Formadores de biofilme de Staphylococcus aureus: sua importância na mastite

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Formadores de biofilme de Staphylococcus aureus: sua importância na mastite
                                  ovina

    Staphylococcus aureus biofilm formators: its importance in ovine mastitis
DOI: 10.34188/bjaerv4n3-125

Recebimento dos originais: 04/03/2021
Aceitação para publicação: 30/06/2021

                                 Gerardo Mancera Cuadros
  Doctorado en Ciencias Agropecuarias y Recursos Naturales por la Universidad Autónoma del
 Estado de México. Centro de Investigación y Estudios Avanzados en Salud Animal. Facultad de
    Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Autónoma del Estado de México. México.
     Campus UAEM “El Rosedal”. San Cayetano de Morelos, Municipio de Toluca, México.
                             E-mail: germancu_09@hotmail.com

                                Jorge Pablo Acosta Dibarrat
Doctorado en Ciencias: Área Bacteriología y Patología por la Universidad Nacional Autónoma de
 México. Centro de Investigación y Estudios Avanzados en Salud Animal. Facultad de Medicina
Veterinaria y Zootecnia. Universidad Autónoma del Estado de México. México. Campus UAEM
             “El Rosedal”. San Cayetano de Morelos, Municipio de Toluca, México.
                                E-mail: jpacostad@uaemex.mx

                               Benjamín Valladares Carranza
  Doctorado en Ciencias Agropecuarias y Recursos Naturales por la Universidad Autónoma del
 Estado de México. Centro de Investigación y Estudios Avanzados en Salud Animal. Facultad de
    Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Autónoma del Estado de México. México.
     Campus UAEM “El Rosedal”. San Cayetano de Morelos, Municipio de Toluca, México.
                             E-mail: benvac2004@yahoo.com.mx

                                    Carlos Bedolla Cedeño
   Maestría en Educación en Ciencias Naturales por el Instituto Michoacano de Ciencias de la
 Educación. Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Calle Santiago Tapia No. 403.
Col. Centro. Morelia. Michoacán. México. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Km 9.5
    Carretera Morelia-Zinapecuaro. La Palma. Municipio de Tarímbaro, Michoacán. México.
                      E-mail de correspondencia: bedollajl@yahoo.com.mx

                                 Valente Velázquez Ordoñez
Doctorado en Ciencias Veterinarias por la Universidad Nacional Autónoma de México. Centro de
   Investigación y Estudios Avanzados en Salud Animal. Facultad de Medicina Veterinaria y
Zootecnia. Universidad Autónoma del Estado de México. México. Campus UAEM “El Rosedal”.
                   San Cayetano de Morelos, Municipio de Toluca, México.
                                   E-mail: vvo@uaemex.mx

RESUMO
A mastite é a principal doença que afeta as ovelhas produtoras de leite, embora também seja uma
doença recorrente em rebanhos produtores de crias para abastecimento de carne em todo o mundo.
Embora existam diferentes patógenos que causam infecção e inflamação da glândula mamária; O
Staphylococcus aureus é reconhecido como o principal agente causador da mastite clínica em

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rebanhos leiteiros, porém também atua concomitantemente com as diferentes espécies de
estafilococos coagulase negativos na apresentação da mastite subclínica em ovelhas produtoras de
carne. O Staphylococcus aureus contém em sua estrutura genética vários fatores de virulência que
desempenham um papel muito importante na patogênese da mastite; um deles é a formação de
biofilme que contribui para sua sobrevivência e aderência nas células epiteliais e é de grande
importância na disseminação da bactéria no interior de uma glândula mamária afetada. No presente
trabalho, uma revisão das infecções causadas por Staphylococcus aureus em ovinos, estafilococos
causadores de mastite, fatores de virulência de Staphylococcus aureus, formação de biofilme em
cepas de Staphylococcus aureus, sua importância na mastite subclínica e clínica em ovinos e
importância na produção de leite de ovelha e resistência a antibióticos devido ao Staphylococcus
aureus formador de biofilme.

Palavras-chave: Staphylococcus aureus, biofilme, importância, mastite, ovelha

ABSTRACT
Mastitis is the main disease that affects milk producing ewes, although it is also a recurrent disease
in herds producing young for meat supply worldwide. Although there are different pathogens that
cause infection and inflammation of the mammary gland; Staphylococcus aureus is recognized as
the main causative agent of clinical mastitis in dairy herds, however, it also acts concomitantly with
the different species of coagulase negative staphylococci in the presentation of subclinical mastitis
in meat producing ewes. Staphylococcus aureus contains within its genetic structure various
virulence factors that play a very important role in the pathogenesis of mastitis; one of them is the
formation of biofilm which contributes to its survival and adherence in epithelial cells and is of great
importance in the spread of the bacteria within an affected mammary gland. In the present work, a
review of the infections caused by Staphylococcus aureus in sheep, staphylococci causing mastitis,
virulence factors of Staphylococcus aureus, biofilm formation in Staphylococcus aureus strains, its
importance in subclinical and clinical mastitis in the sheep and importance in sheep's milk
production and antibiotic resistance due to biofilm-forming Staphylococcus aureus.

Keywords: Staphylococcus aureus, biofilm, importance, mastitis, sheep

1 INTRODUCCIÓN
       La mastitis es considerada el problema de salud más importante y común en los rebaños
ovinos productores de leche y de crías para engorda; en las ovejas, al igual que en otras especies
esta enfermedad es multifactorial, sin embargo, la mastitis bacteriana es la más común
convirtiéndose en un problema económicamente significativo, especialmente en los sistemas de
producción de tipo lechero (Gelasakis et al., 2015). Así mismo es considerada una causa
predominante de disminución del bienestar animal en las granjas de ovejas, repercutiendo en la
disminución de la producción de leche; Otras pérdidas adicionales asociadas con la mastitis son los
costos del tratamiento y el sacrificio de las ovejas debido al daño permanente de la ubre que en casos
muy graves las ovejas pueden llegar a desarrollar gangrena en la glándula mamaria (GM) y la oveja
puede morir (Vasileiou et al., 2018a). Para el control de la mastitis, hay una gran variedad de
enfoques incluyendo el manejo correcto en la sala de ordeño durante y después de la ordeña o la

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administración de antibióticos al final de un período de lactancia puede ser aplicado; También se
puede implementar la vacunación (Petridis y Fthenakis, 2014). Por tanto, la mastitis tiene un
impacto importante tanto en la economía como en el bienestar animal en la producción ovina, en
consecuencia, el control de las infecciones intramamarias (IMI) es uno de los retos más importantes
para los productores de leche de ovejas (Mork et al., 2007).
       Aunque se ha reportado que una amplia gama de microorganismos que pueden causar
mastitis en las ovejas, los brotes de mastitis infecciosa en los pequeños rumiantes generalmente son
causados por bacterias Gram-positivas, siendo los estafilococos coagulasa negativos (SCN),
Staphylococcus aureus (S. aureus) y Streptococcus sp. los de mayor importancia; aunque la mayoría
de los casos reportados son atribuidos                      S. aureus, varios informes indican que los SNC son
la causa más común de mastitis subclínica en ovejas lecheras, mientras que a S. aureus se le asocia
frecuentemente con los ovinos productores de carne (Hariharan et al., 2004). Con respecto a los
microorganismos asociados con la mastitis clínica, se ha encontrado que S. aureus es el patógeno
más comúnmente aislado de las infecciones tanto en ovejas productoras de carne, como en ovejas
lecheras. Sin embargo, también existen otros géneros bacterianos responsables de infecciones de la
GM estos son Mannheimia haemolytica, Escherichia coli y Streptococcus sp. los cuales se han
reportado como causantes de mastitis en menor medida. Por lo que el S. aureus es considerado el
género bacteriano que con mayor frecuencia se aísla y al cual se asocian la mayoría de brotes de la
enfermedad, atribuyéndosele los casos de mastitis clínica y subclínica (Marogna et al., 2010;
Gelasakis et al., 2015).
       Múltiples factores de virulencia han sido atribuidos a S. aureus mismos que juegan un papel
muy importante en la patogenia de la mastitis. La formación de biopelículas por                                    S. aureus
contribuye a su supervivencia ante los mecanismos de defensa del hospedero, también contribuye a
la adhesión a las células epiteliales de la GM y a la diseminación en la ubre y en el rebaño durante
el ordeño (Vasileiou et al., 2019).
       El objetivo de la presente revisión es dar a conocer la importancia que la producción de
biofilm por S. aureus tiene en la mastitis de ovejas, su repercusión en la salud de la glándula mamaria
y producción de leche en ovejas lecheras.

2 INFECCIONES CAUSADAS POR STAPHYLOCOCCUS AUREUS OVEJAS
       El S. aureus es un microorganismo que se encuentra ampliamente distribuido en el cuerpo
de las ovejas sanas, aunque también han sido implicados en diferentes trastornos cuya importancia
puede variar debido a su gravedad; entre los más reconocidos y de mayor frecuencia son el impétigo
o la formación de abscesos, algunos de presentación esporádica como las infecciones vaginales y

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abortos, mientras que algunos autores han reportado la presentación de infecciones más severas
como son la osteomielitis y rinosinusitis pero de manera experimental, sin embargo la principal
fuente de aislamiento de este agente patógeno ha sido la ubre de las ovejas con IMI o mastitis. En
general, la aparición y el resultado de las infecciones por S. aureus dependen de la combinación de
los factores de virulencia de la bacteria invasora y de la capacidad del sistema inmune del hospedero
para defenderse ante la infección (Murray et al., 2008). También se ha reportado que la protección
del hospedero contra la infección por las diferentes subespecies de estafilococos depende en gran
medida de la integridad de la piel y las membranas mucosas, que forman una barrera importante
contra la entrada de estos microorganismos al organismo de la oveja, así mismo se ha reportado que
el éxito del sistema inmune al defender al organismos depende del número y la funcionalidad de los
leucocitos, ya que estas células de defensa son importantes para fagocitar y destruir las bacterias
invasoras. Además, algunos trabajos recientes también han reportado el papel que juegan los
anticuerpos contra Staphylococcus sp., que parecen eliminar a diferentes cepas de esta bacteria de
manera más efectiva (Vasileiou et al., 2019).

3 STAPHYLOCOCCUS CAUSANTES DE MASTITIS
       La glándula mamaria está expuesta a diferentes factores que pueden producir inflamación
en el tejido glandular durante el periodo de lactancia o aun en el periodo seco; estos factores pueden
ser: factores químicos, físicos y microbiológicos; siendo estos últimos los más importantes y que
con mayor frecuencia afectan a la GM. Los microrganismos que comúnmente son aislados de la
GM de las ovejas con mastitis son bacterias Gram-positivas entre las que se destacan los SCN
(principalmente Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus chromogenes, Staphylococcus
simulans y Staphylococcus xylosus), sin embargo, el S. aureus es considerado el de mayor
importancia y al cual se le atribuye el mayor impacto en la producción de leche de ovejas (Mørk et
al., 2007). Los casos de mastitis causados por S. aureus suelen ser graves, con signos clínicos
sistémicos, presencia de inflamación severa y dolor agudo de la urbe. Las glándulas mamarias
afectadas sufren con frecuencia daño parcial o completo y no reanudan su función normal,
convirtiéndose en un factor crítico para la ovinocultura por la disminución del crecimiento de los
corderos y la baja producción de leche (Moroni et al., 2007). En los rebaños de ovejas lecheras, las
infecciones mamarias por S. aureus tienen un evidente significado económico, debido a la reducción
de la producción de leche, la disminución de la calidad de la leche y el rechazo de la leche como
consecuencia de la administración de antibióticos. Las infecciones mamarias también son
importantes en los rebaños de producción de carne, ya que se ha demostrado que la reducción de la
producción de leche de las ovejas conduce a un inadecuado crecimiento de sus corderos. Otros

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costos asociados con la enfermedad incluyen el mantenimiento de los animales de reemplazo y los
gastos correspondientes por la asistencia veterinaria. Así mismo la mastitis también es de gran
preocupación para el bienestar de los rebaños (Selvaggi et al., 2017)

4 FACTORES DE VIRULENCIA DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS
       El Staphylococcus aureus presenta una amplia gama de factores de virulencia, que influyen
en la presentación y severidad de la IIM que se desarrolla en las especies lecheras al facilitar la
colonización y evadir la respuesta inmune de los animales (Camussone y Calvinho, 2013). La
patogenicidad de las infecciones por S. aureus se fundamenta en los factores de virulencia de la
bacteria que le permiten sobrevivir, desarrollar la enfermedad en el hospedador y causar daños
importantes a su organismo. Los S. aureus portan dentro de su cromosoma una gran variedad de
factores de virulencia que potencializan los efectos de la bacteria en el organismo hospedero, siendo
capaces de adherirse al tejido blanco, evitar, vencer e invadir el sistema inmunológico y liberar
toxinas o enzimas dañinas para el hospedero. Los factores de virulencia de S. aureus, participan en
la colonización de la GM, mediante la adhesión a los tejidos, actividad metabólica durante la
replicación del microrganismo, evasión de la respuesta inmune del hospedero; con base a estas
características, los factores virulencia se han clasificado en tres grupos: Grupo I) los involucrados
en la adherencia a la célula hospedera o matriz extracelular, como las proteínas de unión a
fibrinógeno, fibronectina, colágeno y coagulasa (Lacey et al., 2017; Madani et al 2017). Grupo II)
aquellos que están involucrados en la evasión de los mecanismos de defensas del hospedero, como
las enterotoxinas estafilocócicas; la TSST-1, la leucocidina de Panton-Valentine (PVL), proteína A,
lipasas, polisacáridos capsulares y la formación de biofilm (Ko et al., 2011; Tel et al., 2012;
Kobayashi and De Leo 2013; Kiedrowski et al., 2014; Eisenbeis et al., 2017). Grupo III) los
involucrados en la invasión de la célula hospedera y penetración de los tejidos, como la toxina α,
hemolisinas β, γ y δ (Kiedrowski et al., 2014; Spaan et al., 2017).
       En la adherencia del S. aureus a los tejidos actúan varias proteínas principalmente durante
la fase inicial de la infección, cuya función es facilitar la unión de este agente a la superficie de la
célula huésped, simultáneamente se realiza la evasión de la respuesta inmune de hospedero. Por
ejemplo, los polisacáridos capsulares, localizados en la pared celular bacteriana, inhiben la
fagocitosis por los neutrófilos, mientras que algunas sustancias como los ácidos teicoicos le ayudan
a la bacteria a adherirse a la superficie de la mucosa. Entre estos componentes de la superficie
bacteriana que reconocen las moléculas de la matriz adhesiva se incluyen; al fibrinógeno,
fibronectina y colágenos. También se ha reportado que la proteína A del S. aureus (SpA), se une a
la fibronectina, mientras la proteína B se une a la fibronectina (FnbpA y FnbpB), así mismo la

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proteína que se une al colágeno y las proteínas del factor de aglutinación A y B desempeñan un
papel crucial en la virulencia de estos microorganismos (Palmqvist et al., 2002; Heying et al., 2007).
       La producción de Slime por las cepas S. aureus contribuye a la formación de biofilm por
esta bacteria y juega un papel muy importante en la patogénesis de la infección especialmente en la
mastitis especialmente en la etapa inicial de la infección cuando la bacteria se adhiere a las células
epiteliales de la GM, además se ha reportado que la proteína clumping factor A, tiene un rol crucial
en la invasión inicial y en la evasión de la respuesta inmune del hospedero (Schönborn et al., 2017;
Stutz et al., 2011)
       Los factores de virulencia secretados durante la fase tardía de la infección y por lo general
tienen un papel distinto en la patogenicidad, Según su actividad principal, se clasifican en cuatro
categorías: 1.- superantígenos, 2.- toxinas citolíticas, 3.- exoenzimas, 4.- diferentes proteínas. Por
ejemplo, los superantígenos; toxina-1 del síndrome de shock toxico (TSST-1) y las enterotoxinas
son las más abundantes y por lo general causan condiciones clínicas de mayor gravedad. Mientras
que las toxinas citolíticas (α-hemolisina, β-hemolisina, γ-hemolisina y las toxinas de la familia de
las leucocidinas), formar poros en la pared de la célula hospedera, provocando la pérdida osmótica
del contenido celular, provocando la lisis de la célula; su acción proporciona los nutrientes
necesarios para un mayor crecimiento de las bacterias. Las enzimas extracelulares son producidas
por la mayoría de los aislados de estafilococos y tienen como objetivo inactivar los mecanismos
antimicrobianos del hospedero, lo que permite la diseminación bacteriana. Estas exoenzimas
incluyen varias lipasas, nucleasas y proteasas (hialuronidasa, serina, cisteína, estafiloquinasa).
Finalmente, se ha reportado que (Otto, 2013).
       La síntesis de los factores de virulencia se produce durante las dos fases de crecimiento de
la bacteria. En la fase inicial, los factores asociados a la pared celular facilitan la unión tisular y la
evasión del sistema de defensa, permitiendo que la bacteria se acumulen y posiblemente, se dé la
formación de biofilm, pero en la fase tardía, la bacteria secreta un gran número de exoproteínas
como; las proteinasas, hemolisinas y superantígenos, al mismo tiempo, los factores asociados a la
pared celular se regulan el crecimiento, lo que conduce a la formación de biofilm y a la diseminación
bacteriana dentro de la GM (Novick, 2003). La producción de los diversos factores de virulencia de
las bacterias está controlada por diversos mecanismos, siguiendo la estrategia general de adhesión,
invasión y proliferación microbiana. La función de los sistemas de regulación es en respuesta a la
densidad de células (replicación bacteriana) y factores ambientales como: la disponibilidad de
nutrientes, pH, temperatura, tensión de oxígeno (Wang and Muir, 2016).
       Durante la infección las bacterias producen ciertos determinantes genéticos en una secuencia
estrechamente coordinada por los sistemas reguladores globales. Actualmente se conocen dos

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grandes familias de genes reguladores globales en                             S. aureus: los sistemas reguladores de
dos componentes (TCRS), de los cuales el más conocido es el sistema de genes reguladores
accesorios (agr), y la familia de proteínas homólogas Staphylococcal accessory regulatory tipo A
(SarA). Los SarA promueve la síntesis de las proteínas de unión a fibrinógeno y fibronectina, α, β
y δ-toxinas y cápsula, mientras que reprime la de las proteínas de unión a colágeno, proteína A y
proteasas uniéndose directamente a los promotores de los genes diana, o indirectamente, por su
efecto sobre otros reguladores. La expresión tanto de factores de virulencia como de mecanismos
reguladores está controlada por genes de virulencia específicos (Novick, 2003; Cheung et al., 2004).

5 FORMACIÓN DE BIOFILM EN CEPAS DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS
       La patogenicidad de S. aureus es un proceso complejo. que involucra una variedad diversa
de componentes extracelulares y celulares que se expresan coordinadamente durante las etapas de
la infección. La expresión en cascada de diversos factores de virulencia se da en respuesta a señales
ambientales durante las infecciones, es decir, la expresión de adhesinas de manera temprana durante
la colonización y producción de toxinas al final de la infección para facilitar el tejido propagación
a otros tejidos, insinúa la existencia de reguladores genéticos en los que un solo regulador realiza la
expresión de varios genes de forma controlada (Chueng et al., 2004). Durante el desarrollo de IMI,
por S. aureus la adhesión al epitelio de la GM juega un papel muy importante, el cual involucra una
gran cantidad de proteínas de superficie llamadas “Componentes Microbianos de Superficie que
Reconocen Moléculas de Matriz Adhesiva” (MSCRAMM), mismas que el microorganismo utiliza
para interactuar con moléculas del hospedero como el colágeno, la fibronectina y el fibrinógeno.
       La capacidad del S. aureus colonizar e infectar diferentes partes del organismo de los
animales está relacionada presencia de una gran variedad de factores de virulencia, entre estos
factores se atribuye una responsabilidad muy importante a las proteínas de adhesión y a la formación
de biofilm en superficies naturales o inertes (Tam y Torres, 2019; Achek et al., 2020), existen
reportes que informan que el S. aureus por puede producir una biofilm lo que le facilita la adhesión
inicial al epitelio del organismo y al de la GM (Otto, 2008), También contribuye con la disminución
de la concentración de antibióticos dentro de la colonia, promueve la multiplicación de la bacteria
y mejora su supervivencia durante su invasión al tejido blanco.
       Hoy en día se sabe que el componente principal de la matriz del biofilm producido por S.
aureus es el polisacárido de superficie denominado poli-N-acetil β -1,6 glucosamina (PNAG),
sintetizado por proteínas codificadas por el operón de adhesión intercelular ica; entre estos los genes
ica A e ica D tienen un papel importante en la producción de biopelículas. La producción de slime
por S. aureus es la parte inicial que contribuye a la formación de biofilm por esta bacteria y juega

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un papel importante en la patogenia de las infecciones y particularmente en la etapa temprana de la
infección en la GM o mastitis, principalmente cuando las bacterias se adhieren a las células
epiteliales mamarias (Schönborn et al., 2017).
       Los genes icaA, icaB, icaC, icaD son responsables de la producción de los polisacáridos de
adhesión intercelular codificados por icaADBC y de diversos tipos de slime químicamente
independiente de ica (Azara et al., 2017). En reportes más específicos sobre estos genes se ha
determinado que el producto génico icaA es una proteína de transmembrana que requiere la
presencia del producto génico icaD para una llevar a cabo su acción óptima. Mientras que el gen
icaC codifica un producto que contribuye a la formulación de la cadena del polisacárido poli-N-
acetil β -1,6 glucosamina producidos por la combinación de los genes icaC e icaAD; también se
considera que este producto está implicado en la translocación del polisacárido en la superficie
celular. La proteína codificada por icaB es considerada la responsable del proceso de evasión del
sistema inmunológico de la bacteria durante el proceso de fagocitosis (Cerca et al., 2007, Stutz et
al., 2011). Así mismo se considera que el gen bap también codifica una proteína de superficie
importante, denominada "proteína asociada al biofilm"; que más allá de su contribución a la unión
bacteriana inicial, sin embargo, se ha demostrado que esta proteína es capaz de inducir la producción
de slime para la adhesión intercelular del polisacárido poli-N-acetilglucosamina de manera
independiente, especialmente en superficies inertes (Latasa et al., 2006). Finalmente, el gen eno
codifica una proteína de superficie de unión al slime (Carneiro et al., 2004).
       Se ha demostrado que la producción de biofilm se produce durante las fases de replicación
de la bacteria. En la fase de invasión, los factores asociados a la pared celular facilitan la unión al
epitelio glandular, así como la evasión del sistema inmune del hospedero, permitiendo que el S.
aureus se acumulen y formen el biofilm. Mientras que, en la fase de replicación las bacterias
secretan un gran número de proteínas y al mismo tiempo los factores asociados a la pared bacteriana
van disminuyendo, provocando que la formación del biofilm mejore y se dé la diseminación
bacteriana dentro de tejido mamario (Novick, 2003). La producción de biofilm está controlada por
diversos mecanismos, que permiten estratégicamente la adhesión, invasión y proliferación
microbiana. La función de estos sistemas de regulación se da como respuesta a la densidad de las
células bacterianas y a factores ambientales con lo cual se aseguran las condiciones adecuadas para
la supervivencia bacteriana (Wang y Muir, 2016).

6 IMPORTANCIA EN LA MASTITIS SUBCLÍNICA Y CLÍNICA EN OVEJAS
       La mastitis producida por S. aureus en ovejas se estudió por primera vez dos siglos atrás por
el francés Edmund Nocard, quien considero a la enfermedad como una plaga de los rebaños de

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producción de leche para elaborar quesos; afirmando que no era raro ver a una décima parte de las
ovejas afectadas y las que se recuperan, inevitablemente perdían su producción de leche. Además
de que todos los tratamientos dados no tenían éxito (Vasileiou et al., 2019)
       La mastitis es una enfermedad más importante en los rebaños de ovejas. Los casos clínicos
suelen ser graves; con signos sistémicos presentes y condición de dolor. Las glándulas clínicamente
afectadas sufren mucho daño tisular y nunca recuperan su producción de leche cotidiana. Otras
perdidas se dan por el sacrificio de ovejas productoras de leche y la pérdida de peso en los corderos,
además de los costos del tratamiento La producción de leche reducida conduce a una disminución
del crecimiento de los corderos. La mastitis clínica en ovejas se ha atribuido principalmente a
infección intramamaria (IMI) por S. aureus y en menor medida a patógenos ambientales. Algunos
reportes indican que el aislamiento de esta bacteria se da hasta en el 70% de los casos en animales
con mastitis clínica de rebaños de producción lechera (Mork et al., 2007). También se ha reportado
que el riesgo de incidencia puede alcanzar hasta 7% de las ovejas en lactancia. Mientras que, en los
rebaños de producción de carne, se ha reportado que esta bacteria es menos frecuente, pero siguen
siendo responsables de hasta el 40% de los casos de la IIM (Arsenault et al., 2008).
       Se ha considerado que la mastitis subclínica es más común que la enfermedad clínica. Los
criterios empleados para la definición de mastitis subclínica son importantes para determinar su
prevalencia; en algunos estudios de campo en los que se utilizaron criterios estrictos de evaluación
la prevalencia de mastitis subclínica fue del 26%, mientras que en otros se encontró que la
prevalencia puede llegar al 40%, aunque se ha cuestionado la precisión de la detección de casos
(Vasileiou et al., 2018b). Sin embargo, se han dado informes de aparición epidémica de mastitis
subclínica en rebaños en los que la prevalencia de la enfermedad es del 94%, con todos los casos
causados por bacterias del género Staphylococcus sp. (Fthenakis et al., 2004).
       Existe claro consenso en que las especies de SCN son los principales agentes etiológicos de
la mastitis subclínica y pueden constituir hasta el 70% de los aislamientos bacterianos de casos de
esta enfermedad (Gelasakis et al., 2015). Siendo las especies de SCN que más frecuentemente se
aíslan en casos de mastitis subclínica fueron S. chromogenes, S. epidermidis, S. simulans y S.
xylosus. Sin embargo, el S. aureus sigue siendo un importante agente patógeno en la presentación
de mastitis subclínica esto debido a la expresión de factores de virulencia como lo es la formación
de biofilm, el cual puede contribuir a la persistencia de la infección en el epitelio de la GM y como
contaminante de los utensilios, instalaciones y maquinaria de ordeña, esta premisa ha sido
demostrada ya que hay reportes de que el S. aureus también se ha aislado como agente causante de
mastitis subclínica, pero con menos frecuencia que en los casos de enfermedad clínica; aunque se

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ha informado que de forma esporádica este microorganismo puede representarse hasta en el 40% de
los aislamientos de casos de mastitis subclínica (Vasileiou et al., 2018 b).
       La importancia que la presentación de mastitis clínica y subclínica asociada a S. aureus tiene
está relacionada directamente con la reducción de la producción y la calidad de la leche en las ovejas,
así mismo se ha reportado con la reducción de la producción de leche por la oveja durante el primer
mes de lactancia influye directamente en el crecimiento de los corderos antes del destete,
aumentando la mortalidad de estos por inanición en los rebaños de ovejas productoras de carne
(Vasileiou et al., 2019). Fthenakis et al., 2004, por su parte reportaron que en ovejas con mastitis
subclínica inducida experimentalmente por estafilococos, el peso de los corderos fue
significativamente menor a los 52 días de edad en comparación con las ovejas del grupo control y
que el consumo de alimento solido por estos corderos fue mayor. Aunque no se encontró asociación
entre el crecimiento de los corderos y el grado de mastitis subclínica, cuando los corderos tenían
acceso a alimento suplementario.

7 IMPORTANCIA EN LA PRODUCCIÓN DE LECHE DE OVEJAS
       El S. aureus es reconocido por producir diversas enfermedades en los animales y en el
hombre estos atributos del microorganismo son relacionados a su capacidad para expresar factores
de virulencia que le permitan la invasión y supervivencia en el órgano blanco (Otto 2008). Uno de
los factores de virulencia que el S. aureus tiene la capacidad de producir es el biofilm, el cual facilita
la adhesión inicial de la bacteria al epitelio, disminuye la concentración de antibióticos dentro de la
colonia, promueve la multiplicación y mejora la supervivencia de las bacterias invasoras. En las
ovejas la mastitis es la enfermedad más comúnmente asociada a este microorganismo. Los casos
clínicos de la enfermedad suelen ser graves; donde la GM afectada sufren daño parcial o completo
de forma irreversible evitando que la ubre realice su función normal: por lo que la producción de
leche se ve afectada significativamente o definitivamente, incluso se dan casos en los que la afección
por este microorganismo en la ubre es tan grave que se tiene que sacrificar a las ovejas infectadas
(Mork et al., 2007). La mayoría de los productores de leche ovina dependen directamente de su
producción y de la elaboración de quesos, por lo tanto, la salud de la ubre es un factor crítico y, en
consecuencia, el control de las infecciones intramamarias (IMI) es de la mayor importancia para los
productores de leche (Marogna et al., 2010; Gelasakis et al., 2015).
       También se ha reportado que el desarrollo e implementación de programas de control de
mastitis producida por S. aureus en rebaños de ovinos productores de leche y productores de carne,
se dificulta cuando existe contaminación del rebaño por cepas de S. aureus productoras de biofilm,
ya que contribuye con resistencia a los antimicrobianos y a la severidad de la infección, lo que puede

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a aumentar los costos de producción por la disminución de la producción de leche y desecho y
sacrificio de animales infectados; por lo que se debe realizar una evaluación minuciosa entre las
pérdidas económicas atribuidas a la mastitis tanto clínica como subclínica por agente de importancia
epidémica como los S. aureus formadores de biofilm; así mismo el conocimiento de los factores de
riesgo asociados a los agentes etiológicos presentes en la explotación es muy importante para
realización de medidas de control específicas y eficaces. Por tanto, la mastitis producida por S.
aureus tiene un impacto importante tanto en la economía del productor, como en el bienestar animal
en la producción leche ovina (Vasileiou et al., 2019; Arsenault et al., 2008).

8 RESISTENCIA A LOS ANTIBIÓTICOS POR STAPHYLOCOCCUS AUREUS
FORMADORES DE BIOFILM
       Un atributo importante de la mayoría de las especies de estafilococos (incluido S. aureus) es
su amplia capacidad para desarrollar con bastante rapidez resistencia a los agentes antimicrobianos.
Hoy en día los estafilococos resistentes a múltiples fármacos se recuperan comúnmente de muestras
clínicas del hombre y los animales (Mediavilla et al., 2012).
       La tolerancia o resistencia a los antibióticos se relaciona directamente con la expresión
genética de cada aislamiento de manera individual ya que pueden desarrollar mutaciones y
reordenamientos específicos dentro de su genoma o también por la adquisición de genes de
resistencia. Existen un amplio espectro de variantes genéticas en los microorganismos, aunado a
esto la subadministración de los antibióticos contribuyen significativamente a la formación de
resistencia. La mayoría de los genes de resistencia del material genético en los estafilococos se
encuentran en áreas altamente mutables como son las islas genómicas, plásmidos, entre otros, que
promueven la aparición de mutaciones que conducen a la resistencia a los antibióticos (Foster,
2017).). También se ha reportado que durante las coinfecciones, se puede tener lugar la transferencia
genética, ya que los componentes de resistencia esenciales pueden transferirse fácilmente de forma
horizontal. Finalmente, también se ha encontrado que se puede dar la transferencia genética de genes
específicos de resistencia entre bacterias pertenecientes a diferentes géneros y especies bacterianas,
inclusos entre fagos y bacterias (Haaber et al., 2017).
       En general, los mecanismos de resistencia a los antibióticos desarrollados por diferentes
cepas de S. aureus son: modulaciones en la permeabilidad de la pared celular, inactivación
enzimática del agente antimicrobiano, modificación de la diana del antibiótico y activación del flujo
bacteriano relevante bombas. Dependiendo de la cepa específica, pueden estar involucrados uno o
más de estos mecanismos de resistencia.

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       Unos de los mecanismos más importantes y de gran relevancia durante los últimos tiempos
en cuanto a la resistencia a los antibióticos se refiere es la formación de biofilm, La importancia de
las infecciones por S. aureus productores de biofilms radica en que no son eliminadas fácilmente
debido a que son más resistentes a los antibióticos que las cepas que no forman biofilm. En
diferentes pruebas de susceptibilidad con modelos de biofilms in vitro han mostrado la
sobrevivencia de estas después de tratamiento con antimicrobianos muy por encima de las
concentraciones inhibitoria mínima utilizada para las bacterias suspendidas en un cultivo (Penesyan
et al., 2015). También se ha reportado que las bacterias productoras de biofilm tienen una tasa de
mutación mucho mayor de hasta 100 veces mayor que las células planctónicas, lo que conduce a un
desarrollo más rápido de mutantes resistente a los antibióticos. Por otra parte, la proximidad de los
organismos microbianos dentro del biofilm y la abundancia de eDNA (DNA exógeno) facilitan la
transferencia horizontal de genes y la adquisición y propagación de determinantes de resistencia.
De hecho, se ha demostrado que las bacterias productoras de biofilms pueden constituir focos
específicos de la adaptación y la evolución genética, que conduce a la selección de subpoblaciones
con una mayor capacidad para adquirir resistencia a los antibióticos y a partir de eDNA dentro de
las colonias (Loera et al., 2012). Hoy en día se sabe que las cepas de S. aureus productoras de
biofilms producen resistencia a los antibióticos por mecanismos convencionales e inusuales, ya que
los biofilms otorgan a las bacterias que los producen ventajas micro-medio ambientales
significativas que les confiere mayor protección frente a los antimicrobianos (Caldas, 2015). Por
ello es de gran importancia el conocer el estatus de infección por S. aureus formadores o no
formadores de biofilm en rebaños ovinos para llevar a cabo un mejor control y así combatirlo de
manera exitosa.

9 CONCLUSIONES
       La mastitis es la enfermedad de mayor importancia en la producción de leche y corderos
para la engorda, debido a los efectos que produce en la glándula mamaria y como consecuencia en
la salud del rebaño. La mastitis provocada por S. aureus formadores de biofilm en ovejas
productoras de leche es un tema de mucha importancia debido al impacto en la producción y en el
bienestar animal, así como en el incremento en los costos de producción por el fracaso el el
tratamiento de esta y por el desecho temprano y mortalidad de las ovejas en producción, así como
el retraso en el crecimiento y la mortandad de los corderos durante la lactación.
       Por si mismo la infección por S. aureus representa un gran desafío dentro de los rebaños
productores de leche, aunado a esto la contaminación del rebaño por cepas productoras de biofilm
acrecentar el riesgo de resistencia a los tratamientos y las pérdidas económicas para los productores.

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por ellos es preciso continuar con los estudios que proporcionen instrumentos que permitan combatir
a las bacterias formadoras de biofilm en sus diferentes etapas; seguir trabajando para lograr descifrar
como se da la expresión génica de estas bacterias, que son sin duda un importante factor de riesgo
y de esta forma poder prevenir el proceso infeccioso en la glándula mamaria.
       En la práctica clínica es conveniente tener en cuenta que estas bacterias pueden colonizar
instalaciones, equipos de ordeño, tanques de almacenamiento e incluso las manos del ordeñador
convirtiéndolas en bacterias de importancia en salud pública.

                                              AGRADECIMIENTOS
Al Consejo mexiquense se ciencia y tecnología (COMECYT) por el apoyo “Cátedras COMECYT-
2021”, otorgado para la realización del proyecto de investigación “Caracterización de los genotipos
capsulares cap 5 y 8 de Stahylococcus aureus en aislamientos obtenidos de vacas lecheras y ovejas,
asociados a la colonización de la glándula mamaria y el desarrollo de la mastitis subclínica”. Folio
de aprobación: CAT2021-0077.

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