Efecto de la fermentación maloláctica sobre el color de los vinos tintos
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1 Efecto de la fermentación maloláctica sobre el color de los vinos tintos Effects of malolactic fermentation on red color wines Paladino, Silvia C. (1)*; Galiotti, Hugo C.(2) y Juan Carlos Formento (2) Resumen El objetivo del trabajo fue determinar la magnitud y las causas de la modificación del color de los vinos tintos sometidos a fermentación maloláctica (FML). Se realizó un experimento con 2 tratamientos - testigo y FML - y 4 repeticiones. Se elaboraron vi- nos con la cultivar Malbec(Vitis vinifera, L.), con agregado de 2,5 g/HL de SO2 y 10 g/HL de levaduras secas activas. El tratamiento FML, una vez terminada la fermen- tación alcohólica, fue inoculado con Leuconostoc oenos. La FML se completó en 14 días a 24 ºC. En los vinos terminados se determinó: acidez total, acidez volátil, pH, polifenoles totales, antocianos totales, matiz e intensidad colorante. Los vinos fueron sometidos a evaluación sensorial por un panel de degustadores. La intensidad colo- rante de los vinos sometidos a FML disminuyó aproximadamente un 25% respecto del testigo sin FML. Simultáneamente aumentaron el matiz, el pH y la acidez volátil, mientras que disminuyó la acidez total. Las diferencias de color se debieron al efecto del pH sobre el estado de ionización de los antocianos. Las concentraciones de an- tocianos totales y de polifenoles totales no fueron afectadas por la FML. Las diferen- cias de color fueron percibidas por los degustadores. Los vinos con FML no aumen- taron su nivel de preferencia por parte de los degustadores, respecto del testigo sin FML. Summary Palabras clave: fermentación maloláctica – vino tinto – color – antocianos – acidez Key words: malolactic fermentation – red wine – color – anthocyanins - acidity Antecedentes La fermentación maloláctica (FML) del vino es un proceso microbiológico desarrolla- do por bacterias lácticas (Oenococcus (Leuconostoc), Pediococcus y Lactobacillus sp), las que mediante una vía catabólica efectuan la conversión del ácido L (-) máli- co, originando ácido L (+) láctico y CO2 , como productos principales. Para que la reacción ocurra, es necesaria la presencia de la enzima malato- carboxi- liasa (enzima maloláctica), Nicotin-amida-adenina dinucleótido (NAD+) y Mn+2 . La FML puede influenciar la calidad del vino, debido a que origina un descenso de la acidez total, una estabilización biológica ante nuevos ataques de bacterias lácticas, y un incremento en la complejidad del aroma y del sabor, causado por la desapari- ción de algunos componentes y la síntesis de nuevos productos debido a la activi- dad microbiana (2). * (1) Cátedra de Enología I (2) Cátedra de Enología II. Departamento de Tecnología Agroindustrial. Facultad de Ciencias Agrarias. Universidad Nacional de Cuyo. Almirante Brown 500 (5505). Chacras de Coria. Mendoza. Argentina. e-mail: spaladino @fca.uncu.edu.ar
2 Durante la FML, las bacterias lácticas llegan a una población de 107 – 108 células por mL. Las bacterias lácticas, además de producir ácido láctico, producen compuestos aromáticos, tales como acetaldehído, ácido acético, etanol, diacetilo, acetoína, y 2-3 butilene glicol, los que influyen en el perfil organoléptico del vino (3). La disminución de la acidez titulable producida durante FML oscila entre 1 y 3 g/L, mientras que el aumento de pH puede alcanzar de 0,15 a 0,30 unidades, depen- diendo de la concentración de ácido málico y del pH iniciales, y de la magnitud del desarrollo microbiano (2,4,7,10,14). Los vinos producidos en las regiones frías tienen un alto contenido ácido y pueden beneficiarse a causa de una desacidificación por la FML. Sin embargo, los vinos de las regiones más cálidas (California, Sudáfrica, Australia, Mendoza), de menos aci- dez, pueden desmejorar su calidad por acción de la FML. Una reducción de acidez, en estos casos, resulta en un vino chato, insípido, con tendencia al desarrollo de patógenos bacterianos, tales como Pediococcus sp y Lactobacillus sp. En los vinos de alto pH y baja acidez, las características organolépticas, en especial el color, pueden ser afectados negativamente por la FML(8,11). Como consecuencia de la FML, hay un descenso apreciable en la intensidad y de la calidad del color de los vinos tintos (14). Dependiendo del pH, el color del vino pue- de desarrollar tintes violetas o azules (6,14). Una reducción en la intensidad coloran- te del vino de hasta un 30% ha sido observada en vinos donde FML ha sido realiza- da por Leuconostoc sp (2, 4,5,11,12). Las causas de la pérdida de color de los vinos tintos que han realizado FML ha sido discutida por distintos autores. La explicación más simple menciona que una consi- derable pérdida de color procede del equilibrio desplazado en la configuración de los pigmentos antociánicos, resultante del incremento del pH (1,`2,4,5,12,13,14). El co- lor de los vinos tintos está determinado, principalmente, por la concentración de an- tocianos, y por el pH del medio. Los antocianos son compuestos anfóteros y a pH 3,5, el equilibrio químico está desplazado hacia el ión flavilium, de color rojo. A ma- yor pH, el equilibrio se desplaza hacia una forma quinónica de color azul-violeta (2,5). Otra posibilidad es la reducción de los antocianos a las leucoformas correspondien- tes, por catabolismo bacteriano del ácido cítrico que provee el NADH, necesario pa- ra la reacción (2, 4,12). También puede ocurrir una decoloración de los antocianos por acción del SO2 . El consumo, por parte de las bacterias lácticas, de los compuestos habitualmente combinados con dióxido de azufre (tales como α - cetoglutarato, piruvato y acetal- dehido), origina la liberación de SO2. El SO2 libre reacciona con los antocianos for- mando leucocompuestos, y en consecuencia disminuye la intensidad colorante del vino (4). Otros autores adoptan una postura diferente al sostener que los vinos que han reali- zado la FML aumentan su intensidad colorante. El patrón de comparación, en este caso, es el mismo vino pero desacidificado químicamente (9). En las bodegas de Mendoza, durante el proceso de vinificación, la FML ocurre fre- cuentemente de manera espontánea o provocada. Cuando se la provoca, el objetivo es obtener mayor complejidad gustativa, aunque se desconoce, en las condiciones locales, su implicancia sobre el color del vino. La intensidad colorante se considera un factor de calidad, siendo los vinos más coloreados los que obtienen mayores precios en el mercado.
3 El conociendo de los efectos de la FML sobre las características del vino permitiría, mediante el uso de medios tecnológicos que favorezcan o evitan su ocurrencia, ela- borar los tipos de vinos deseados. El objetivo del trabajo fue determinar, en las condiciones locales, la magnitud y las causas de la modificación del color de los vinos tintos sometidos a fermentación ma- loláctica (FML). Material y métodos Se realizó un experimento con dos tratamientos, FML y testigo (sin FML), con cuatro repeticiones cada tratamiento. Se vinificaron uvas de la cultivar Malbec (Vitis vinifera), cosechadas con 22,8% de sólidos solubles. La fermentación se realizó en recipientes de 80 litros de capacidad. En ambos tratamientos se produjo la fermentación alcohólica (FA) con el agregado de 2,5g/HL de SO2 (como metabisulfito de potasio) como antiséptico, con una poste- rior inoculación de 10 g/HL de levaduras secas activas Saccharomyces bayanus (Instituto Pasteur cepa 1969 “Champagne”). La FA se produjo a temperatura contro- lada de 26 a 27ºC. La maceración se realizó con sombrero flotante, con dos remon- tajes diarios, finalizando este proceso cuando los azúcares reductores llegaron a valores menores de 1,8 g/L (14). Luego de la FA, el testigo fue inmediatamente trasegado, se ajustó el contenido de SO2 libre a una concentración de 25 mg/L, y se trasladó a cámara fría a 6ºC para su conservación. El tratamiento FML no fue trasegado, fue inoculado con Oenococcus oeni, cultivo puro liofilizado (106 Unidades fundadoras de colonias por mL), permaneció a 24 ºC durante 14 días, hasta el fin de la FML. Este proceso fue controlado por medio de cromatografía de papel, y métodos cuantitativos enzimáticos (14). Luego el vino fue trasegado,ajustado su contenido de SO2 libre a 25 mg/L, y trasladado a cámara fría a 6ºC para su conservación. En los vinos terminados se realizaron los siguientes análisis: acidez total, acidez vo- látil, pH, índice de Folin Ciocalteu (IFC) para determinar polifenoles totales, antocia- nos totales, matiz e intensidad de color(DO 420 nm + DO 520 nm medida en celda de 1mm de paso óptico) (14). Los vinos fueron sometidos a una evaluación organoléptica por un panel de 26 de- gustadores entrenados. Resultados y discusión Existieron diferencias significativas (p>0,05) en la prueba t de Student, para mues- tras apareadas, entre los dos tratamientos en las variables de intensidad colorante, matiz, pH, acidez total y acidez volátil (Tabla 1). Considerando la media de cuatro repeticiones, la intensidad colorante resultó 1,026 en el testigo, mientras que en el vino con FML fue de 0,764, un 25 % menor (Gráfico 1). En cuanto a la acidez volátil, el vino con FML registró un aumento de 0,17 g/L respecto del testigo. La acidez total del vino con FML disminuyó aproximadamente 1g/L, mientras que su pH aumentó 0,2 unidades aproximadamente, respecto del testigo (Gráfico 2). No existieron diferencias entre los niveles de antocianos totales (Gráfico 3) y polife- noles totales en ambos tratamientos. El grado de maceración de las uvas, que fue el mismo en ambos tratamientos, determinó la concentración de antocianos y polifeno- les totales. La ocurrencia de FML no originó variaciones en estos componentes del vino. La intensidad con que los antocianos manifestaron su color rojo dependió del
4 pH, que define el grado de ionización de las moléculas. Por lo tanto, la intensidad del color rojo de los antocianos se asoció a la ocurrencia de la FML, debido a su efecto modificador del pH del vino. Tabla nº1: Valores analíticos de los vinos Testigo y con Fermentación maloláctica Prueba de t Variable Vino testigo Vino FML Diferencia Valor medio Desviación Valor medio Desviación significativa ( n=4) Típica ( n=4) típica (p>0,05) pH 3,82 0,036 4,01 0,051 Φ Acidez Volátil g/L 0,19 0,014 0,36 0,041 Φ Acidez Total g/L 5,01 0,188 3,9 0,086 Φ IFC 37,3 2,35 41 2,61 – Antocianos Tota- 673,6 23,7 657,8 28,83 – les mg/L Intensidad Colo- 1,026 0,044 0,764 0,054 Φ rante Matiz 0,549 0,009 0,671 0,011 Φ Φ Significativo – No significativo Gráfico 1 : Intensidad colorante del vino Gráfico 2 : pH del vino Malbec con y sin Malbec con y sin FML FML 1,2 4,1 1 4 DO420 + DO520 0,8 3,9 0,6 pH 3,8 0,4 0,2 3,7 0 3,6 FML Testigo FML Testigo
5 Gráfico 3 : Antocianos totales del vino Malbec con y sin FML 700 650 mg/L 600 550 500 FML Testigo En la evaluación sensorial, la mitad de los degustadores prefirió al testigo, y la otra mitad al vino que había realizado la fermentación maloláctica. La diferencia de color fue percibida por los degustadores. Respecto del perfil organoléptico, el vino con FML resultó más complejo, y con menos aristas que el testigo (Gráfico 4), aunque nuevas y distintas características no generaron una mayor preferencia por parte de los degustadores. Gráfico nº 4 : Perfil organoléptico del vino Malbec con y sin FML Color 4 Boca Amargo Nariz Frutado 3 2 Boca Herbáceo Nariz Especias 1 0 Boca Alcohólico Boca Acidez Boca Untuosidad Boca Astringencia Boca Frutado Testigo FML Conclusiones La fermentación maloláctica provoca una disminución apreciable de la intensidad colorante del vino tinto. Esta disminución se debe al efecto del aumento que ocurre en el pH durante esta fermentación: si bien la concentración de antocianos es la misma que en el vino sin FML, el estado de ionización es diferente. La intensidad colorante del vino tinto con FML es un 25% inferior, aproximadamente con respecto
6 al vino sin FML. Este descenso del color del vino, es acompañado por un aumento del matiz, del pH y de la acidez volátil, así como descenso de la acidez total. La disminución del color es percibida por los degustadores. Las modificaciones or- ganolépticas del vino con FML no aumentan el nivel de preferencia por parte de los degustadores. Bibliografía 1- Amati A .; Ferrarini, R.; Giulivo, C .; Castellari, M .;Galli, M . y G. Arfelli . 1998. “ Influenza della fermentazione malolattica sui composti fenolici e sul colore dei vini rossi della Valpolicella”. Rivista de Viticoltura e di enologia, Italie. Nº3 : 43 – 51. 2- Boulton, R.;Singleton, V.; Bisson,L. And R. Kunkee. 1995. “Principles and Practi- ces of Winemaking”. New York, USA. Ed. Chapman & Hall. 3- Circular Informativa – Unión Vitivinícola Argentina – 01/2001. 4- Davis, C.; Wibowo, D.; Eschenbruch, R.; Lee, T. And G. Fleet. 1985. “Practical implications of malolactic fermentation: a review”. American journal of Enology and Viticulture. Vol. 36.Nº4: 290 – 301. 5- Davis, C.; Wibowo, D.; Fleet, G. and T. Lee.1988. “Properties of wine lactic acid bacteria: their potential enological significance” American journal of Enology and Viticulture. Vol. 39. Nº2: 137 – 142. 6- Fugelsang, K. .1996. “Wine microbiology” New York, USA . Ed . Chapman & Hall 7- Nielsen, J.C.; Prahl, C.and A. Lonvaud Funel. 1996. “ Malolactic fermentation in wine by direct inoculation with freeze – dried Leuconostoc oenos cultures” Ameri- can journal of Enology and Viticulture. Vol. 47. Nº1: 42 – 48. 8- Rankine, B. C. 1972. “Influence of yeast strain and malolactic fermentation on composition and quality of table wines” American journal of Enology and Viticul- ture. Vol. 23. Nº4:152 – 158. 9- Rauhut, D.; Bauer, O.; Krieger, S.; and H. Dittrich. 1995. “Influence of malolactic fermentation on colour density and contents of free and condensed anthocya- nins” Mitteilungen, Klosterneuburg, Rebe und Wein, Obstbau und Früchteverwer- tung, Vol.45. Nº3: 82 – 89. 10- Sauvageot, F. and P. Vivier. 1997. “Effects of malolactic fermentation on sensory properties of four Burgundy wines” American Journal of Enology and Viticulture Vol.48 .Nº2: 187 – 192. 11- Van Vuuren, H.J.J. and L.M.T. Dicks. 1993. “Leuconostoc oenos : a review” Ame- rican Journal of Enology and Viticulture Vol.44. Nº1: 99 –112. 12- Vetsch, U. And H. Lüthi. 1964. “Decolorisation of red wines during biological descomposition of acids” Mitt. Geb. Lebensmittelunter. Hyg. Vol. 55 : 93 – 98. 13- Wibowo, D.; Eschenbruch, R.; Davis, C.; Fleet, G. and T. Lee. 1985. “Ocurrence and growth of lactic acid bacteria in wine: a review” American journal of Enology and Viticulture. Vol.36 Nº4: 302 – 313. 14- Zoecklein, B.; Fugelsang, K.; Gump, B. and F. Nury. 1994. “Wine analysis and production”. New York, USA. Ed. Chapman & Hall
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