aloe Vera, the in vitro technique has Para mejorar la propagación de been used as a tool that allows la zábila se ha recurrido a la técnica increasing the multiplication rate in del cultivo in vitro, como una herra- short time to satisfy the commercial mienta que permite aumentar la tasa demand of the sprouts. There are lots de multiplicación en corto tiempo para of researches carried out to define the satisfacer la demanda comercial de most adequate technique for the in hijuelos. Muchas son las investigacio- vitro propagation of Aloe Vera nes que se han realizado para definir (Vílchez et al., 2007; Abadi and la técnica más adecuada para la pro- Kaviani, 2010; Jayakrishna et al., pagación in vitro de zábila (Vílchezet 2011) where have been evaluated the al., 2007; Abadi y Kaviani, 2010; culture medium (Pérez et al., 2010), Jayakrishna et al., 2011) en las que se biological material (Albany et al., han evaluado los medios de cultivos 2006), cut of the explants (Pérez et al. 2010), material biológico (Nayanakantha et al., 2010), hormo- 395
Molero-Paredes y Bermúdez-Fung (Albany et al., 2006), corte del explante nal concentration (Chaplot et al., (Nayanakantha et al., 2010), concen- 2007), proliferation of the sprouts tración hormonal (Chaplot et al., (Oliveira and Crocomo, 2009), among 2007), proliferación de brotes (Oliveira others. y Crocomo, 2009), entre otros. In the Occident of Venezuela, the En la zona occidental de Venezue- main commercial sows of A. Vera are la, las principales siembras comercia- in Falcón, Lara and Zulia states. In les de A. verase encuentran en los es- Falcón there are 9000 cropped tados Falcón, Lara y Zulia. En el esta- hectares, being the counties Falcón, do Falcón existen 9000 hectáreas cul- Miranda, Colina and Sucre the ones tivadas, siendo los municipios Falcón, with greater importance because of the Miranda, Colina y Sucre los de mayor sowed surface 900, 1200, 1000 and 2000 importancia por la superficie cultiva- hectares respectively (Piña and Mora- da con 900, 1200, 1000 y 2000 hectá- les, 2010; Piña and Chirinos, 2008; reas respectivamente (Piña y Morales, Piña, 2005). In Zulia, there is not any 2010; Piña y Chirinos, 2008; Piña, precise data about the quality of the 2005). En el estado Zulia, no existen cropped surface, however, Mara, Gua- datos exactos sobre la cantidad de su- jira and Miranda counties are the perficie cultivada, sin embargo, los pioneers in the propagation of this crop. municipios Mara, Guajira y Miranda In Lara state, the producers of son los pioneros en la propagación de Urdaneta County are the ones who este cultivo. En el estado Lara, los pro- develop this plant commercially taking ductores del municipio Urdaneta son advantage of 500 ha approximately los que explotan este rubro comercial- (Piña, 2005). mente aprovechando 500 ha aproxima- The importance of the damente (Piña, 2005). continuous demand of Aloe Vera La importancia de la demanda sprouts for the establishment of new continua de hijuelos de zábila para el plantations, the crescent increment of establecimiento de nuevas plantacio- cropped hectares in the national land, nes, el aumento creciente de hectáreas the need to select elite genotypes with cultivadas en el territorio nacional, la high production of resurgences and necesidad de seleccionar genotipos the importance of this crop for the élites con gran producción de hijuelos agricultural Venezuelan market, y la importancia que reviste este cul- makes necessary to carry out tivo para el campo agrícola venezola- researches that allow to know the no por la diversidad de productos y propagation rate of A. Vera plants in subproductos que se obtienen de esta different areas in the Occident of Ve- planta, hace necesario, realizar inves- nezuela, in natural and in vitro tigaciones que permitan conocer la tasa conditions. For this reason, the de propagación de las plantas de A. objective of this research is to deter- vera en las diferentes zonas del occi- mine the propagation rate and the dente de Venezuela tanto en condicio- velocity rate of the propagation of the nes naturales, como multiplicadas in A. Vera plants (L.) of the Occident of vitro. Por ello, el objetivo de esta in- Venezuela in vivo and in vitro. 396
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 392-409 vestigación es determinar la tasa de Materials and methods propagación y la tasa de velocidad de propagación de las plantas de A. vera Obtaining of the material: the (L.) del occidente de Venezuela in vivo sampling procedure was done in three e in vitro. states of Venezuela, located in the Occident of the country, Falcón, Lara Materiales y métodos and Zulia. Aloe Vera plants were collected from the most important Obtención del material: La commercial cultivars of Tamare (T) in toma de las muestras se realizó en tres Mara county (10°512 343 N 71°452 443 estados de Venezuela ubicados en el W), population Mayales (M) in Guaji- occidente del país, Falcón, Lara y ra county (10°542 563 N 71°492 383 Zulia. Se recolectaron plantas de zábila W) and Puertos de Altagracia (PA) of de los cultivares comerciales más im- Miranda county, Zulia state (10°402 portantes de la población de Tamare 143 N 71°312 363 W). In Falcón, the (T) en el municipio Mara (10°512 343 collection was done in the populations N 71°452 443 W), población los of Caramón, (11°032 133 N69°452 073 Mayales (M) en el municipio Guajira W), Adaure (A) (11°522 223 N 69°592 (10°542 563 N 71°492 383 W) y pobla- 183 W), Cumarebo (CU) (11°292 163 ción de los Puertos de Altagracia (PA) N 69°212 083 W) and Carazao (CA) del municipio Miranda del estado Zulia (11°142 263 N 70°062 083 W) of Sucre, (10°402 143 N 71°312 363 W). En el Falcón, Colina, and Miranda counties, estado Falcón, la recolección se realizó respectively. In Lara state, the en las poblaciones de Caramón (C) collection was done in the population (11°032 133 N69°452 073 W), Adaure Siquisique (S) (10º34´9´´N 69º42´20´´W) (A) (11°522 223 N 69°592 183 W), Urdaneta county. Cumarebo (CU) (11°292 163 N 69°212 For the threshold propagation, 15 083 W) y Carazao (CA) (11°142 263 N Aloe Vera plants were collected at 70°062 083 W) de los municipios Sucre, random from each county, these plants Falcón, Colina, y Miranda, respectiva- were from 18 to 24 months and had mente. En el estado Lara, la recolec- from 10 to 15 stalks per plant, with ción se realizó en la población de good vigor and were healthy. Likewise, Siquisique (S) (10º34´9´´N 69º42´20´´W) for the in vitro propagation 15 plants del municipio Urdaneta. were collected from each county, from Para la propagación en vivero, se 6 to 12 months old, which had from 6 recolectó aleatoriamente 15 plantas de to 8 stalks and good vigor, which were zábila de cada municipio quetenían employed as explants for the edades de18 a 24 meses y presentaban multiplication in vitro. This research de 10 a 15 pencas por planta, con buen phase carried out in the threshold of vigor y sanas. De igual manera, para Humanities Faculty, Universidad del la propagación in vitro se recolecta- Zulia. ron15 plantas de cada municipio, con In vivo propagation of the A. edades de 6 a 12 meses, que presenta- vera plants: the collected plants were ban de 6 a 8 pencas y con buen vigor, cleaned very carefully and sowed in 397
Molero-Paredes y Bermúdez-Fung las cuales se emplearon como explantes polyethylene bags of 4 L of capacity para la multiplicación in vitro. Esta with a mix of sand and manure (50:50), fase de la investigación fue llevada a were previously disinfected with hot cabo en el vivero de la Facultad de water. The plants kept in threshold Humanidades de la Universidad del conditions from 12 months and were Zulia. watered once a week. The register of Propagación in vivo de las new resurgences was done within 6 to plantas de A. vera: las plantas reco- 12 months after the sow of each plant, lectadas se limpiaron cuidadosamente and the average as long to the stan- y sembradas en bolsas de polietileno dard deviation were measured from de 4 L de capacidad que contenían una each resurgence. mezcla de arena y abono (50:50) pre- In vitro propagation of A. viamente desinfectada con agua calien- vera plants: 15 plants used as te. Las plantas se mantuvieron en con- explants for the in vitro cultivation diciones de umbráculo por 12 meses y kept for two weeks in threshold regadas una vez por semana. El regis- conditions, with the object of tro de nuevos hijuelos se realizó a los 6 controlling the optimum sanitary y 12 meses después de sembradas cada conditions and having an adequate planta y se calculó el promedio y la nutritional and irrigation control. desviación estándar de hijuelos por The methodology employed for población. the establishment and multiplication Propagación in vitro de las of the explants in vitro was the plantas de A. vera: las 15 plantas proposed by Albany et al. (2006). que fueron empleadas como explantes According to this protocol, the plants para el cultivo in vitro, se mantuvie- are cleaned and washed with soapy ron por dos semanas en condiciones solution and water twice in a row. The de vivero con el objeto de controlar las buds are isolated removing all the condiciones sanitarias óptimas y te- external leaves of the plants and ner un control de la nutrición y riego cutting the internal, without adecuado. damaging the apical area; thus, the La metodología empleada para el explants reduced to 3 cm establecimiento y multiplicación de los approximately. The explants are explantes en cultivo in vitro fue la pro- disinfected with sodium hypochlorite puesta por Albany et al. (2006).Según at 3% after commercial chloride este protocolo, las plantas son limpia- (5.25%) for 10 minutes. This step is das y lavadas con solución jabonosa y repeated three times. Subsequently, agua de chorro dos veces seguidas. Las the size of the explants was reduced to yemas son aisladas retirando todas las 1 cm of height to obtain the nodal hojas externas de las plantas y recor- segments, which were sowed in essay tando las internas, sin dañar la zona tubes containing 10 mL of liquid apical, quedando reducida la altura del culture medium constituted by: 50% explante a 3 cm aproximadamente. Los of salts of the culture medium explantes se desinfectan con solución de Murashige and Skoog (MS) (1962) and hipoclorito sódico al 3% a partir de clo- supplemented with 1 mg.L -1 of 398
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 392-409 cloro comercial (5,25%), por 10 minu- thiamine-HCl, 100 mg.L-1 of myo- tos. Este paso se repitió tres veces. inositol, 25 mg.L-1 of cysteine, 100 Seguidamente, el tamaño de los mg.L-1 of ascorbic acid and 30 g.L-1 of explantes fue reducido a 1 cm de altu- sucrose; adjusting the pH to 5.8. The ra para obtener los segmentos nodales, explants were put into an incubation los cuales se sembraron en tubos de chamber at a temperature of ensayo que contenían 10 ml de medio 27°C±2°C, with a continuous white de cultivo de consistencia líquida cons- light of 150 mmol.m-2 .s-1. tituido por: 50% de las sales del medio Once developed and established de cultivo Murashige y Skoog (MS) the seedlings, these were sowed in (1962) y suplementado con 1 mg.L-1 de multiplication semi-solid culture tiamina-HCl, 100 mg.L -1 de mediums. The culture medium was mioinositol, 25 mg.L-1 de cisteina, 100 similar to the one described previously, mg.L-1 de ácido ascórbico y 30 g.L-1 de supplemented with 1 mg.L -1 of 6- sacarosa; ajustando el pH a 5,8. Los benzylaminopurine (BAP= and gel explantes se colocaron en una cámara with 5 g.L-1 of agar. The explants were de incubación a una temperatura de sowed in glass jars with 100 mL of 27°C±2°C, bajo luz blanca fluorescen- capacity that had 20 mL of the culture te continua de 150 mmol.m-2.s-1. medium. The seedlings coming from Una vez desarrolladas y estable- each population were numbered from cidas las plántulas, éstas se sembra- 1 to 20 with the aim of registering the ron en medios de cultivo de multipli- sprouts originated from each explants. cación en estado semisólido. El me- After 60 days, the sprouts were dio de cultivo fue similar al descrito subculture or multiplied. The register anteriormente, suplementado con 1 and quantification were done of the mg.L-1 de 6- bencilaminopurina (BAP) quantity of sprouts obtained by y gelificado con 5 g.L -1 de agar. Los seedling/population and, the average explantes se sembraron en envases and standard deviation were measured de vidrio con capacidad de 100 mL by population. This procedure was que contenían 20 mL de medio de replicated on four cycles. cultivo. Las plántulas provenientes Propagation rate (TP) was de cada población se enumeraron del measured considering the information 1 al 20 con el objeto de registrar el provided by Torres et al. (2010), número de brotes originados de cada expressed in the total number of new explante. plants obtained/number of progenitor Al cabo de 60 días se procedió a plants. The TP for the plants subcultivar los brotes o a su multipli- propagated in vivo was measured cación. Se realizó el registro y according to the register date of the cuantificación de la cantidad de brotes data within 6 to 12 months; in in vitro obtenidos por plántula/población y se plants, the TP was measured at the calculó el promedio y la desviación end of each crop. estándar por población. Este procedi- The velocity propagation rate miento se repitió por cuatro ciclos con- (TVP) was measured following the secutivamente. deSchuler et al. (2005) formula, 399
Molero-Paredes y Bermúdez-Fung La Tasa de Propagación (TP) se interpreted as the relation between the calculó tomando como base la informa- number of the new plants at the end ción suministrada por Torres et al. of the cycle, except the number of (2010), expresada en el número total plants introduced in the multiplication de plantas nuevas obtenidas/número phase on the time (t) expressed in de plantas progenitoras. La TP para months, that is TVP= (Nº of final las plantas propagadas in vivo se cal- plants in the cycle-Nº of plants culó según la fecha de registro de da- introduced to the cycle)/t. tos a los 6 y 12 meses; en las plantas The analysis of the data was done multiplicadas in vitro se calculó al fi- using the statistical software SPSS, 20 nal de cada ciclo de cultivo. version, using the variance analysis La Tasa de Velocidad de Propa- (ANOVA) and mean Tukey test. gación (TVP) se calculó según la fór- mula deSchuler et al. (2005), interpre- Results and discussion tada como la relación entre el número de plantas nuevas al final del ciclo In vitro multiplication is a useful menos el número de plantas introdu- tool to increase the propagation of cidas al ciclo en la fase de multiplica- plants that in natural conditions have ción, sobre el tiempo (t) expresados en a slow propagation. In this research meses, es decir TVP= (N° de plantas was seen one more time, that the finales en el ciclo-N° de plantas intro- propagation of A. vera plants is favored ducidas al ciclo)/t. in in vitro conditions, compared to in El análisis de los datos se realizó vivo. However, the values of TP and mediante el paquete estadístico SPSS TVP were different for each population versión 20 bajo ambiente Window, studied under the two growth mediante análisis de varianza conditions. (ANOVA) y pruebas de medias de In table 1 is observed the TP Tukey. obtained from the population of Aloe Vera naturally propagated in the Resultados y discusión threshold after 6 to 12 months. The average number of sprouts in all the La multiplicación in vitro es una studied populations is higher than the herramienta útil para aumentar la one reported by Contreras (1990). As propagación de plantas que en condi- can be observed, the quantity of ciones naturales poseen una tasa de sprouts increased at the time the plant propagación lenta. En este trabajo de had a more extended time in the investigación se evidenció, una vez threshold, that is, the age of the plant más, que la propagación de las plan- influences on its capacity to form tas de A. veraes favorecida en condi- sprouts. Nevertheless, the quantity of ciones in vitro, en comparación con las sprouts obtained from the different in vivo. Sin embargo, los valores de populations varied, being the plants of TP y TVP fueron diferentes para cada los Mayales, Guajira County, the ones población estudiada bajo las dos condi- that presented higher quantity of ciones de crecimiento. offsets in each of the studied periods. 400
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 392-409 En la cuadro 1 se observa la TP The plants coming from Tamare obtenida de las poblaciones de zábila (Mara county) are also outstanding, as propagadas naturalmente en el vivero well as the ones of Puertos de luego de 6 y 12 meses. El número pro- Altagracia (Miranda-Zulia counties) medio de brotes en todas las poblacio- and Cumarebo (Colina county). These nes estudiadas es mayor a lo reporta- populations have the highest indexes do por Contreras (1990).Como puede of TP and TVP with 8.9 and 1.48 for observarse,la cantidad de brotes au- Mayales, 6.7 and 1.12 for Tamare, 5.8 mentó a medida que la planta tenía and 0.97 in Cumarebo, finally, 4.9 and mayor tiempo en el vivero, es decir, la 0.82 in plants of Puertos de Altagracia. edad de la planta incide en su capaci- The plants coming from Carazao, dad de formación de brotes. No obstan- Caramón and Siquisique produced a te, la cantidad de brotes obtenidos de relatively constant quantity of sprouts las diferentes poblaciones fue variable, within 6 to 12 months. The differences siendo las plantas de los Mayales del in the behavior of plants of the different municipio Guajira, las que presenta- regions of the Occident, regarding the ron mayor cantidad de hijuelos en cada production of sprouts, might be due to uno de los períodos estudiados. Tam- the adaptation of each genotype where bién se destacan las plantas provenien- it develops, Pierce (2009) considers Cuadro 1. Tasa de Propagación y Tasa de Velocidad de Propagación de plantas de Aloe vera de diferentes poblaciones del occidente de Venezuela obtenidas in vivo. Table 1. Propagation rate and velocity propagation rate of Aloe vera plants from different populations in the Occident of Venezuela obtained in vivo. 6 meses 12 meses Población TP TVP TP TVP Pr.TP Pr.TVP C 2,9 0,48 2,9 0,48 2,9d 0,48d A 3,3 0,56 4 0,67 3,7cd 0,61cd CA 2,7 0,46 2,9 0,49 2,8d 0,47d CU 5,5 0,92 6 1,01 5,8bc 0,97bc T 6,4 1,06 7 1,18 6,7ab 1,12ab PA 4,6 0,77 5,2 0,87 4,9bcd 0,82bcd M 8,2 1,37 9,5 1,59 8,9a 1,48a S 2,9 0,49 4 0,67 3,5cd 0,58cd TP: Tasa de Propagación; TVP: Tasa de Velocidad de Propagación: Pr.: Promedio Tasa de Propagación; Pr.: Promedio Tasa Velocidad de Propagación; C: Caramón; A: Adaure; CA: Carazao; CU: Cumarebo; T: Tamare; PA: Puertos de Altagracia; M: Mayales; S: Siquisique 401
Molero-Paredes y Bermúdez-Fung tes de Tamare (municipio Mara), Los that the environment modifies the Puertos de Altagracia (municipio Mi- genotype and interferes directly on the randa-Zulia) y Cumarebo (municipio growth and development of the species, Colina). Son éstas poblaciones las que producing different ecotypes after the poseen mayores índices de TP y TVP same genetic acquis. con 8,9 y 1,48 para la población de los In the particular case of Aloe Mayales, 6,7y 1,12 para las plantas de vera , it grows in xerophytic Tamare, 5,8 y 0,97 en la población de environments; Imery (2007) says that Cumarebo y finalmente 4,9 y 0,82 en it is possible that the environmental las plantas de los Puertos de stress in this area promotes the Altagracia. accumulation of high levels of Las plantas provenientes de anthraquinone in the aloe that cause Carazao, Caramón, y Siquisique pro- the chromosome instability during the dujeron una cantidad de brotes relati- meiosis process. The presence of these vamente constantes a los 6 y 12 me- secondary metabolites (MS) as a ses. Las diferencias en el comporta- defense response of the plant towards miento de las plantas de las distintas the bounds, to the attack of animals regiones del occidente del país en cuan- and the environmental conditions is to a la producción de brotes puede ser due to the changes in the debida a la adaptación de cada genotipo transcriptional activation of diverse al medio donde se desarrolla, ya que genes that affect the cellular Pierce (2009) considera que el ambiente reproduction and improve the modifica el genotipo e interfiere direc- production of the enzymes involved in tamente sobre el crecimiento y desa- the synthesis of MS, the production of rrollo de las especies, produciendo di- the proteins involved in the fortification ferentes ecotipos a partir de un mismo of the cellular wall and the synthesis acervo génico. of antimicrobial and antioxidant En el caso particular de la zábila substances (Sepúlveda et al., 2003). que crece en ambientes xerofíticos, The changes in the genes that Imery (2007) comenta que es posible control the enzymes and proteins que el estrés ambiental imperante en involved in the mitosis process by the estas zonas promueva la acumulación latter factors (environmental stress de altos niveles de antraquinonas en and presence of MS) must affect the el acíbar que ocasionan inestabilidad mitotic division for the formation of cromosómica durante el proceso de new resurgences in the plant, which meiosis. La presencia de estos might be the reason to explain the metabolitos secundarios (MS), como diversity of TP and TVP among the una respuesta de defensa de la planta population under study. ante heridas, al ataque de animales y In table 2 are observed the a las condiciones ambientales, se debe quantity of new vitroplants obtained a cambios en la activación from each in vitro crop cycle of the transcripcional de diversos genes que explants sowed from each of the afectan la reproducción celular y me- populations in the Occident of Vene- joran la producción de las enzimas zuela. As well as in the in vivo essay, 402
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 392-409 involucradas en la síntesis de los MS, the plants belonging to Guajira, Mara la producción de las proteínas and Colina counties were outstanding involucradas en la fortificación de la by their quantity of new sprouts pared celular y la síntesis de sustan- obtained in 8 months. 6.76, 15.88, 16.5 cias antimicrobianas y antioxidantes and 14.52 sprouts from Mayales plants (Sepúlveda et al., 2003). were obtained in the 1st, 2nd, 3rd and Los cambios en los genes que con- 4th cycles respectively, which surpass trolan las enzimas y proteínas the quantity of sprouts, obtain from involucradas en el proceso de mitosis the rest of the populations. The NB of por los factores antes nombrados the plants in Tamare and Cumarebo (estrés ambiental y presencia de los are also important from the point of MS), debe afectar la división mitótica view of the propagation of the plants. para la formación de nuevos hijuelos The indexes of TP and TVP for plants en la planta, lo cual puede ser la razón crop in vitro are higher than plants para explicar la diversidad de TP y crops in vivo. TVP entre las poblaciones en estudio. The average number of sprouts En la cuadro 2 se observa la can- of A. vera in a conventional tidad de nuevas vitroplantas obtenidas multiplication without any grow de cada ciclo de cultivo in vitro de los regulators was of 3.75 per explants explantes sembrados de cada una de (Albany et al., 2006). However, other las poblaciones del occidente de Vene- researchers report higher quantity of zuela. Al igual que en el ensayo in vitroplants handling values from 9 vivo, se destaca nuevamente las plan- (Meyer and Van Staden, 1991), 15 tas de los Municipios Guajira, Mara y (Liaoet al., 2004), 22 (Das et al., 2010) Colina por la cantidad de nuevos bro- until 28 new sprouts with different tes obtenidos en 8 meses. De las plan- BAP concentrations (Singet al., 2009). tas de los Mayales se obtuvieron 6.76, This suggests that sprouting depends 15.88, 16.5 y 14.52 brotes en el 1er, not only on the hormonal concentration 2do, 3er y 4to ciclo respectivamente, of the environment and their lo que supera a la cantidad de hijuelos components, but also on the intrinsic obtenidos del resto de las poblaciones. factors of the plant, for example, its El NB de las plantas de Tamare y genetic constitution. Cumarebo también son importantes This idea is supported by Sing et desde el punto de vista de propagación al. (2009), Hashemabadi and Kaviani de plantas. Los índices de TP y TVP (2008) and Jayakrishna et al. (2011). para las plantas cultivadas in vitro son These authors affirm that mayores que las plantas cultivadas in independently from the source of the vivo. explants, its size, age, culture El número promedio de brotes de composition and crop conditions, the A. vera en multiplicación convencio- genome of the plant intervenes on the nal sin reguladores de crecimientofue regeneration of new plants. This de 3,75 por explante (Albany et al., might explain the fact that populations 2006). Sin embargo, otras investiga- of Mayales, Cumarebo and Tamare ciones reportan mayor cantidad de have, in decreasing order, the highest 403
Cuadro 2. Tasa de Propagación y Tasa de Velocidad de Propagación de plantas de Aloe vera de diferentes poblaciones del occidente de Venezuela obtenidas in vitro. Table 2. Propagation rate and velocity propagation rate of Aloe vera plants from different populations in the Occident of Venezuela obtained in vitro. Ciclo 1 Ciclo 2 Ciclo 3 Ciclo 4 Población TP TVP TP TVP TP TVP TP TVP Pr.TP Pr.TVP C 4,1 2,05 6 3 5,86 2,93 4,33 2,16 5,07d 2,54cd A 3,35 1,67 8,4 4,2 9,71 4,85 7,06 3,53 7,13bc 3,56c 404 CA 2,93 1,46 6,81 3,41 5,63 2,81 6,91 3,45 5,57d 2,78cd CU 3,38 1,91 11,15 5,57 12,6 6,3 11,43 5,72 9,76b 4,88b T 4,7 3,85 9,27 4,63 9,94 4,97 10,12 5,31 9,38b 4,69b PA 2,2 1,10 6,61 3,3 7,12 3,56 2,39 1,64 4,81d 2,39d M 6,76 3,38 15,88 7,9 16,5 8,2 14,52 7,26 13,40ª 6,70ª Molero-Paredes y Bermúdez-Fung S 5,86 2,93 6,46 3,23 7,99 3,99 5,51 2,75 6,46cd 3,11cd TP: Tasa de Propagación; TVP: Tasa de Velocidad de Propagación: Pr.: Promedio Tasa de Propagación; Pr.: Promedio Tasa Velocidad de Propagación; C: Caramón; A: Adaure; CA: Carazao; CU: Cumarebo; T: Tamare; PA: Puertos de Altagracia; M: Mayales; S: Siquisique
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 392-409 vitroplantas, manejando valores de 9 quantity of sprouts, because the grow (Meyer y Van Staden, 1991), 15 (Liao conditions in both environments, in et al., 2004), 22 (Das et al., 2010) y vivo and in vitro, were the same for hasta 28 nuevos brotes con diferentes all the plants studied. concentraciones de BAP (Sing et al., Opposite to what happened in the 2009). Esto sugiere que el threshold, where was observed that at aparecimiento de nuevos brotes depen- the time the plant got older, its de no sólo de la concentración hormo- multiplication capacity increased, in nal del medio y de sus componentes, plants cropped in vitro, was seen that sino de otros factores intrínsecos de the quantity of new vitroplants reduced la planta, como por ejemplo su cons- after the four month of the crop’s cycle titución genética. Esta idea es apoya- in all the populations. In this matter, da por Sing et al . (2009), Kadlecek et al. (2001) indicate that the Hashemabadi y Kaviani (2008) y relative high humidity, the low or none Jayakrishna et al. (2011). Estos au- gas interchange, the scarcity of CO2 , tores afirman que independientemente the production of ethylene and the low de la fuente del explante, su tamaño, photosynthetic density in the plants edad, composición del medio y condi- cropped in in vitro conditions disrupt ciones de cultivo, el genoma de la plan- the development of these plants, ta interviene en gran medida la rege- reasons that might explain the neración de nuevas plantas. Esto po- phenomena observed in this research. dría explicar el hecho de que las po- In figure 1 is compared blaciones de los Mayales, Cumarebo graphically the TP of A. vera plants y Tamare posean, en orden decrecien- propagated in in vitro and in vivo, te, la mayor cantidad de brotes pues- where is observed that the values are to que las condiciones de crecimiento higher for plants obtained in vitro. en los dos ambientes, in vivo como in Likewise, the plants of Mayales, vitro, fueron iguales para todas las Cumarebo and Tamares were the ones plantas estudiadas. with higher TP in all the locations Contrariamente a lo ocurrido en studied. vivero en la cual se observó que a me- In figure 2 is compared the TVP dida que la planta era de mayor edad, of A. vera plants of the different su capacidad de multiplicación aumen- populations studied in in vitro and in taba, en las plantas cultivadas in vitro vivo conditions. It can be seen that in se notó que la cantidad de nuevas vitro culture is a biotechnological tool vitroplantas disminuyó a partir del that allows, in less time, to produce cuarto ciclo de cultivo en todas las po- higher quantity of plants, surpassing blaciones. En este sentido, Kadlecek et the number of sprouts that are obtained al. (2001) indican que la alta hume- naturally in the field. The dad relativa, el bajo o nulo intercam- multiplication of the plants of Mayales, bio gaseoso, la escasez de CO2, la pro- Cumarebo and Tamare during the ducción de etileno y la baja densidad research was faster than in the rest of fotosintética en las plantas cultivadas the populations studied in in vitro and en condiciones in vitro producen per- in vivo conditions. 405
Molero-Paredes y Bermúdez-Fung turbaciones en el desarrollo de estas Conclusions plantas, razones éstas que podría ex- plicar el fenómeno observado en este The results of this research trabajo de investigación. showed that A. vera plants coming En la figura 1 se compara gráfi- from los Mayales town, Guajira camente la TP de las plantas de A.vera county, Zulia state, are the ones with propagadas in vitro e in vivo, donde se higher propagation rate (TP) and observa que los valores son mayores propagation velocity rate (TVP) para las plantas obtenidasin vitro. De multiplied in natural threshold igual manera, se destacan las plantas conditions in vitro, secondly followed de las poblaciones de los Mayales, by the plants coming from Tamare, Cumarebo y Tamare como las que Mara county, Zulia state, and in third manifestaron mayor TP entre todas las position aloe vera plants from the localidades estudiadas. Cumarebo town, Colina county, Fal- En la figura 2 se compara la TVP cón state. The values of TP and TVP de las plantas de A. vera de las diferen- were higher for plants multiplied in tes poblaciones estudiadas tanto en con- vitro and in vivo for all the studied C: Caramón; A: Adaure; CA: Carazao; CU: Cumarebo; T: Tamare; PA: Puertos de Altagracia; M: Mayales; S: Siquisique Figura 1. Tasa de propagación de plantas de Aloe vera del occidente de Venezuela obtenidas in vivo e in vitro. Figure 1. Propagation rate of Aloe vera plants in the Occident of Venezuela obtained in vivo and in vitro. 406
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 392-409 C: Caramón; A: Adaure; CA: Carazao; CU: Cumarebo; T: Tamare; PA: Puertos de Altagracia; M: Mayales; S: Siquisique Figura 2. Tasa de velocidad de propagación de plantas de Aloe vera en el occidente de Venezuela obtenidas in vivo e in vitro. Figure 2. Velocity propagation rate of Aloe vera plants in the Occident of Venezuela obtained in vivo and in vitro. visualizarse que el cultivo in vitro es populations. This information is useful una herramienta biotecnológica que to achieve the massive propagation of permite en menor tiempo producir A. vera plants for the establishment mayor cantidad las plantas, superando of new plantations in the Occident of el número de brotes que naturalmente Venezuela. se obtienen en campo. La multiplica- ción de las plantas de los Mayales, Acknowledgments Cumarebo y Tamare durante el tiem- po de estudio, fue más rápida que el The authors thank the Scientific resto de las poblaciones estudiadas tanto and Humanistic Board of Universidad en condiciones in vitro como in vivo. del Zulia (CONDES-LUZ) by the financing given for carrying out this Conclusiones research through the project CC-0622- 10 and CC-0423-10 and the Biological Los resultados de esta investiga- Research Center of Universidad del ción demostraron que de las plantas Zulia. de A. vera provenientes de la población de los Mayales del Municipio Guajira End of english version del estado Zulia son las que poseen mayor Tasa de Propagación (TP) y 407
Molero-Paredes y Bermúdez-Fung Tasa de Velocidad de Propagación proliferation. The Icfai Journal of Biotechnology 1: 48-56. (TVP) multiplicadas en condiciones naturales de vivero e in vitro, seguido Contreras, S., J. 1990. El cultivo de la zábila en Venezuela. Aspectos en segundo lugar por las plantas pro- agroeconómicos-terapéuticos. venientes de la población de Tamare Acrive. Caracas, Venezuela. 45 p. del Municipio Mara del estado Zulia y Das, A., P. Mukherjee y T. Baran Jha. 2010. en tercer lugar por las plantas de zábila High frequency micropropagation of de la población de Cumarebo del mu- Aloe vera L. Burm. f. as a low cost Option towards commercialization. nicipio Colina del estado Falcón. Los Plant Tissue Culture y Biotechnology valores de TP y TVP fueron mayores 20: 29-35. para las plantas multiplicadas in vitro Guillot, D., E. Laguna y J. Rosselló. 2009. La que in vivo para todas las poblaciones familia Aloaceae en la flora alóctona estudiadas. Esta información es útil valenciana. Monografías de la Revista Bouteloua 6. 58 pp. Disponible para lograr la propagación masiva de en: www.floramontiberica.org. plantas de A. vera para el estableci- Fecha de consulta 11/03/2012. miento de nuevas plantaciones en la Hashemabadi, D. y B. Kaviani. 2008. Rapid región occidental de Venezuela. micro-propagation of Aloe vera L. via shoot multiplication. African Journal of Biotechnology 7: 1899-1902. Agradecimientos Imery, J. 2007. Inestabilidad cariológica durante la formación de células Los autores deseamos expresar madres del polen en Aloe vera nuestro agradecimiento el Consejo de (Aloaceae). Revista de Biología Tropical. 55 (3-4): 805-813 Desarrollo Científico y Humanístico de la Universidad del Zulia (CONDES- Imery, J. y H. Cequea. 2002. Anormalidades LUZ) por el financiamiento de esta cromosómicas en la microsporogénesis de Aloe vera (L.) investigación a través del proyecto CC- Burm.f. (Aloaceae). Acta Botánica 0622-10 y CC-0423-10 y al Centro de Venezuelica. 25: 143-152. Investigaciones Biológicas de la Uni- Jayakrishna, C., C. Karthik, S. Barathi, D. versidad del Zulia. Kamalanathan y A. Indra. 2011. In vitro propagation of Aloe barbadensis Miller, a miracle herb. Research in Literatura citada Plant Biology 1: 22-26. Kadlecek, P., I. Ticha, D. Haisel, V. Capkova Abadi, D. y B. Kaviani. 2010. In vitro y C. Scafer. 2001. Importance of in proliferation of an important vitro pretreatment for ex vitro medicinal plant aloe- amethod for acclimatization and growth. Plant rapid production. Australian Journal Science 161: 695-701. of Crop Science 4: 216-222. Liao, Z., M. Chen, F. Tan, X. Sun y K. Tang. Albany, N., J. Vílchez, S. León de Sierralta, 2004. Micropropagation of M. Molina y P. Chacín. 2006. Una endangered chinesse aloe. Plant Cell metodología para la propagación in Tissue and Organ Culture 76:83-86. vitro de Aloe vera L. Revista Facultad Agronomía (LUZ) 23: 213-222. Meyer, H.J. and L. Van Staden. 1991. Rapid in vitro propagation of Aloe Chaplot, B., A. Dave y Y. Jasrai. 2007. In barbadensis Mill. Plant Cell Tissue vitro rapid propagation of Aloe Vera and Organ Culture 26:167-171. L., a high valued medicinal plant through rhizome and axillary bud 408
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2013, 30: 392-409 Murashige, T. y F. Skoog. 1962. A revised Schuler, I., S. Baquero, D. Gaona, E. Vega, medium for rapid growth and J. Rodríguez, C. Ramírez, V. Nieto y bioassays with tobacco tissue E. Hodson. 2005. Propagación in vitro cultures. Physiologia Plantarum. de material seleccionado de Tabebuia 15:473- 497. rosea (Bertol.) DC (Ocobo) y Cordia Alliodora (Ruiz & Pav.) Oken (Nogal Nayanakantha, N., M. Singh y A. Kumar. Cafetero). Revista Colombiana de 2010. Improved culture medium for Biotecnología VII (001): 39-50. micropropagation of Aloe vera L. Tropical Agricultural Research & Schweizer, M. 1994. Aloe vera la planta que Extension 13: 1022-1030. cura. APB Ediciones. Francia. 64 p. Oliveira, E. y O. Crocomo. 2009. Large-scale Sepúlveda-Jiménes, F., H. Porta-Ducoing y micropropagation of Aloe vera. M. Rocha-Sosa. 2003. La participación Hortscience 44:1675–1678. de los metabolitos secundarios en la defensa de las plantas. Revista Pérez, J., N. Albany, J. Vílchez, S. León de Mexicana de Fitopatología 21: 355- Sierralta y M. Molina. 2010. Efecto 363. del medio de cultivo en la multiplicación in vitro de Aloe Sing, M., M. Rathore, D. Panwar, J. Rathore, barbadensis Mill. Revista de la H. Dagla y N. Shekhawat. 2009. Facultad de Agronomía (LUZ) 27: Micropropagation of selected 447-459. genotype of Aloe vera L. An Ancient Plant for Modern Industry. Journal Pierce, B. 2009. Genética. Un Enfoque of Sustainable Forestry 28: 935-950. Conceptual. Editorial Médica Panamericana. España. p.255-258. Stevens, N. 2000. Aloe vera. Editorial Sirio. Cuarta Edición. 220p. Piña Zambrano, H. y Morales Espinoza, A. 2010. Aloe en Venezuela: de la cadena Torres, M., A. Rodríguez, A. Torres y O. de valor al distrito industrial Llorente. 2010.Propagación de ajo problemas del desarrollo. Revista (Allium sativum L.) a partir de Latinoamericana de Economía 41. microcrobulbillos conservados in Disponible en: ISSN 0301-7036. Fecha de consulta: Vega, A., N. Ampuero, L. Díaz y R. Lemus. 13 de febrero de 2012. 2005. El Aloe vera (Aloe barbadensis Miller) como componente de Piña, H. 2005. Perfil preliminar del mercado alimentos funcionales. Revista de la zábila en Falcón. Bioagro 17: Chilena de Nutrición 32: 208-214. 85-92. Vílchez, J., O. Ferrer, P. Chacín y N. Albany. Piña, H. y L. Chirino. 2008. Mercado de la 2007. Efecto del pulso liquido sobre zábila (Aloe vera L.) en el estado la multiplicación in vitro de zabila Falcón. Revista Facultad Agronomía (Aloe vera (L.) Burm. F.). Revista de (LUZ) 25: 364-392. la Facultad de Agronomía (LUZ) 24 Supl. 1: 110-113. Rathore, M., J. Chikara y N. Shekhawat. 2011. Plantlet regeneration from callus cultures of selected genotypes of Aloe vera L. An ancient plant for moderm herbal industries. Applied Biochemistry and Biotechnology 163: 860-868. 409
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