Efecto antiinflamatorio del Extracto Acuoso Liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. en ratas
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Acta Farm. Bonaerense 23 (4): 492-7 (2004) Trabajos originales Recibido el 7 de junio de 2004 Aceptado el 14 de agosto de 2004 Efecto antiinflamatorio del Extracto Acuoso Liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. en ratas Pedro Barzaga FERNÁNDEZ 1*, Yanier Núñez FIGUEREDO 1, Carmen Carrillo DOMÍNGUEZ 1; Ismael Chávez HERNÁNDEZ 2; María Lidia González SANABRIA 2; Rafael GONZÁLEZ 1 & Mayelín ECHEVARRÍA 1 1 Departamento de Control Biológico. Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos. Calle 17 No. 6208 e/ 62 y 64. Playa. Ciudad de La Habana, Cuba. 2 Departamento de Productos Naturales. Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos. Ave. 26 # 1605 e/ Boyeros y Puentes Grandes. CP. 10600. Ciudad de La Habana, Cuba. RESUMEN. Se estudió la actividad antiinflamatoria del extracto acuoso liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. producido por el CIDEM en animales de experimentación. En ratas se evaluó el efecto de las dosis 250, 500 y 1000 mg/kg sobre la inflamación aguda provocada por carragenina, dextrán, histamina y serotoni- na; así como de 50, 150 y 450 mg/kg en el modelo de granuloma inducido por pellets de algodón. El extrac- to acuoso liofilizado mostró efecto inhibitorio sobre los edemas, excepto sobre el inducido por la serotoni- na. Las dosis de 150 y 450 mg/kg disminuyeron significativamente el peso del granuloma con ausencia de efectos sobre el timo y las glándulas suprarrenales. Estos resultados muestran que el extracto posee pro- piedades anti-inflamatorias interesantes para futuros estudios. SUMMARY. “Anti-inflammatory Effect of Lyophilized Aqueous Extract of Ocinum tenuiflorum on Rats”. The anti-inflammatory activity of the lyophilized aqueous extract from Ocimum tenuiflorum L. produced by CIDEM was studied in experimental animals. The effect of 250, 500 and 1000 mg/kg was assesed in acute inflammation induced by carragenin, dextran, histamine and serotonine; as well as the effect of 50, 150 and 450 mg/kg in the granulome induced by cotton pellets. The lyophilized aqueous extract inhibited the increase of paw edema in- duced by carrageniin, dextran or histamine but it didn’t over serotonine induced edema. The extract’s doses 150 and 450 mg/kg diminished granulome’s weight without affecting tymus’s and adrenal’s weight. Present results make the aqueous lyophilized extract from Ocimum tenuiflorum L. worthy of further investigations. INTRODUCCIÓN noestimulante, inhibidor de prostaglandinas y El estudio de nuevos fármacos o principios antiinflamatoria 5. activos con propiedades terapéuticas obtenidos Gran variedad de compuestos biológicamen- a partir de fuentes naturales ha cobrado gran te activos han sido aislados de sus hojas, entre importancia en los últimos años. Incluso en paí- los que se incluyen el ácido ursólico, la apigeni- ses donde la biotecnología y la industria quími- na y la luteolina 6. El ácido ursólico es un po- co-farmacéutica han alcanzado un alto desarro- tente agente antiinflamatorio 7, que posee activi- llo, se destina gran cantidad de recursos a la in- dad antimicrobiana 8 además de que ha sido uti- vestigación de las bondades que nos ofrece la lizado en cosméticos con el objetivo de estimu- naturaleza con fines médico-terapéuticos. lar el crecimiento del cabello así como evitar la Ocimum tenuiflorum L., conocida como al- irritación del cuero cabelludo 9-10. bahaca morada, es utilizada por la población Teniendo en cuenta la composición fitoquí- cubana en forma de decocción para aliviar los mica de esta planta, el presente trabajo tuvo co- dolores de cabeza 1. Entre otras, se le atribuyen mo objetivo evaluar las propiedades antiinflama- propiedades como hipoglicemiante 2-4, hipoten- torias en modelos farmacológicos preclínicos de sora, anticonvulsivante, antiespasmódico, inmu- un extracto acuoso liofilizado de Ocimum tenui- PALABRAS CLAVE: Actividad antiinflamatoria, Albahaca morada, Extracto acuoso liofilizado, Lamiaceae, Ocimum tenuiflorum L. KEY WORDS: Anti-inflammatory activity, Lyophilized aqueous extract, Lamiaceae, Ocimum tenuiflorum L. * Autor a quien debe ser enviada la correspondencia. E-mail: cinfa@infomed.sld.cu, cidem@infomed.sld.cu. 492 ISSN 0326-2383
acta farmacéutica bonaerense - vol. 23 n° 4 - año 2004 florum L. producido en el Centro de Investiga- recibieron agua destilada. Una hora después el ción y Desarrollo de Medicamentos de Cuba edema fue inducido en la pata derecha trasera (CIDEM). del tren posterior por inyección de un volumen de 0,1 mL de soluciones de los diferentes agen- MATERIALES Y MÉTODOS tes flogísticos: carragenina 1%, dextrán 1%, his- Sustancia de ensayo tamina 1% y serotonina 0,01% en solución salina 11-12. La pata contralateral recibió igual volumen Extracto acuoso liofilizado de Ocimum te- nuiflorum L. obtenido a partir de la suspensión de salina. Los volúmenes de ambas patas fueron acuosa del follaje de la planta. El material vege- medidos con ayuda de un pletismómetro (UGO tal fue colectado en la Estación Experimental de Basile) 4 h después de inducido el edema por Plantas Medicinales “Juan Tomás Roig” del CI- carragenina y a la hora en el resto de los ede- DEM en primavera, con Nº de herbario 0019, lo- mas. El volumen del edema se determinó a par- te 16-17 y secado a 40 °C en estufa de recircula- tir de la diferencia entre los volúmenes de la pa- ción de aire. La suspensión acuosa fue prepara- ta derecha y la izquierda. La actividad antiinfla- da reflujando 100 g de material vegetal con 1 L matoria se expresó a través del porciento de in- de agua destilada durante 15 min y preservando hibición del edema con respecto al grupo con- con metilparabeno al 0,2% y propilparabeno al trol. 0,02%. El perfil cromatográfico de la suspensión fue caracterizado por cromatografía de capa del- Inflamación subcrónica gada. Posteriormente la suspensión acuosa fue Discos de algodón de 50 mg de peso fueron sometida a un proceso de liofilización emplean- implantados en número de cuatro bajo la región do para ello una liofilizadora Edward. escapular de cada animal. Los animales distri- buidos en cinco grupos de tratamiento recibie- Reactivos químicos ron durante siete días consecutivos agua, O. te- Fosfato ácido de histamina, pentobarbital só- nuiflorum L. en dosis de 50, 150 y 450 mg/kg y dico, sulfato de serotonina (BDH), dextrán 40, prednisolona 3 mg/kg. 24 h luego de la última carragenina (Sigma), difenhidramina, ciprohep- administración se sacrificaron todas las ratas y tadina, indometacina, penicilina procaínica, se extrajeron los granulomas, el timo y las glán- prednisolona (Medsol). dulas suprarrenales de cada animal para la de- terminación de sus pesos 13. Animales Ratas Wistar hembras procedentes de la co- Procesamiento estadístico lonia del Departamento Control Biológico del Se calculó la media ± desviación estándar de CIDEM, con una masa corporal comprendida los parámetros analizados en cada ensayo para entre 150 y 200 g. Fueron alojadas en sala con cada grupo. Los datos se procesaron mediante condiciones de: temperatura controlada de 22 ± un análisis de varianza de una vía (ANOVA) y 2 °C, cama con viruta con cambio cada 48 h y posteriormente se realizó un test de Duncan un ciclo de luz-oscuridad de 12/12 h. El pienso considerándose significativas diferencias de al peletizado CMO 1000, dieta proveniente del menos p
Fernández, P.B., Y.N. Figueredo, C.C. Domínguez; I.C. Hernández; M.L.G. Sanabria; R. González & M. Echevarría Figura 1. Efecto de diferentes dosis de extracto acuo- Figura 2. Efecto de diferentes dosis de extracto acuo- so liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. e indometa- so liofilizado de Ocimum tenuiflorum L., difenhidra- cina sobre el edema subplantar inducido por carrage- mina y ciproheptadina sobre el edema subplantar in- nina 1%. Las barras representan la media ± desviación ducido por dextrán 1%. Las barras representan la me- estándar (n =10). Grupos con al menos una letra en dia ± desviación estándar (n=10). Grupos con al me- común no son significativamente diferentes. (p
acta farmacéutica bonaerense - vol. 23 n° 4 - año 2004 Figura 5. Efecto de diferentes dosis de extracto acuo- Figura 4. Efecto de diferentes dosis de extracto acuo- so liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. y predniso- so liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. y ciprohep- lona sobre el peso del granuloma. Las barras repre- tadina sobre el edema subplantar provocado por se- sentan la media ± desviación estándar (n=10). Grupos rotonina 0.01%. Las barras representan la media ± con al menos una letra en común no son significati- desviación estándar (n=10). Grupos con al menos vamente diferentes. (p
Fernández, P.B., Y.N. Figueredo, C.C. Domínguez; I.C. Hernández; M.L.G. Sanabria; R. González & M. Echevarría Se ha reportado que la administración de ex- L. posee efecto inhibitorio sobre el metabolismo tractos de Ocimum tenuiflorum L. reducen el del ácido araquidónico por acción sobre la lipo- estrés, modulan funciones inmunológicas y re- oxigenasa o antagoniza los receptores de los tardan el desarrollo de úlceras inducidas por mediadores inflamatorios producidos en dicho histamina en animales de experimentación 20. proceso. La presencia de ácido ursólico podría En el presente estudio el extracto acuoso liofili- justificar esta respuesta, pues como ya se men- zado de O. tenuiflorum L. se comportó como cionó demostró ser un inhibidor de la actividad inhibidor de los diferentes edemas inducidos; de la 5-lipoxigenasa de macrófagos, plaquetas y sin embargo en las inflamaciones condicionadas células leucémicas HL60 19. La no afectación del por la presencia de histamina se observó mejor peso de las glándulas suprarrenales hallada en efecto con respecto al control positivo emplea- el presente estudio corrobora lo encontrado por do, no presentándose diferencias significativas Bhargava & Singh 20, quienes luego de la admi- entre el extracto acuoso liofilizado de O. tenui- nistración de un extracto de Ocimum tenuiflo- florum L. a la dosis de 1000 mg/kg y la difenhi- rum L. no hallaron afectaciones sobre el peso dramina a 60 mg/kg. Estos resultados nos con- de este órgano. ducen a pensar que pudiera existir una mayor Futuros trabajos que permitan esclarecer aún capacidad por parte del extracto acuoso liofili- más los mecanismos por los cuales ejerce pro- zado de O. tenuiflorum L. para antagonizar los piedades antiinflamatorias el extracto acuoso efectos de la histamina, no ocurriendo lo mismo liofilizado producido por el CIDEM son necesa- con el edema inducido por serotonina donde el rios, además de determinar la influencia de el mayor porcentaje de inhibición por parte de O. (los) componente(s) activo(s) en esta actividad, tenuiflorum L. fue sólo de 15,44 ± 7,23. La capa- mediante procedimientos de aislamiento de di- cidad de inhibir el edema inducido por histami- cho(s) compuesto(s) a partir del extracto. na podría estar justificado por la presencia de ácido ursólico en nuestro extracto, pues se co- CONCLUSIONES noce que éste es un compuesto muy activo en Los resultados obtenidos nos permiten arri- la inhibición de la degranulación de mastocitos bar a las siguientes conclusiones en relación al y liberación de histamina en presencia de aler- extracto acuoso liofilizado de Ocimum tenuiflo- genos 21. rum L.: La implantación subcutánea de pellets de al- 1. A las dosis ensayadas disminuyó significa- godón en ratas da lugar a la formación de un tivamente los edemas inducidos por carrageni- granuloma que consiste en una cápsula fibrosa na, dextrán e histamina, indicando así la posible vascularizada que contiene fibroblastos e infil- presencia en el mismo de componentes con ac- trado de células mononucleares. En la respuesta tividad antiinflamatoria. inflamatoria crónica que se origina en este pro- 2. Parece tener mayor afinidad para antago- ceso están involucrados de manera significativa nizar la acción de la histamina que la de la sero- los productos de la lipooxigenasa, por lo que tonina. los antiinflamatorios no esteroidales presentan 3. A dosis superiores a 150 mg/kg disminuye baja eficacia para revertir o impedir el daño pro- la formación de tejido granulomatoso en ratas. vocado 22; por todo esto podríamos pensar tam- 4. A las dosis ensayadas no altera el peso del bién que el extracto acuoso de O. tenuiflorum timo ni de las glándulas suprarrenales en ratas. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Roig, J.T. (1988) “Plantas medicinales, aromá- posio Nacional de Plantas Medicinales, La Ha- ticas o venenosas de Cuba” Tomo I, Ed. Cientí- bana. fico Técnica, La Habana, Segunda edición, Pri- 4. Crespo, S. (1986) “Efecto de un extracto acuo- mera reimpresión, pág. 134. so de Ocimum Sanctum L sobre la incorpora- 2. Luthy, N. & O. Martínez (1964) Ohio J. Sci. 64: ción de glucosa en adipocitos aislados”. Resú- 223-4. menes III Simposio Nacional de Plantas Medi- 3. Deas, M. (1986) “Estudio de mecanismos de cinales, La Habana. acción hipoglicemiante del Ocimum Sanctum 5. Gupta, M.P (1995) 270 Plantas Medicinales L. Efecto sobre la resistencia de la insulina pro- Iberoamericanas. CYTED-SECAB, Santa Fe de ducida por dexametasona” Resumenes III Sim- Bogotá, págs. 322-4. 496
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