Actualización de las actividades del Laboratorio Europeo de Referencia de OGMs (EURL-GMFF) y de la Red Europea de Laboratorios de Análisis de ...

Actualización de las actividades del Laboratorio
Europeo de Referencia de OGMs (EURL-GMFF) y de la
Red Europea de Laboratorios de Análisis de Alérgenos
(ENFADL)
                 Servicio de Biotecnología
                          Silvia Gil

A. Actualización de las actividades de la Red Europea de Laboratorios de Análisis de
Alérgenos (ENFADL)
    ENFADL Worshop 2020

B. Actualización de las actividades del Laboratorio Europeo de Referencia de
OGMs (EURL-GMFF)

       Grupos de trabajo
       Ensayos de intercomparación
       Publicaciones
       Nuevas técnicas de edición génica

1. Actualización de las actividades de la Red Europea de Laboratorios de
Análisis de Alérgenos (ENFADL)

 Workshop virtual 18 y 19 de Noviembre de 2020

 Puntos más importantes:

    Actividad internacional en el campo de alérgenos
    Últimas publicaciones
    Tour de table de los participantes. Problemas más destacados por los laboratorios
    Actividades programadas para año 2021

Worshop ENFADL Noviembre 2020

 Actividad internacional campo de los alérgenos: CEN, AOAC, Comisión Europea

   CEN: CEN TC 275/WG 12. Nueva propuesta de proyecto relacionado con la definición de requisitos
   mínimos para la detección de alérgenos.
   CEN: Borrador de una nueva Norma CEN para detección de alérgenos por LC-MS

   AOAC: También proyecto de definición de requisitos mínimos para la detección de alérgenos pero
   centrado en algunos alérgenos no para alérgenos en general.

   Comisión Europea: Referencia a las alertas en los últimos 5 años por productos con alérgenos no
   declarados. Retos actuales:
   - Declaraciones PAL armonizadas
   - Establecimiento de dosis de referencia
   - PAL armonizado basado en la evaluación cuantitativa del riesgo utilizando dosis de referencia
     establecidas

Worshop ENFADL Noviembre 2020

 Últimas publicaciones relacionadas con detección de alérgenos en alimentos

 - A reference method for determining the total allergenic protein content in a processed food: the
   case of milk in cookies as proof of concept.(Martinez et al., 2020)

 - Comparative study of concatemer efficiency as an isotope-labelled internal standard for allergen
   quantification. (Gavage et al. 2020)

 - Selection of universal peptide biomarkers for the detection of the allergen hazelnut in food trough
   a comprehensive, high resolution mass spectrometric (HRMS) based approach. (Van
   Vlieerberghe, 2020)

Worshop ENFADL Noviembre 2020

 Problemas más importantes destacados por los laboratorios
- Los laboratorios utilizan principalmente ELISA y PCR como métodos de control oficial, los métodos
  LC-MS están siendo validados por pocos laboratorios.

- La mayoría expresa los problemas relacionados con la validación de métodos por la falta de
  materiales de referencia certificados desarrollados con este fin.

- Análisis de sulfitos: falsos positivos por detección sulfitos en mostaza
- Análisis de gluten
                                                              Foros de discusión
- Productos veganos

- Interpretación de resultados. Etiquetado precautorio

- Necesidades de formación

Worshop ENFADL Noviembre 2020

 Actividades programadas para el año 2021

 Ensayo de intercomparación PT 2021: 2 ingredientes alergénicos, leche y huevo en
  matriz galleta (cookie) . Previsto para verano de 2021.

       Retrasado : Fecha no prevista de momento

 Training: Pequeño seminario sobre Evaluación del riesgo cuantitativo

        Próximamente, fecha sin determinar

Actividades CNA 2021

- Estudio prospectivo: Incidencia del etiquetado precautorio de alérgenos
  (gluten y huevo) (EP 01 21 ALE)

- Estudio interno de diferentes kits de huevo

2. Actualización de las actividades del Laboratorio Europeo de
Referencia para OGMs (EURL-GMFF)

 Actualización de los grupos de trabajo (ENGL WG)

1. WG – MPR (Minimum Performance Requirements)

 - Actualización de la guía ya existente añadiendo 3 nuevas áreas:
    - dPCR
    - NGT
    - GM animals

  - Se publicará una primera versión en septiembre de 2021 aunque la actividad sobre NGT
  continuará en el mandato de este grupo posteriormente a esta publicación

  *la parte de GM animals incluirá NGS centrándose en técnicas de secuenciación (massive
  parallel PCR sequencing (ya tiene norma ISO)) y secuenciación de amplicones), ya que ambas
  técnicas tienen muchas ventajas para la identificación de especies

 Actualización de los grupos de trabajo (ENGL WG)

2.- AG SMV (Advisory Group on Selection of Methods for Validation)

 Se está empezando a realizar la validación de un método múltiplex y otro de gen de referencia
 endógeno para patata

 El método de dPCR propuesto anteriormente para validación se mantiene en espera hasta que el
 JRC complete sus ensayos y el documento de MPR sobre dPCR esté terminado.

 Se propone también el estudio de métodos para detección de microorganismos modificados
 genéticamente (GMM)

 Actualización de los grupos de trabajo (ENGL WG)

  3. WG-mpPCR (multiplex PCR methods)

Grandes progresos en este grupo

Se ha presentado el borrador y está circulando entre los miembros del SC para comentarios

Se cree que se tendrá el informe final en junio de 2021 para su presentación en la próxima reunión de
SC ENGL el 16 de junio

Guía muy completa sobre los métodos PCR multiplex :
       - validación y verificación de estos métodos,
       - uso y preparación de controles,
       - anexos: preparación de soluciones control, estimación LOD asym..

 Actualización de los grupos de trabajo (ENGL WG)

4. WG-seq (good practice/quality of DNA sequencing data)

 Mandato: Evaluar los parámetros mínimos de rendimiento (MPPs) y sus valores de aceptación
 asociados (AAVs) para el análisis basados en secuenciación y las guías del JRC.

 Se han examinado los aspectos de calidad de las técnicas Sanger y secuenciación masiva paralela en
 general y para los análisis de OMG.

 El borrador final se quiere presentar en la próxima reunión.

 Actualización de los grupos de trabajo (ENGL WG)

 5. WG-DNAex (DNA extraction)

 -   Grupo sigue muy activo
 -   Después del verano se establecerá un cronograma para la finalización del documento.
 -   Debido a la pandemia, se pospone el workshop sobre la extracción de DNA a la publicación del
     documento.

6. WG-GMM (Detection of genetically modified microorganism in food and feed)

     Este grupo tiene la tarea de abordar el desafío de la detección de los GMM:
     Screening, detección e identificación y las herramientas para la correcta implementación de la
     legislación de aditivos para piensos, como las enzimas.

Proficiency Test
  EURL-GMFF-PT-20/01   2 ítems: Pienso para pájaros (GA21, MON88017, T25)
                                Harina de maíz (GA21, MON88017, T25)

  EURL-GMFF-PT-21/01   2 ítems: Harina de colza (eventos colza MG)
                                Harina de semillas (MON87701)

  EURL-GMFF-PT-21/02   2 ítems: Vegetarian burguer dry mix (bioburguer)(eventos soja MG)
                                Harina de maíz (eventos de maíz MG)
         Agosto 2021

Guías /documentos / Estudios publicados
 Guidance document on Measurement Uncertainty for GMO Testing Laboratories –
  3rd edition

             Comunicación de laboratorio Nº 599

 Informe del Grupo Europeo de Ética sobre las Nuevas Técnicas de mejora
  genética
             Comunicación de laboratorio Nº 623

 Informe de la Comisión sobre las Nuevas Técnicas de Edición Génica

             Comunicación de laboratorio Nº 628

Muchas gracias por su atención
biotecnologia-cna@aesan.gob.es
sgil@aesan.gob.es                Servicio de Biotecnología CNA
                                 Mercedes Fernández de la Puebla
                                 Míriam Gómez
                                 Mª del Camino Martín-Forero
                                 Javier Morales
                                 Mª Isabel Rodriguez
                                 Mª Luisa Salvador
                                 Sonia Valero
                                 Silvia Gil